When leaf samples collected in spri

When leaf samples collected in spring were used for the uRT-PCR and mRT-PCR assays, repeated tests confirmed that the detection of ASGV in leaves of pear and apple was very reliable. Surprisingly,poor mRT-PCR efficiency for ASGV was observed when the dormant bark samples of apple and pear were used. However, the mRT-PCR assays for ACLSV and ASPV were less affected by using dormant bark samples. The reason might be that the occurrence of ASGV is highly localized in host tissues as indicated in previous reports(Knapp et al., 1995, 1998) and a lower ASGV titer in dormant barks of both pear and apple. Therefore, although the tests using bark materials can be carried out over the full year, as that indicated in the previous studies (Menzel et al., 2002; Hassan et al., 2006), the results obtained at different sampling times might be variable. Pear,especially its old tissues, is rich in polysaccharides and polyphenols,which strongly interfered in the amplification efficiency (Demekeand Adams, 1992; Staub et al., 1995; Pandey et al., 1996). Therefore,young leaves in spring were the most suitable materials for RT-PCR detection of those viruses. Furthermore, although previous studies reported the simultaneous detection of two viruses (Menzel et al.,2002) and four viruses (Hassan et al., 2006) infecting apple and pear, their optimized reaction conditions largely depended on the results obtained by using infected apple materials. These protocols frequently failed in the detection viruses in some pear plants (asshown in Fig. S1) due to low virus titer, or high divergence of pear viruses, or some other reasons.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เมื่อใช้ตัวอย่างใบไม้ที่เก็บในฤดูใบไม้ผลิสำหรับ assays uRT PCR และ mRT PCR ทดสอบซ้ำยืนยันว่า การตรวจพบ ASGV ในใบแอปเปิ้ลและลูกแพร์น่าเชื่อถือ จู่ ๆ ประสิทธิภาพดี mRT-PCR สำหรับ ASGV ถูกตรวจสอบเมื่อใช้ตัวอย่างเฉย ๆ เปลือกแอปเปิ้ลและลูกแพร์ อย่างไรก็ตาม assays mRT PCR สำหรับ ACLSV และ ASPV ได้น้อยได้รับผลกระทบ โดยใช้ตัวอย่างเปลือกเฉย ๆ เหตุผลอาจที่เกิด ASGV เป็นคำภาษาท้องถิ่นในเนื้อเยื่อของโฮสต์ตามที่ระบุในรายงานก่อนหน้านี้ (Knapp และ al., 1995, 1998) และเป็น titer ASGV ล่างในเปลือกเฉย ๆ ของลูกแพร์และแอปเปิลได้ ดังนั้น แม้ว่าการทดสอบโดยใช้เปลือก วัสดุสามารถทำผ่านปีเต็ม ตามที่ระบุไว้ในการศึกษาก่อนหน้า (Menzel และ al., 2002 Hassan et al., 2006), ผลได้รับเวลาสุ่มตัวอย่างที่แตกต่างกันอาจเป็นตัวแปร ลูกแพร์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งของเก่าเนื้อเยื่อ มี polysaccharides และโพลีฟีน ซึ่งขอติดในประสิทธิภาพขยาย (Demekeand Adams, 1992 Staub และ al., 1995 Pandey et al., 1996) ดังนั้น ใบอ่อนในฤดูใบไม้ผลิได้วัสดุเหมาะสมที่สุดสำหรับ RT-PCR ตรวจหาไวรัส นอกจากนี้ แม้ว่าก่อนหน้านี้ศึกษารายงานการตรวจพบพร้อมกันสองไวรัส (Menzel และ al., 2002) และไวรัส 4 (Hassan et al., 2006) ติดแอปเปิ้ลและลูกแพร์ ปฏิกิริยาของพวกเขาให้เหมาะสภาพส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับผลได้รับ โดยใช้วัสดุแอปเปิ้ลติดไวรัส โพรโทคอเหล่านี้มักจะล้มเหลวในการตรวจหาไวรัสในพืชบางต้นแพร์ (asshown ในฟิก S1) เนื่องจากไวรัสต่ำ titer หรือสูง divergence ของลูกแพร์ไวรัส หรือเหตุผลอื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เมื่อเก็บตัวอย่างใบในฤดูใบไม้ผลิที่ใช้สำหรับ Urt-PCR และ MRT-PCR ตรวจการทดสอบซ้ำแล้วซ้ำอีกได้รับการยืนยันว่าการตรวจสอบของ ASGV ในใบของลูกแพร์และแอปเปิ้ลเป็นที่น่าเชื่อถือมาก น่าแปลกที่ไม่ดีมีประสิทธิภาพ MRT-PCR เพื่อ ASGV ก็สังเกตเห็นเมื่ออยู่เฉยๆตัวอย่างเปลือกแอปเปิ้ลและลูกแพร์ถูกนำมาใช้ อย่างไรก็ตามการตรวจ MRT-PCR เพื่อ ACLSV ASPV และได้รับผลกระทบน้อยลงโดยใช้ตัวอย่างเปลือกอยู่เฉยๆ เหตุผลที่อาจเป็นไปได้ว่าการเกิดขึ้นของ ASGV เป็นภาษาท้องถิ่นอย่างสูงในเนื้อเยื่อโฮสต์ตามที่ระบุไว้ในรายงานก่อนหน้านี้ (แนปเอตอัล. 1995, 1998) และ titer ASGV ต่ำกว่าในเปลือกอยู่เฉยๆของทั้งสองลูกแพร์และแอปเปิ้ล ดังนั้นถึงแม้ว่าการทดสอบโดยใช้วัสดุเปลือกสามารถดำเนินการได้ในช่วงปีที่เต็มรูปแบบเป็นที่ที่ระบุไว้ในการศึกษาก่อนหน้านี้ (Menzel et al, 2002;.. ฮัสซันและอัล, 2006) ผลที่ได้รับในช่วงเวลาที่แตกต่างกันการเก็บตัวอย่างอาจจะมีตัวแปร . ลูกแพร์, โดยเฉพาะอย่างยิ่งเนื้อเยื่อเก่าของมันอุดมไปด้วย polysaccharides และโพลีฟีนซึ่งขอแทรกแซงในการขยายประสิทธิภาพ (Demekeand อดัมส์, 1992;. Staub และคณะ, 1995;. Pandey และคณะ, 1996) ดังนั้นใบอ่อนในฤดูใบไม้ผลิเป็นวัสดุที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการตรวจสอบ RT-PCR ของไวรัสที่ นอกจากนี้แม้ว่าการศึกษาก่อนหน้ารายงานการตรวจสอบพร้อมกันของสองไวรัส (M​​enzel et al,., 2002) และสี่ไวรัส (เอตอัลฮัสซัน. 2006) แอปเปิ้ลลูกแพร์และติดเงื่อนไขปฏิกิริยาของพวกเขาที่ดีที่สุดส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับผลลัพธ์ที่ได้โดยใช้แอปเปิ้ลที่ติดเชื้อ วัสดุ โปรโตคอลเหล่านี้ล้มเหลวบ่อยครั้งในการตรวจจับไวรัสในพืชบางลูกแพร์ (asshown ในรูป. S1) เนื่องจากการ titer ต่ำไวรัสหรือความแตกต่างสูงของไวรัสลูกแพร์หรือบางเหตุผลอื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เมื่อตัวอย่างใบที่เก็บในฤดูใบไม้ผลิที่ใช้สำหรับ URT PCR และ MRT PCR ตรวจซ้ำผลการทดสอบยืนยันว่า การตรวจสอบของ asgv ในใบของแอปเปิ้ลและลูกแพร์เป็นที่เชื่อถือได้มาก จู่ ๆ ประสิทธิภาพโดย MRT ที่ยากจน asgv พบเมื่อเคลื่อนตัวอย่างเปลือกของแอปเปิ้ลและลูกแพร์มาใช้ อย่างไรก็ตาม สำหรับ aclsv MRT PCR ) และได้รับผลกระทบน้อยลงโดยการใช้ตัวอย่าง aspv เห่าเคลื่อนเหตุผลอาจจะเกิด asgv ขอแปลเป็นภาษาท้องถิ่นในเนื้อเยื่อโฮสต์ตามที่ระบุในรายงานก่อนหน้า ( Knapp et al . , 1995 , 1998 ) และลดระดับ asgv ในเคลื่อนเปลือกทั้งแอปเปิ้ลและลูกแพร์ ดังนั้น ถึงแม้ว่าการทดสอบโดยใช้วัสดุเปลือกสามารถดำเนินการได้กว่าหนึ่งปีเต็ม ที่พบในการศึกษาก่อนหน้านี้ ( Menzel et al . , 2002 ; ฮัสซาน et al . , 2006 )ผลลัพธ์ที่ได้ในเวลาที่ต่างกันและอาจจะมีตัวแปร ลูกแพร์ , โดยเฉพาะอย่างยิ่งการแก่เนื้อเยื่อ อุดมไปด้วยโพลีแซคคาไรด์และโพลีฟีนอล ซึ่งขอเข้ามาแทรกแซงโดยการเพิ่มประสิทธิภาพ ( demekeand อดัมส์ , 1992 ; สต๊อบ et al . , 1995 ; เดย์ et al . , 1996 ) ดังนั้น ใบอ่อนในฤดูใบไม้ผลิเป็นวัสดุที่เหมาะสมที่สุดสำหรับวิธีการตรวจหาไวรัสเหล่านั้น นอกจากนี้แม้ว่าการศึกษาก่อนหน้านี้รายงานการตรวจสอบพร้อมกันสองไวรัส ( Menzel et al . , 2002 ) และไวรัส ( Hassan et al . , 2006 ) ติดแอปเปิ้ลและลูกแพร์ที่เหมาะสมของปฏิกิริยาเงื่อนไขส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับผลลัพธ์ที่ได้จากการใช้วัสดุแอปเปิ้ลที่ติดเชื้อ โปรโตคอลเหล่านี้มักล้มเหลวในการตรวจหาไวรัสในพืชลูกแพร์ ( ในรูป asshown S1 ) เนื่องจากไวรัสระดับต่ำความแตกต่างของไวรัสสูง หรือลูกแพร์ หรือบางเหตุผลอื่น ๆ .