A total of 18 protease producing ba

A total of 18 protease producing bacterial strains were isolated from detergent effluent in South Korea
using skim milk agar medium. A strain (BK-P21A) was selected and identified as Bacillus koreensis based
on morphological, biochemical and molecular characterizations (16S rRNA gene sequence analysis). Optimized
culture conditions for the production of protease were pH 8.5, 30 ◦C, sucrose (2%) and yeast extract
(0.2%) during 36 h of incubation. Furthermore, the protease was partially purified by ammonium sulphate
precipitation (80%) and again by Superdex 200 10/300 GL and Superdex 75 10/300 GL column chromatography,
which resulted in 5.0 fold purification and a yield of 23%. The molecular mass of the protease was
estimated to be 48 kDa by SDS-PAGE. The purified enzyme was further characterized and found to be most
active at pH 9.0 and 60 ◦C. The activity of the purified protease was enhanced by CaCl2 and CoCl2, but
inhibited by PMSF, which indicated it was a serine type protease. Moreover, the protease was moderately
stable in surfactants and 81% stable in H2O2. Finally, the enzyme was more active and stable (94–126.5%)
in various hydrophilic organic solvents. Considering the stability of protease towards the alkaline pH,
high temperature and organic solvents (50%), the enzyme from B. koreensis can be used as an alternative
biocatalyst for several industrial applications mainly for peptide synthesis in nonaqueous solvents.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

จำนวน 18 รติเอสผลิตสายพันธุ์แบคทีเรียที่แยกจากน้ำผงซักฟอกในประเทศเกาหลีใต้ใช้นม skim agar ปานกลาง เลือก และระบุเป็น koreensis คัดตามต้องใช้ (บีเควีคลี่-P21A)ในสัณฐาน ชีวเคมี และระดับโมเลกุล characterizations (16S rRNA ยีนลำดับวิเคราะห์) ปรับให้เหมาะสมวัฒนธรรมเงื่อนไขสำหรับการผลิตของรติเอสมีค่า pH 8.5, 30 ◦C ซูโครส (2%) และสารสกัดจากยีสต์(0.2%) ระหว่าง h 36 ของคณะทันตแพทยศาสตร์ นอกจากนี้ รติเอสถูกบางส่วนบริสุทธิ์ โดยแอมโมเนียมซัลเฟตฝน (80%) และอีก Superdex 200 10/300 GL และ Superdex 75 10/300 GL chromatography คอลัมน์ซึ่งผลในการฟอกพับ 5.0 และผลผลิตของ 23% มวลโมเลกุลของรติเอสถูกประเมินเป็น kDa 48 โดย SDS-หน้า เอนไซม์บริสุทธิ์เพิ่มเติมลักษณะ และพบเป็นส่วนใหญ่ใช้งานอยู่ที่ pH 9.0 และ 60 ◦C กิจกรรมรติเอสบริสุทธิ์ถูกเพิ่ม โดย CaCl2 และ CoCl2 แต่ห้าม โดย PMSF ซึ่งระบุเป็นรติเอสชนิดแถ นอกจากนี้ รติเอสได้ปานกลางมั่นคงใน surfactants และ 81% คอกใน H2O2 สุดท้าย เอนไซม์ถูกใช้งานมากขึ้น และมีเสถียรภาพ (94 – 126.5%)ในต่าง ๆ hydrophilic อินทรีย์ พิจารณาความมั่นคงของรติเอสต่อ pH ด่างสามารถใช้อุณหภูมิสูงและอินทรีย์ (50%), เอ็นไซม์จาก koreensis เกิดเป็นทางเลือกbiocatalyst สำหรับงานอุตสาหกรรมต่าง ๆ ส่วนใหญ่ใช้สำหรับการสังเคราะห์เพปไทด์ใน nonaqueous หรือสารทำละลาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

รวม 18 โปรติเอสผลิตสายพันธุ์แบคทีเรียที่แยกได้จากน้ำทิ้งผงซักฟอกในเกาหลีใต้
โดยใช้สื่อวุ้นนมพร่องมันเนย สายพันธุ์ (BK-P21A) ได้รับเลือกและระบุว่าเป็น Bacillus koreensis ตาม
ในลักษณะทางสัณฐานวิทยาชีวเคมีและชีวโมเลกุลลักษณะเฉพาะ (16S rRNA วิเคราะห์ลำดับยีน) เพิ่มประสิทธิภาพ
เงื่อนไขวัฒนธรรมในการผลิตเอนไซม์โปรติเอมี pH 8.5 30 ◦Cซูโครส (2%) และสารสกัดจากยีสต์
(0.2%) ในช่วง 36 ชั่วโมงของการบ่ม นอกจากนี้โปรติเอสบริสุทธิ์บางส่วนจากแอมโมเนียมซัลเฟต
ตกตะกอน (80%) และอีกครั้งโดย Superdex 200 GL 10/300 และ 10/300 Superdex 75 GL คอลัมน์,
ซึ่งมีผลในการทำให้บริสุทธิ์ 5.0 เท่าและอัตราผลตอบแทนที่ 23% มวลโมเลกุลของโปรติเอสได้รับการ
คาดว่าจะมี 48 กิโลดาลตันโดยวิธี SDS-PAGE เอนไซม์ก็มีลักษณะต่อไปและพบว่าส่วนใหญ่
ที่ใช้งานอยู่ที่ pH 9.0 และ 60 ◦C กิจกรรมของเอนไซม์โปรติเอบริสุทธิ์ได้รับการปรับปรุงโดย CaCl2 และ COCl2 แต่
ยับยั้งโดย PMSF ซึ่งชี้ให้เห็นว่ามันเป็นโปรติเอสซีรีนชนิด นอกจากนี้โปรตีเอสได้ในระดับปานกลาง
ที่มีความเสถียรในการลดแรงตึงผิวและ 81% มีเสถียรภาพใน H2O2 สุดท้ายเอนไซม์เป็นใช้งานมากขึ้นและมีเสถียรภาพ (94-126.5%)
ในตัวทำละลายอินทรีย์ต่างๆที่ชอบน้ำ พิจารณาความมั่นคงของโปรติเอสที่มีต่อค่าความเป็นกรดด่าง,
อุณหภูมิสูงและตัวทำละลายอินทรีย์ (50%), เอนไซม์จากบี koreensis สามารถใช้เป็นทางเลือก
สำหรับการใช้สารเร่งหลายอุตสาหกรรมส่วนใหญ่สำหรับการสังเคราะห์เปปไทด์ในตัวทำละลายที่มีโครงสร้าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

รวม 18 แบคทีเรียที่ผลิตเอนไซม์โปรติเอสจากน้ำทิ้งแบบเกาหลี
ใช้สกิวุ้นนมขนาดกลาง สายพันธุ์ ( bk-p21a ) ถูกเลือกและระบุเป็นเชื้อ koreensis ตาม
ในลักษณะทางชีวเคมีและโมเลกุล characterizations ( การวิเคราะห์ลำดับยีน 16S rRNA ) เหมาะ
เพาะเลี้ยงเพื่อผลิตโปรตีนที่พีเอช 8.5 , 30 ◦ Cซูโครส ( 2% ) และสารสกัดจากยีสต์
( 0.2% ) ใน 36 ชั่วโมงของการบ่ม นอกจากนี้ โปรตีนยังบริสุทธิ์บางส่วนโดยตกตะกอนด้วยแอมโมเนียมซัลเฟต
( 80% ) และอีกครั้งโดย superdex 200 10 / 300 GL และ superdex 75 10 / 300 GL คอลัมน์ chromatography ,
ซึ่งส่งผลให้เกิด 5.0 พับบริสุทธิ์และผลตอบแทนที่ 23% มวล โมเลกุลของโปรตีนคือ
น่าจะ 48 กิโลดาลตันถูก .เอนไซม์ คือ เพิ่มเติม ลักษณะ และพบว่าถูกใช้งานมากที่สุดที่ pH 9.0 และ 60
◦องศาเซลเซียส กิจกรรมของเอนไซม์โปรติเอสบริสุทธิ์มากขึ้น โดยผลิต cocl2 แต่
ยับยั้ง PMSF ที่พบเป็นชนิดของเอนไซม์โปรติเอส นอกจากนี้ โปรติเอสมี
มั่นคงในสารลดแรงตึงผิวและ 81% มี H2O2 . ในที่สุด , เอนไซม์ที่ใช้งานและมีเสถียรภาพมากขึ้น ( 94 ) 126.5
% )ต่างๆ ในน้ำตัวทำละลายอินทรีย์ . พิจารณาเสถียรภาพของโปรตีนต่อความเป็นกรดด่าง
อุณหภูมิสูงและตัวทำละลายอินทรีย์ ( 50% ) , เอนไซม์จาก B koreensis สามารถใช้เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพทางเลือก
หลายอุตสาหกรรมหลักสำหรับการสังเคราะห์เปปไทด์ใน nonaqueous สารละลาย