Peroxidase: Leaves were extracted in 0.1 M phosphate
buffer (pH 6.0) with the rate of 0.1 gm leaves per 1 ml buffer,and then centrifuged at 15,000 rpm for 5 min at 4 C. Formation
of tetraguaiacol was performed in a 3 ml reaction mixture
containing: 1 ml of 0.1 M phosphate buffer (pH 6.0), 1 ml of
15 mM 2-methoxyphenol (guaiacol), 1 ml of 3 mM H2O2,
and 15 ll of enzyme extract. Peroxidase activity was
determined at 470 nm with a spectrophotometer (Shimadzu
UV 1201). One unit of peroxidase activity (U) represents the
amount of enzyme catalyzing the oxidation of 1 mol of
guaiacol in 1 min. Note that plant resistance studies were
performed after symptom appearance (about 15 days post viral
inoculation).
b-1,3-glucanase: Leaf samples were extracted in two volumes
of 0.2 M Tris HCl buffer (pH 7.8) containing 14 mM b-mercaptoethanol.
b-1,3-glucanase activity was assayed by incubating
62.5 ll of the leaf homogenate containing the enzyme for 2 h
at 40 C with 62.5 ll of 4% laminarin. The reaction was terminated
by heating the sample in boiling water for 10 min. The
amount of reducing sugar was measured spectrophotometrically
at 492 nm after reaction with 372 ll of 3,5-dinitrosalicylate.
Final activity values are reported as nanokatals (nktal),
defined as the enzyme activity catalyzing the formation of
nmols glucose equivalents (Abeles et al., 1970).
Peroxidase: ใบไม้ถูกสกัดในฟอสเฟต 0.1 Mบัฟเฟอร์ (pH 6.0) อัตรา 0.1 กรัมใบต่อบัฟเฟอร์ 1 ml และ centrifuged แล้ว ที่ 15000 rpm สำหรับ 5 นาทีที่ก่อตัวราว 4ของ tetraguaiacol มีดำเนินการในส่วนผสมปฏิกิริยา 3 mlประกอบด้วย: 1 มิลลิลิตร 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.0), 1 ml ของ15 มม. 2-methoxyphenol (guaiacol), 1 ml 3 มม. H2O2และ 15 จะของเอนไซม์ที่สกัด กิจกรรม peroxidase ถูกกำหนดที่ 470 nm กับเครื่องทดสอบกรดด่าง (ShimadzuUV 1201) หนึ่งหน่วยกิจกรรม peroxidase (U) แทนจำนวนเอนไซม์ catalyzing ออกซิเดชันของ 1 โมลของguaiacol ใน 1 นาทีสังเกตว่าพืชที่ศึกษาความต้านทานได้ดำเนินการหลังจากปรากฏอาการ (ประมาณ 15 วันไวรัสลงinoculation)b 1,3 คัด: ตัวอย่างใบถูกสกัดในไดรฟ์ที่สองของ 0.2 M HCl ทริสเรทติ้งบัฟเฟอร์ (pH 7.8) มี 14 มม. b-mercaptoethanolกิจกรรม b-1,3-คัดถูก assayed โดย incubating62.5 ll homogenate ลีฟประกอบด้วยเอนไซม์สำหรับ 2 hที่ 40 C กับ 62.5 จะ laminarin 4% ปฏิกิริยาที่ถูกยกเลิกโดยตัวอย่างในการต้มน้ำ 10 นาทีความร้อนมีวัดจำนวนลดน้ำตาล spectrophotometricallyที่ 492 nm หลังปฏิกิริยากับ 372 จะ 3,5 dinitrosalicylateมีรายงานค่ากิจกรรมสุดท้าย nanokatals (nktal),กำหนดเป็น catalyzing การก่อตัวของเอนไซม์เทียบเท่าน้ำตาลกลูโคสใน nmols (Abeles et al., 1970)
การแปล กรุณารอสักครู่..

peroxidase: ใบถูกสกัดใน 0.1 M
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์(pH 6.0) ที่มีอัตรา 0.1 กรัมใบต่อ 1 มิลลิลิตรบัฟเฟอร์และปั่นแล้วที่ 15,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 5 นาทีที่ 4
องศาเซลเซียสการก่อตัวของtetraguaiacol ได้ดำเนินการในผสมปฏิกิริยา 3 มล.
มี 1 มล. 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.0) 1 มิลลิลิตร
15 มิลลิ 2 methoxyphenol (guaiacol) 1 มิลลิลิตร 3 มิลลิ H2O2,
และ 15 LL ของสารสกัดเอนไซม์ กิจกรรม peroxidase
ถูกกำหนดที่470 นาโนเมตรที่มีสเปก (Shimadzu
UV 1201) หนึ่งหน่วยของกิจกรรม peroxidase (U)
แสดงให้เห็นถึงปริมาณของเอนไซม์ที่กระตุ้นการเกิดออกซิเดชันของ1 โมลของ
guaiacol ใน 1 นาที หมายเหตุการศึกษาต้านทานพืชที่ได้รับการดำเนินการหลังจากการปรากฏอาการ (ประมาณ 15 วันโพสต์ไวรัสฉีดวัคซีน). B-1,3-glucanase: ตัวอย่างใบถูกสกัดในสองเล่ม0.2 M Tris บัฟเฟอร์ HCl (pH 7.8) ที่มี 14 มิลลิ B-mercaptoethanol . B-1,3-glucanase กิจกรรมได้รับการวิเคราะห์โดยฟัก62.5 LL ของ homogenate ใบที่มีเอนไซม์เป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่40 องศาและมี 62.5 LL 4% laminarin ปฏิกิริยาถูกยกเลิกด้วยความร้อนตัวอย่างในน้ำเดือด 10 นาที ปริมาณน้ำตาลรีดิวซ์วัด spectrophotometrically ที่ 492 นาโนเมตรหลังจากที่ทำปฏิกิริยากับ 372 LL ของ 3,5-dinitrosalicylate. ค่ากิจกรรมรอบชิงชนะเลิศจะมีการรายงานเป็น nanokatals (nktal) กำหนดให้เป็นเอนไซม์เร่งการก่อตัวของnmols เทียบเท่ากลูโคส (Abeles et al, ., 1970)
การแปล กรุณารอสักครู่..
