Materials and Methods
Postmortem Examination of Fire Salamanders. Six S. salamandra that died in
captivity between November and December 2012 were subject to gross
necropsy, histopathology, and routine bacteriological, mycological, and virological
examinations. Histological examination of liver, spleen, kidney,
lung, gonad, midgut, and skin was done using microscopic examination of
paraffin-embedded, 5-μm tissue sections stained with H&E, Ziehl Neelsen, or
periodic acid shift. A 1:10 (vol:vol) tissue suspension of these organs in PBS
was inoculated on sheep blood and tryptic soy agar and incubated at 20 °C
and 30 °C. A liver suspension was inoculated on IgH2 and RTG cells. PCRs were
performed to detect the presence of herpesviruses (11), adenoviruses (12),
iridoviruses (13), Chlamydiales (14), and B. dendrobatidis (9, 10). Immunohistochemistry
was performed on all skin samples to detect B. dendrobatidis
antigens (8). Transmission electron microscopy of epidermal samples was
performed with glutaraldehyde fixation in 0.05 M sodium cacodylate buffer,
วัสดุและวิธีการตรวจสอบ Postmortem ไฟ Salamanders Salamandra S. 6 ที่เสียชีวิตเชลยระหว่างเดือนพฤศจิกายนและ 2012 ธันวาคมถูกรวมnecropsy จุลพยาธิวิทยา และประจำ bacteriological, mycological และ virologicalตรวจสอบ ตรวจสรีรวิทยาของตับ ม้าม ไตทำปอด gonad, midgut ผิวหนัง และใช้ตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์พาราฟินฝัง 5-μm ส่วนเนื้อเยื่อสี H และ E, Ziehl Neelsen หรือธาตุกรดกะ 1:10 (vol:vol) ระงับเนื้อเยื่อของอวัยวะเหล่านี้ใน PBSinoculated เลือดแกะและถั่วเหลือง tryptic agar และ incubated ที่ 20 ° Cและ 30 องศาเซลเซียส ระบบกันสะเทือนตับถูก inoculated ในเซลล์ IgH2 และเสนอราคา RTG PCRs ได้ดำเนินการตรวจหา herpesviruses (11), adenoviruses (12),iridoviruses (13), Chlamydiales (14), และ (9, 10) เกิด dendrobatidis Immunohistochemistryทำตามทุกอย่างผิวการเกิด dendrobatidisantigens (8) ส่งอิเล็กตรอน microscopy epidermal อย่างถูกดำเนินการกับเบี glutaraldehyde 0.05 M โซเดียม cacodylate บัฟเฟอร์
การแปล กรุณารอสักครู่..

วัสดุและวิธีการ
ตรวจสอบการชันสูตรศพของไฟซาลาแมนเด หก Salamandra เอสที่เสียชีวิตใน
การถูกจับกุมระหว่างเดือนพฤศจิกายนและธันวาคม 2012 เป็นเรื่องที่ขั้นต้น
ชันสูตรพยาธิสภาพและแบคทีเรียประจำเห็ดราและไวรัสวิทยา
สอบ การตรวจสอบทางจุลกายวิภาคของตับ, ม้าม, ไต,
ปอด, อวัยวะสืบพันธุ์, กระเพาะและผิวได้รับการดำเนินการโดยใช้การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ของ
พาราฟินฝัง 5 ไมครอนส่วนเนื้อเยื่อย้อมด้วย H & E, Ziehl Neelsen หรือ
เปลี่ยนกรดเป็นระยะ ๆ 01:10 (ฉบับ: ปริมาตร) ระงับเนื้อเยื่อของอวัยวะเหล่านี้ในพีบีเอส
ได้รับเชื้อในเลือดแกะและวุ้นถั่วเหลือง tryptic และบ่มที่ 20 ° C
และ 30 ° C ระงับตับได้รับเชื้อใน IgH2 และ RTG เซลล์ PCRs ได้
ดำเนินการเพื่อตรวจสอบสถานะของ herpesviruses (11), อะดีโนไวรัส (12),
iridoviruses (13), Chlamydiales (14) และบี dendrobatidis (9, 10) immunohistochemistry
ได้รับการดำเนินการในทุกตัวอย่างผิวหนังเพื่อตรวจหา B. dendrobatidis
แอนติเจน (8) การส่งผ่านกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนตัวอย่างผิวหนังถูก
ดำเนินการกับ glutaraldehyde ตรึงในบัฟเฟอร์ cacodylate 0.05 M โซเดียม
การแปล กรุณารอสักครู่..

วัสดุและวิธีการ
การชันสูตรของซาลาแมนเดอร์ไฟ 6 . salamandra
เชลยที่ตายในเดือนพฤศจิกายน 2012 เป็นเรื่องรวม
สาเหตุการเปลี่ยนแปลงและรูทีนแบคทีเรียเห็ดราและไวรัสวิทยา
, สอบ ผลการตรวจตับ ม้าม ไต ปอดท้องน้อย
, , ประสิทธิภาพและเหมาะสม และผิว โดยใช้การตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์ของ
พาราฟินฝังตัว 5 - μเนื้อเยื่อส่วนที่เปื้อน& M H E , ซิล neelsen หรือ
Periodic acid กะ เป็น 1 : 10 ( Vol : Vol ) ช่วงล่าง เนื้อเยื่อของอวัยวะเหล่านี้ใน PBS
เป็นเชื้อในเลือดแกะและอาหารวุ้นถั่วเหลือง และบ่มที่อุณหภูมิ 20 ° C
และ 30 องศา เป็นตับแหนบเป็นเชื้อใน igh2 RTG และเซลล์ pcrs ถูก
ดำเนินการตรวจสอบการแสดงตนของเลิฟเทกส์ไทม์ ( 11 ) ( 12 ) ,
อะดีโนไวรัสiridoviruses ( 13 ) , chlamydiales ( 14 ) , และ dendrobatidis ( 9 , 10 ) หลอด
แสดงทุกตัวอย่างผิวหนังเพื่อตรวจหาแอนติเจน B dendrobatidis
( 8 ) ส่งกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนตัวอย่าง epidermal คือ
ใช้ glutaraldehyde ใน 0.05 M รึงโซเดียม จากนั้นนำสารบัฟเฟอร์
การแปล กรุณารอสักครู่..
