2.1. MicroalgaeThe microalgae used

2.1. Microalgae
The microalgae used for the experiment was kindly provided by Solix BioSystems (Solix BioSystems
Inc., USA). The microalgae strain used for this study was Botryococcus braunii
2.2. Conventional solvent extraction
Protocols used for solvent extraction were based on those reported by Bligh and Dyer [25]. The
solvent used was a mixture of 2:1 chloroform and methanol. Dried algae samples of approximately 5g mass were mixed with 100mL of solvent and soaked overnight. Solids were removed by filtration and the solvent extract was mixed with ~ 50 mL 0.9% NaCl in a separator funnel and allowed to stand overnight.After separation of the organic phase from brine, the solvent was removed by rotary evaporator. Four replicates of each solvent system were evaluated and the results averaged. Lipid percentage was determined by comparing the extracted algal oil mass to initial dried sample mass.
2.3. Supercritical fluid extraction
Carbon dioxide was supplied with a purity of 99.995% from Linde Gases LTDA. Supercritical carbon
dioxide extractions were performed at the temperature range 50 – 85ºC and pressures range of
200 – 250 bar. These extraction conditions were chosen taking into account previous work reported for the extraction of lipids from other microalgae [26-28].

2.4. Fatty acid analysis
Lipid extracts were transmethylated with methanol-acethyl chloride, as described by Lepage and Roy[29], in the presence of an appropriate amount of heptadecanoic acid as an internal standard. The methylester were then analyzed on a 7890 Agilent gas chromatograph (GC), equipped with a flame ionization detector. Separation was carried out on 0.32 mm x 30 m fused silica capillary column (0.32 μm filmthickness) Sulpelcowax 10 (Supelco, Bellafonte PA, USA) with helium as carrier gas at a flow rate of 3.5 ml/min. The column temperature was programmed at an initial temperature of 200ºC for 8 min, then increased at 4ºC/min to 240ºC and held there for 8 min. Injector and detector temperatures were 250 and 280ºC, respectively and split ratio was 1:50. FAMEs were identified and their response factors calculated by comparing peak areas of known quantities of authentic standards (Supelco) to the internal standard,heptadecanoic acid. Averages of duplicate injections were reported.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.1 สาหร่ายสาหร่ายที่ใช้ในการทดลองให้ความกรุณาโดย Solix Biosystems (Solix Biosystems อิงค์สหรัฐอเมริกา) สายพันธุ์สาหร่ายที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้มี Botryococcus braunii 2.2 สกัดธรรมดาโปรโตคอลที่ใช้ในการสกัดด้วยตัวทำละลายอยู่บนพื้นฐานของผู้ที่รายงานโดยไบลห์และย้อม [25] ตัวทำละลายที่ใช้เป็นส่วนผสมของ 2: 1 คลอโรฟอร์มและเมทานอล ตัวอย่างสาหร่ายอบแห้งที่มีมวลประมาณ 5g ถูกผสมกับ 100mL ตัวทำละลายและแช่ในชั่วข้ามคืน ของแข็งถูกถอดออกโดยการกรองและสารสกัดจากตัวทำละลายผสมกับ ~ 50 มล 0.9% โซเดียมคลอไรด์ในช่องทางแยกและอนุญาตให้ยืน overnight.After แยกเฟสอินทรีย์จากน้ำเกลือตัวทำละลายจะถูกลบออกจากเครื่องระเหยแบบหมุน สี่ซ้ำของแต่ละระบบตัวทำละลายได้รับการประเมินและผลเฉลี่ย เปอร์เซ็นต์ไขมันถูกกำหนดโดยการเปรียบเทียบมวลน้ำมันสกัดสาหร่ายที่จะเริ่มต้นมวลตัวอย่างแห้ง. 2.3 การสกัดของเหลว supercritical ก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ได้มาพร้อมกับความบริสุทธิ์ของ 99.995% จาก Linde แก๊ส LTDA คาร์บอน supercritical สกัดก๊าซได้ดำเนินการในช่วงอุณหภูมิ 50 - 85ºCและช่วงแรงกดดันจาก200-250 บาร์ เงื่อนไขการสกัดเหล่านี้ได้รับการแต่งตั้งโดยคำนึงถึงการทำงานก่อนหน้ารายงานการสกัดไขมันจากสาหร่ายทะเลขนาดเล็กอื่น ๆ [26-28]. 2.4 การวิเคราะห์กรดไขมันสารสกัดจากไขมันถูก transmethylated กับเมทานอลคลอไรด์-acethyl ตามที่อธิบาย Lepage และรอย [29] ในการปรากฏตัวของปริมาณที่เหมาะสมของกรด heptadecanoic เป็นมาตรฐานภายใน Methylester วิเคราะห์ในก๊าซ Chromatograph Agilent 7890 (GC) พร้อมกับเครื่องตรวจจับไอออนไนซ์เปลวไฟ แยกได้ดำเนินการใน 0.32 mm x 30 เมตรคอลัมน์ฝอยผสมซิลิกา (0.32 ไมโครเมตร filmthickness) Sulpelcowax 10 (Supelco, Bellafonte PA, USA) กับฮีเลียมเป็นก๊าซที่อัตราการไหล 3.5 มล. / นาที อุณหภูมิเป็นโปรแกรมที่อุณหภูมิเริ่มต้นคอลัมน์200ºCเป็นเวลา 8 นาทีจากนั้นเพิ่มขึ้นใน4ºC / นาทีถึง240ºCและจัดขึ้นที่นั่นเป็นเวลา 8 นาที หัวฉีดและอุณหภูมิที่ตรวจจับได้ 250 และ280ºCตามลำดับและอัตราแยกเป็น 01:50 FAMEs ถูกระบุและปัจจัยการตอบสนองของพวกเขาคำนวณโดยการเปรียบเทียบพื้นที่จุดสูงสุดของปริมาณที่รู้จักกันของมาตรฐานที่แท้จริง (Supelco) มาตรฐานภายในกรด heptadecanoic ค่าเฉลี่ยของการฉีดซ้ำได้รับรายงาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.1 . สาหร่ายขนาดเล็ก
สาหร่ายขนาดเล็กที่ใช้สำหรับการทดลองที่กรุณาให้ solix BIOSYSTEMS ( solix Biosystems
Inc . , USA ) ส่วนสาหร่ายสายพันธุ์ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ คือ botryococcus braunii
2.2 . ปกติตัวทำละลายการสกัด
โปรโตคอลใช้สำหรับการสกัดด้วยตัวทำละลายตามที่รายงานโดยการประเมิน Dyer [ 25 ]
ตัวทำละลายที่ใช้เป็นส่วนผสมของ : คลอโรฟอร์ม และเมทานอลตัวอย่างของสาหร่ายแห้งประมาณ 5G มวลผสม 100ml ของตัวทำละลายและแช่ค้างคืน ของแข็งออกโดยการกรองและการแยกตัวทำละลายผสมกับ ~ 50 ml 0.9% NaCl ในกั้นกรวย และได้รับอนุญาตให้ยืนเพียงชั่วข้ามคืน หลังจากการแยกเฟสอินทรีย์จากน้ำเกลือละลายออกด้วยเครื่องระเหย4 ซ้ำแต่ละตัวทำละลายและระบบประเมินผลเฉลี่ย เปอร์เซ็นต์ไขมันถูกกำหนดโดยการเปรียบเทียบสารสกัดสาหร่ายน้ำมันมวลเริ่มต้นแห้งตัวอย่างมวล .
2.3 การสกัด supercritical fluid
ก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ที่ถูกจัดกับความบริสุทธิ์ของ 99.995 % จากลินเด้แก๊ส Ltda .
- คาร์บอนการสกัดก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์จำนวนที่ช่วงอุณหภูมิ 50 - 85 º C และความดันช่วง
200 – 250 บาร์ การสกัดเหล่านี้ได้รับเลือกพิจารณาก่อนหน้านี้ทำงานรายงานสำหรับการสกัดลิปิดจากสาหร่ายและ [ อื่นๆ ] .

2.4 . การวิเคราะห์กรดไขมันไขมันสารสกัดด้วยเมทานอล (
transmethylated เซทิลคลอไรด์ , ตามที่อธิบายไว้โดย Lepage รอย [ 29 ]ในการแสดงตนของปริมาณที่เหมาะสมของกรด heptadecanoic เป็นมาตรฐานภายใน พวกม 7890 Agilent วิเคราะห์ในแก๊สโครมาโตกราฟ ( GC ) พร้อมกับเฟลมไอออไนเซชันตรวจจับ การกระทำที่ 0.32 มม. X 30 เมตรคอลัมน์ซิลิกาหลอดเลือดฝอย ( 0.32 μ M filmthickness ) sulpelcowax 10 ( supelco bellafonte , PA ,สหรัฐอเมริกา ) เป็นผู้ให้บริการก๊าซฮีเลี่ยมที่อัตราการ ไหลของ 3.5 มล. / นาที คอลัมน์อุณหภูมิเป็นโปรแกรมที่อุณหภูมิเริ่มต้น 200 º C เป็นเวลา 8 นาที จากนั้นเพิ่มเป็น 4 ºองศาเซลเซียส / นาที 240 º C และจัดมี 8 นาทีและอุณหภูมิเครื่องหัวฉีดจำนวน 250 280 ºองศาเซลเซียส ตามลำดับ และ แบ่งสัดส่วนเป็น 1 : 50สารและการตอบสนองของพวกเขาถูกระบุปัจจัยที่คำนวณโดยการเปรียบเทียบยอดพื้นที่รู้จักปริมาณมาตรฐานของแท้ ( supelco ) มาตรฐาน ภายใน heptadecanoic กรด ค่าเฉลี่ยของการฉีดซ้ำได้รายงาน