Then isopropyl b-D-1-thiogalactopyr

Then isopropyl b-D-1-thiogalactopyranoside (Sigma-
Aldrich, MO) was added to give a final concentration of 1 mM to
induce protein expression. Cells were harvested by centrifugation
for 20 min at 8000 rpm after 5 h of expression. For large-scale
expression a Bioflo 3000 (New Brunswick Scientific, NJ) fermentor
was used. The pellet was resuspended in denaturing buffer
(100 mM NaH2PO4, 10 mM Tris–HCl, 8 M urea) and stirred overnight
at 4 C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จากนั้นไอโซโพรพิ BD-1-thiogalactopyranoside (Sigma-
ดิช, มิสซูรี่) ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อให้มีความเข้มข้นสุดท้ายของ 1
มิลลิที่จะก่อให้เกิดการแสดงออกของโปรตีน เซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยง
20 นาทีที่ 8000 รอบต่อนาทีหลังจาก 5 ชั่วโมงในการแสดงออก สำหรับขนาดใหญ่แสดงออก BioFlo 3000 (New Brunswick วิทยาศาสตร์, นิวเจอร์ซีย์) ถังหมักที่ใช้ เม็ดถูก resuspended ใน denaturing บัฟเฟอร์(100 มิลลิ NaH2PO4 10 มิลลิ Tris-HCl, 8 M ยูเรีย) และกวนข้ามคืนที่4 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แล้ว b-d-1-thiogalactopyranoside isopropyl ( ซิกมา - อัลดริช
โม ) ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อให้ความเข้มข้นสุดท้าย 1 มม.
กระตุ้นการแสดงออกของโปรตีน เซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยวโดยปั่น
20 นาทีที่ 8000 รอบต่อนาที หลังจาก 5 ชั่วโมงของการแสดงออก สำหรับขนาดใหญ่
การแสดงออกเป็น bioflo 3000 ( บรุนซ์ใหม่ทางวิทยาศาสตร์ , NJ ) ถังหมัก
ถูกใช้ เม็ดเป็น resuspended ในบัฟเฟอร์
( 100 มม. nah2po4 ี่ ,10 มม. นอกจากนี้ – HCl , 8 M ยูเรีย ) และแบบค้างคืน
ที่ 4  C