Few biological markers of immune function have been
thoroughly validated for use in epidemiologic studies
that involve delayed sample processing and analysis.
Here, we report our validation results for flow cytometric detection of intracellular T-helper 1/T-helper
2 (Th1/Th2) cytokines using 500 ML of whole blood
obtained from children and adults. The detection of
Th1/Th2 cytokine profiles by flow cytometry is a practical and mechanistically relevant assay because dysregulated cytokine production has been observed in
many immune-mediated disorders, including cancer.
We evaluated the intraassay and intraindividual and
interindividual variability and the effects of a 24- to
72-hour delayed analysis on Th1 and Th2 end points.
We compared the distributions of %CD4 lymphocytes,
%Th1, and %Th2 in young children (age 1 year, n = 50)
and adults (age 25–52 years, n = 16). Subjects sampled
monthly for up to 1 year showed minimal variation in
CD4, Th1, and Th2 end points. Delayed analysis of
samples (up to 24 hours) resulted in no significant
differences in the expression of CD4, Th1, and Th2;
however, at 48 and 72 hours, all end points differed
significantly from baseline (P < 0.01). A random effects
model confirmed that interindividual variability was
much greater than intraindividual variability for CD4
and Th1. Compared with adults, children had marginally higher %CD4, similar %Th2, but significantly
lower %Th1 (P < 0.01). These results show that flow
cytometric detection of CD4, Th1, and Th2 markers
using whole blood is reproducible and that these
biomarkers can be effectively used in human population studies that involve transported samples, delayed
processing and analysis, and limited blood volumes.
ไม่กี่เครื่องหมายทางชีววิทยาของภูมิคุ้มกันได้
อย่างละเอียดตรวจสอบเพื่อใช้ในการศึกษาทางระบาดวิทยา
ที่เกี่ยวข้องล่าช้าการประมวลผลตัวอย่างและการวิเคราะห์
ที่นี่เรารายงานผลการตรวจสอบของเราเพื่อตรวจจับการไหล t-helper 1 / t-helper
2 ( th1 / th2 ) ชนิดที่ใช้ 500 มิลลิลิตรของเลือดทั้งหมด
ที่ได้รับจากเด็กและผู้ใหญ่ การตรวจหา
th1 / th2 โปรไฟล์โดยไซโตไคน์ ( ไหลในทางปฏิบัติ และ mechanistically ที่เกี่ยวข้อง ( เพราะ dysregulated การผลิตไซโตไคน์ที่ได้รับการตรวจสอบใน immune-mediated
หลายโรค รวมทั้งมะเร็ง
เราประเมิน intraassay ภายในตัวบุคคลและ
interindividual และแปรปรวน และผลกระทบจาก 24 - 72 ชั่วโมง
ล่าช้าการวิเคราะห์ th1 และจุดสิ้นสุด
th2 .เปรียบเทียบการกระจายของ % CD4 เม็ดเลือดขาว
% th1 , % th2 ในเด็กเล็ก ( อายุ 1 ปี , n = 50 )
และผู้ใหญ่ ( อายุ 25 – 52 ปี , n = 16 ) วิชาตัวอย่าง
รายเดือนถึง 1 ปี พบน้อยที่สุดในการ
CD4 , th1 และจุดสิ้นสุด th2 . ล่าช้าการวิเคราะห์
ตัวอย่าง ( ตลอด 24 ชั่วโมง ) ทำให้ไม่พบความแตกต่างในการแสดงออกของซีดีโฟว์
,
th1 และ th2 ; อย่างไรก็ตาม , 48 และ 72 ชั่วโมงจุดสุดท้ายมี
อย่างมากจากพื้นฐาน ( P < 0.01 ) แบบจำลองผล
สุ่ม ยืนยันว่า interindividual แปรปรวนคือ
มากขึ้นกว่าความแปรปรวนภายในตัวบุคคลและสำหรับค่า
th1 . เมื่อเทียบกับผู้ใหญ่ เด็กก็เร่งขึ้น % CD4 , th2 คล้ายกัน % แต่อย่างมาก
th1 ลดเปอร์เซ็นต์ ( P < 0.01 ) ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าการไหลเพื่อการตรวจหา CD4 th1
, ,
th2 และเครื่องหมายใช้เลือดทั้งการหาที่ใหม่เหล่านี้
สามารถใช้อย่างมีประสิทธิภาพในมนุษย์การศึกษาประชากรที่เกี่ยวข้องกับการขนส่งล่าช้า
การประมวลผลและการวิเคราะห์ตัวอย่างเลือด และจำกัดปริมาณการ .
การแปล กรุณารอสักครู่..