Arabinose was shown to serve as an

Arabinose was shown to serve as an effective inducer for induction of the lac-derived promoters in Escherichia coli using penicillin acylase (PAC) as a model protein. Upon the induction with a conventional inducer, isopropyl-beta-d-thiogalactopyranoside (IPTG), for pac overexpression, which is regulated by the trc or (DE3)/T7 promoter, the production of PAC was limited by the accumulation of PAC precursors (proPAC) as inclusion bodies. Negative cellular responses, such as growth inhibition and cell lysis, were frequently observed, resulting in a low pac expression level and poor culture performance. Interestingly, these technical hurdles can be overcome simply through the use of arabinose as an inducer. The results indicate that arabinose not only induced the lac-derived promoter systems (i.e., trc and (DE3)/T7) for pac (or LL pac) overexpression but also facilitated the posttranslational processing of proPAC for maturation. However, the arabinose-inducibility appears to be host-dependent and becomes less observable in the strains with a mutation in the ara operon. The arabinose-inducibility was also investigated in the expression system with the coexistence of the trc promoter system regulating pac expression and another arabinose-inducible promoter system of araB regulating degP coexpression.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Arabinose แสดงเป็น inducer ที่มีประสิทธิภาพสำหรับการเหนี่ยวนำของก่อมาลัคใน Escherichia coli โดยใช้ยาเพนนิซิลลิน acylase (PAC) เป็นโปรตีนรูปแบบ เมื่อเหนี่ยวนำด้วย inducer ธรรมดา isopropyl-เบต้าดี-thiogalactopyranoside (IPTG), สำหรับแพ็ก overexpression ซึ่งจะถูกกำหนด โดย trc หรือ (DE3) / T7 โปรโมเตอร์ ผลิตของ PAC ถูกจำกัด โดยการสะสมของ precursors PAC ที่ (proPAC) เป็นการรวมร่าง ลบตอบโทรศัพท์มือถือ ยับยั้งการเจริญเติบโตและเซลล์ lysis บ่อยสุภัค ในการแพ็กต่ำนิพจน์วัฒนธรรมระดับ และต่ำประสิทธิภาพการ เป็นเรื่องน่าสนใจ อุปสรรคทางเทคนิคเหล่านี้สามารถเอาชนะเพียงแค่โดยใช้ arabinose เป็น inducer ที่ ผลลัพธ์บ่งชี้ arabinose ที่ไม่เพียงทำให้เกิดระบบโปรโมเตอร์มาลัค (เช่น trc และ (DE3) / T7) สำหรับแพ็ก (หรือแพ็ก LL) overexpression แต่ยัง อำนวยความสะดวกการประมวลผล posttranslational ของ proPAC สำหรับพ่อแม่ อย่างไรก็ตาม arabinose inducibility ปรากฏจะขึ้นอยู่กับโฮสต์ และกลายเป็นน้อย observable ในสายพันธุ์ที่ มีการกลายพันธุ์ใน ara operon Arabinose inducibility ยังถูกสอบสวนในระบบนิพจน์ ด้วยมีอยู่ร่วมกันของระบบโปรโมเตอร์ trc ควบคุมแพ็กนิพจน์และระบบโปรโมเตอร์ arabinose inducible อื่นของอาหรับกำกับดูแล degP coexpression

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อราบิโนถูกนำมาแสดงเพื่อทำหน้าที่เป็นสารชักนำที่มีประสิทธิภาพสำหรับการชักนำของโปรโมเตอร์ครั่งมาใน Escherichia coli โดยใช้ยาปฏิชีวนะ acylase (PAC) เป็นโปรตีนรูปแบบ เมื่อเหนี่ยวนำด้วยชักนำธรรมดา isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG) สำหรับแพ็กแสดงออกซึ่งถูกควบคุมโดย TRC หรือ (DE3) / โปรโมเตอร์ T7 การผลิต PAC ถูก จำกัด ด้วยการสะสมของสารตั้งต้น PAC ( PROPAC) ในฐานะหน่วยงานรวม การตอบสนองของเซลล์เชิงลบเช่นการยับยั้งการเจริญเติบโตและสลายเซลล์ที่พบบ่อยมีผลในระดับการแสดงออกของ pac ต่ำและผลการดำเนินงานวัฒนธรรมที่ไม่ดี ที่น่าสนใจเหล่านี้อุปสรรคทางเทคนิคสามารถเอาชนะเพียงแค่ผ่านการใช้ราบิโนสเป็นสารชักนำ ผลการวิจัยพบว่าราบิโนสไม่เพียง แต่การชักนำให้เกิดระบบการก่อการครั่งมา (เช่น TRC และ (DE3) / T7) สำหรับ PAC (หรือ LL แพค) แสดงออก แต่ยังอำนวยความสะดวกในการประมวลผลของ posttranslational PROPAC สำหรับการเจริญเติบโต อย่างไรก็ตามราบิโนส-inducibility ดูเหมือนจะเป็นโฮสต์ขึ้นและจะกลายเป็นที่สังเกตได้น้อยกว่าในสายพันธุ์ที่มีการกลายพันธุ์ใน Operon Ara อราบิโน-inducibility ยังถูกตรวจสอบในระบบของการแสดงออกที่มีอยู่ร่วมกันของระบบการก่อการ TRC การควบคุมการแสดงออกแพ็กและอีกระบบก่อการราบิโนส-inducible อาหรับควบคุม degP coexpression

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โนสเป็นหน้าที่เป็นเอนไซม์ที่มีประสิทธิภาพในการชักนำครั่งได้มาโปรโมเตอร์ใน Escherichia coli ใช้เพนนิซิลลิน ซิเลส ( PAC ) เป็นโปรตีนแบบ เมื่อเหนี่ยวนำด้วยเอนไซม์ปกติ isopropyl-beta-d-thiogalactopyranoside ( เอนไซม์ ) สำหรับแพ็ก overexpression ซึ่งถูกควบคุมโดย TRC หรือ * * 3 ( DE3 ) โปรโมเตอร์การผลิต PAC ( จากการสะสมของ PAC ( propac ) เป็นสารตั้งต้นการรวมร่าง การตอบสนองเชิงลบเซลล์ เช่น การยับยั้งการเจริญเติบโตและการสลายเซลล์ อยู่บ่อย ๆสังเกตผลในระดับต่ำและการแสดงวัฒนธรรมแบบสีหน้าไม่ดี ทั้งนี้ อุปสรรคทางเทคนิคเหล่านี้สามารถเอาชนะได้เพียงแค่ผ่านการใช้น้ำตาลเป็นเอนไซม์ .ผลการศึกษาพบว่าน้ำตาลไม่เพียง แต่กระตุ้นให้ครั่งได้ผู้สนับสนุนระบบ ( เช่น TRC ( DE3 ) * * 3 ) สำหรับ PAC ( หรือจะ PAC ) overexpression แต่ยังสนับสนุนการประมวลผล posttranslational ของ propac สำหรับบ่ม อย่างไรก็ตาม โนส inducibility ปรากฏเป็นเจ้าภาพ และจะสังเกตได้น้อยลงในสายพันธุ์มีการกลายพันธุ์ใน ราโอเปอรอน .น้ำตาล inducibility ที่ศึกษาในระบบการแสดงออกด้วยการอยู่ร่วมกันของระบบการควบคุมระบบ TRC การแสดงออกและอีก inducible โปรโมเตอร์ของอาหรับควบคุมระบบน้ำตาล degp coexpression .