Use of highly specific, sensitive a

Use of highly specific, sensitive and quantitative Real-Time PCR (qRT-PCR) based methods greatly
facilitate the monitoring of experimental drug intervention and vaccination efficacy targeting liver stage
malaria parasite. Here, in this study we have used qRT-PCR to detect the growing liver stage parasites
following inoculation of Plasmodium yoelii sporozoite. Route of sporozoite administration and size of the
sporozoite inoculums are two major determinants that affect the liver stage parasite load and therefore
its detection and quantification. Thus, these factors need to be addressed to determine the accuracy of
detection and quantification of Real-Time PCR method. Furthermore, applicability of quantitative RT-PCR
system needs to be confirmed by analyzing the effect of different antimalarials on liver stage parasite
burden. We have observed that parasite burden in mice infected via intravenous route was higher
compared to that in subcutaneous, intradermal and intraperitoneal route infected mice. Moreover, this
method detected liver stage parasite load with as low as 50 sporozoites. The inhibition studies with
primaquine and atovaquone revealed inhibition of liver stage parasite and well correlated with patency
and course of blood stage infection. This study characterized the simplicity, accuracy, and quantitative
analysis of liver stage parasite development by real time PCR under different experimental conditions.
Use of real time PCR method greatly improves the reproducibility and applicability to estimate the efficacy
and potency of vaccine or drug candidates targeting liver stage parasite.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การใช้ที่เฉพาะเจาะจงสูงที่มีความสำคัญเชิงปริมาณและ Real-Time PCR (qRT-PCR) ตามวิธีการอย่างมากอำนวยความสะดวกในการตรวจสอบของการแทรกแซงทดลองยาเสพติดและการรับรู้ความสามารถกำหนดเป้าหมายขั้นตอนการฉีดวัคซีนตับปรสิตมาลาเรีย ที่นี่ในการศึกษาครั้งนี้เราได้ใช้ qRT-PCR ในการตรวจสอบขั้นตอนตับปรสิตที่เพิ่มขึ้นต่อไปนี้การฉีดวัคซีนของPlasmodium yoelii sporozoite เส้นทางของการบริหาร sporozoite และขนาดของหัวเชื้อแบคทีเรียsporozoite เป็นสองปัจจัยสำคัญที่มีผลต่อภาระปรสิตเวทีตับและดังนั้นการตรวจสอบและปริมาณ ดังนั้นปัจจัยเหล่านี้จะต้องได้รับการแก้ไขเพื่อตรวจสอบความถูกต้องของการตรวจสอบและการหาปริมาณของวิธี PCR แบบ Real-Time นอกจากนี้การบังคับใช้ของปริมาณ RT-PCR ระบบความต้องการที่จะได้รับการยืนยันโดยการวิเคราะห์ผลกระทบของยาต้านมาลาเรียที่แตกต่างกันบนเวทีปรสิตตับภาระ เราได้ตั้งข้อสังเกตว่าภาระพยาธิในหนูที่ติดเชื้อผ่านเส้นทางทางหลอดเลือดดำสูงเมื่อเทียบกับในใต้ผิวหนัง intradermal และเส้นทางการเข้าช่องท้องหนูที่ติดเชื้อ นอกจากนี้วิธีการตรวจพบพยาธิโหลดเวทีกับตับที่ต่ำเป็น 50 sporozoites การศึกษาการยับยั้งกับPrimaquine และ atovaquone เปิดเผยยับยั้งการปรสิตเวทีตับและมีความสัมพันธ์ดีกับแจ้งชัดและแน่นอนขั้นตอนของการติดเชื้อในเลือด การศึกษาครั้งนี้มีลักษณะเรียบง่ายถูกต้องและปริมาณการวิเคราะห์ขั้นตอนตับพัฒนาพยาธิตามเวลา PCR จริงภายใต้เงื่อนไขการทดลองที่แตกต่างกัน. การใช้วิธีการที่เวลา PCR จริงช่วยเพิ่มการทำสำเนาและการบังคับใช้ในการประเมินประสิทธิภาพและความแรงของการฉีดวัคซีนหรือยากำหนดเป้าหมายตับปรสิตเวที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ใช้เฉพาะอย่าง มีความละเอียดอ่อน และปริมาณเชื้อในเวลาจริง ( ข้าพเจ้าใช้วิธี PCR ) อย่างมาก
ช่วยตรวจสอบและการแทรกแซงยาทดลองวัคซีนประสิทธิภาพเป้าหมายตับขั้น
มาลาเรียปรสิต ที่นี่ ในการศึกษานี้ได้ใช้วิธี PCR เพื่อตรวจหาข้าพเจ้าเติบโตตับปรสิตขั้นตอนต่อไปนี้การ yoelii สปอโรซอยต์ (
.เส้นทางของการบริหารสปอโรซอยต์และขนาดของ
สปอโรซอยท์ 18 ชั่วโมงสองหลักปัจจัยที่มีผลต่อตับและพยาธิระยะของการโหลดจึง
ปริมาณ . ดังนั้น ปัจจัยเหล่านี้ต้อง addressed เพื่อตรวจสอบความถูกต้องของการตรวจหาปริมาณของ
และวิธี PCR แบบเรียลไทม์ นอกจากนี้ การประยุกต์ใช้
วิธีเชิงปริมาณระบบจะต้องมีการยืนยันโดยวิเคราะห์ผลของยารักษามาลาเรียที่แตกต่างกันบนเวทีตับปรสิต
ภาระ เราได้พบว่าในหนูที่ติดเชื้อปรสิตภาระผ่านเส้นทางน้ำสูงกว่า
เมื่อเทียบกับในใต้ผิวหนัง และเส้นทาง intradermal ในหนูทดลองที่ติดเชื้อ . นอกจากนี้ วิธีนี้พบว่าตับปรสิต
เวทีโหลด กับที่ต่ำเป็น 50 สปอโรซอยต์ .การศึกษากับ
ไพรมาควินโตวาโควนเปิดเผยและยับยั้งพยาธิระยะตับและดี มีความสัมพันธ์กับความชัดเจน
และหลักสูตรของเลือดติดเชื้อระยะ การศึกษาลักษณะ ความเรียบง่าย ความแม่นยํา และเชิงปริมาณ การวิเคราะห์การพัฒนาเวที
พยาธิตับ โดยเวลา PCR จริงภายใต้สภาวะการทดลองที่แตกต่างกัน .
ใช้วิธี PCR เวลาจริงช่วยเพิ่มและกระชับความสัมพันธ์กัน เพื่อประมาณค่าความสามารถ และศักยภาพของวัคซีนหรือยา
ผู้สมัครเป้าหมายระยะพยาธิตับ