In this study, a systematic evaluat

In this study, a systematic evaluation of core–shell particle columns for improved analysis and separation of RNA oligonucleotide samples by IP-RPLC compared various core–shell particle columns with differing particle and pore sizes. The results showed significant improvement in peak shape and separation of closely eluting impurities for the core–shell columns when analyzing RNA oligonucleotide samples.

The comparison results for core–shell (Kinetex C18 column) and fully-porous particles (Luna C18 (2) column) showed much narrower peak width (base) for core–shell particles (0.10 min compared to 0.17 min for fully-porous particles). This resulted in significant improvement in separation when using core–shell particles, where fully-porous particles provided resolution of about 1.1 for the separation of the impurity eluting on the tail of the main peak, and core–shell particles provided much improved resolution of about 2.0.

The comparison of different core–shell C18 columns showed the best peak shape with Kinetex XB-C18 column, where peak widths (base) for the main component were 0.26 min for Ascentis Express C18 column, 0.18 min for Poroshell EC-C18 column and 0.13 min for the Kinetex XB-C18 column. The more recent sub-2 m core–shell Kinetex C18 column provided even greater separation efficiency where more peaks could be separated from the complex peak clusters for these samples.

However, the significant extra column volume contributions from the conventional HPLC instruments need to be considered. With careful modifications to the instrument to minimize the extra column volume contributions, the sub-2 m core–shell particles columns can be used with conventional HPLC instruments for improved analysis and separation of oligonucleotide samples.

All of these columns, however, showed only modest long-term stability at the operating conditions of neutral pH mobile phase and elevated column temperatures of 60 ◦C or higher. Nevertheless, the significant improvement in performance of the core–shell particles, combined with the rapid technological advances and improvements in this new class of stationary phase particles, suggest a promising future for improved oligonucleotide separations.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในการศึกษานี้ ประเมินระบบของอนุภาคหลักเชลล์คอลัมน์สำหรับปรับปรุงการวิเคราะห์ และแยกอย่าง oligonucleotide อาร์เอ็นเอโดย IP RPLC เปรียบเทียบต่าง ๆ อนุภาคหลักเชลล์คอลัมน์ มีขนาดอนุภาคและรูพรุนที่แตกต่างกัน ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญในช่วงรูปร่างและแบ่งแยก eluting สิ่งสกปรกสำหรับคอลัมน์หลักเชลล์อย่างใกล้ชิดเมื่อวิเคราะห์ตัวอย่าง oligonucleotide อาร์เอ็นเอ ผลการเปรียบเทียบที่หลักเชลล์ (คอลัมน์ Kinetex C18) และอนุภาคอย่าง porous (Luna C18 คอลัมน์ (2)) พบว่าช่วงความกว้างที่แคบลงมาก (พื้นฐาน) สำหรับอนุภาคหลักเชลล์ (0.10 ต่ำสุดเมื่อเทียบกับ 0.17 นาทีสำหรับอนุภาคทั้งหมด porous) นี้ผลในการปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญในแยกเมื่อใช้อนุภาคหลักเชลล์ ที่อนุภาคทั้งหมด porous ให้ความละเอียดเกี่ยวกับ 1.1 แบ่งแยก eluting มลทินบนหางของพีคหลัก และอนุภาคหลัก – เปลือกให้ละเอียดดีขึ้นมากของประมาณ 2.0 การเปรียบเทียบคอลัมน์ C18 หลักเชลล์ต่าง ๆ แสดงให้เห็นว่ารูปร่างสูงสุด ด้วยคอลัมน์ Kinetex XB C18 ที่ peak ความกว้าง (ฐาน) สำหรับส่วนประกอบหลักได้ต่ำสุดที่ 0.26 สำหรับคอลัมน์ C18 เอ็กซ์เพรส Ascentis, 0.18 นาที สำหรับคอลัมน์ Poroshell EC-C18 และ 0.13 นาทีสำหรับคอลัมน์ Kinetex XB-C18 คอลัมน์ Kinetex C18 หลักเชลล์ย่อย 2 เมตรล่าสุดให้ประสิทธิภาพการแยกยิ่งที่สามารถแยกยอดเพิ่มเติมจากคลัสเตอร์สูงสุดที่ซับซ้อนตัวอย่างเหล่านี้ อย่างไรก็ตาม การจัดสรรปริมาณคอลัมน์สำคัญเพิ่มเติมจากเครื่อง HPLC ปกติจำเป็นต้องพิจารณาการ มีปรับเปลี่ยนระวังเครื่องมือเพื่อลดการจัดสรรปริมาณคอลัมน์พิเศษ สามารถใช้กับเครื่องมือ HPLC ธรรมดาคอลัมน์หลักเชลล์อนุภาคย่อย 2 m วิเคราะห์ปรับปรุงและแยกอย่าง oligonucleotide ทั้งหมดของคอลัมน์เหล่านี้ อย่างไรก็ตาม พบเฉพาะเจียมเนื้อเจียมตัวระยะยาวความมั่นคงที่เงื่อนไขการดำเนินงานของเฟสเคลื่อนที่ค่า pH เป็นกลางและคอลัมน์สูงอุณหภูมิ 60 ◦C หรือสูงกว่า อย่างไรก็ตาม การปรับปรุงที่สำคัญในประสิทธิภาพของอนุภาคหลักเชลล์ รวมกับความก้าวหน้าทางเทคโนโลยีอย่างรวดเร็วและปรับปรุงในชั้นนี้ใหม่ของอนุภาคระยะเครื่องเขียน แนะนำอนาคตสัญญาหา oligonucleotide ปรับปรุง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในการศึกษานี้เป็นระบบการประเมินผลของคอลัมน์อนุภาคหลักเปลือกสำหรับการวิเคราะห์ที่ดีขึ้นและการแยกตัวอย่าง oligonucleotide RNA โดย IP-RPLC เทียบคอลัมน์อนุภาคหลักเปลือกต่างๆที่มีอนุภาคที่แตกต่างกันและขนาดรูขุมขน ผลการศึกษาพบการปรับปรุงที่สำคัญในรูปร่างสูงสุดและแยกสิ่งสกปรก eluting อย่างใกล้ชิดสำหรับคอลัมน์หลักเปลือกเมื่อวิเคราะห์ตัวอย่าง oligonucleotide RNA. ผลการเปรียบเทียบหลักเปลือก (Kinetex คอลัมน์ C18) และอนุภาคที่มีรูพรุนเต็ม (Luna C18 (2) คอลัมน์ ) ที่แสดงให้เห็นความกว้างสูงสุดที่แคบมาก (ฐาน) สำหรับอนุภาคหลักเปลือก (0.10 นาทีเมื่อเทียบกับ 0.17 นาทีสำหรับอนุภาคที่มีรูพรุนเต็ม) ส่งผลให้การปรับปรุงที่สำคัญในการคัดแยกเมื่อใช้อนุภาคแกนเปลือกที่อนุภาคที่มีรูพรุนเต็มให้ความละเอียดประมาณ 1.1 สำหรับการแยกสิ่งเจือปน eluting บนหางของยอดเขาหลักและอนุภาคแกนเปลือกให้ละเอียดมากขึ้นเกี่ยวกับ 2.0. การเปรียบเทียบของคอลัมน์ C18 หลักเปลือกที่แตกต่างกันแสดงให้เห็นรูปร่างที่ดีที่สุดกับจุดสูงสุด Kinetex คอลัมน์ XB-C18 ที่มีความกว้างสูงสุด (ฐาน) สำหรับองค์ประกอบหลักเป็น 0.26 นาที Ascentis ด่วนคอลัมน์ C18, 0.18 นาทีสำหรับคอลัมน์ Poroshell EC-C18 และ 0.13 นาทีคอลัมน์ Kinetex XB-C18 อื่น ๆ ที่ผ่านมาย่อย 2 เมตรคอลัมน์หลักเปลือก Kinetex C18 ให้ประสิทธิภาพในการแยกที่ยิ่งใหญ่กว่าที่ยอดมากขึ้นอาจจะแยกออกจากกลุ่มสูงสุดที่ซับซ้อนสำหรับตัวอย่างเหล่านี้. แต่ผลงานที่สำคัญปริมาณคอลัมน์พิเศษจากเครื่องมือ HPLC ธรรมดาจะต้องมี การพิจารณา มีการปรับเปลี่ยนเครื่องมือระมัดระวังในการที่จะลดปริมาณผลงานคอลัมน์พิเศษย่อย 2 เมตรคอลัมน์อนุภาคแกนเปลือกสามารถนำมาใช้กับเครื่องมือ HPLC ธรรมดาสำหรับการวิเคราะห์ที่ดีขึ้นและการแยกตัวอย่าง oligonucleotide. ทั้งหมดของคอลัมน์เหล่านี้ แต่แสดงให้เห็นเท่านั้น เจียมเนื้อเจียมตัวมั่นคงในระยะยาวที่สภาพการทำงานของค่า pH เป็นกลางเฟสเคลื่อนที่และอุณหภูมิคอลัมน์สูง 60 ◦Cหรือสูงกว่า อย่างไรก็ตามการปรับปรุงที่สำคัญในการทำงานของอนุภาคแกนเปลือกรวมกับความก้าวหน้าทางเทคโนโลยีอย่างรวดเร็วและการปรับปรุงในระดับใหม่นี้ของอนุภาคเฟสแนะนำแนวโน้มในอนาคตสำหรับการแยก oligonucleotide ดีขึ้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในการศึกษานี้ , การประเมินผลอย่างเป็นระบบและอนุภาคแกนเปลือกคอลัมน์สำหรับการวิเคราะห์ที่ดีขึ้นและการแยกของตัวอย่าง RNA โดยเปรียบเทียบต่าง ๆ ซึ่ง ip-rplc แกนและเปลือกอนุภาคอนุภาค และคอลัมน์ที่มีรูขุมขนขนาดผลการปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญในรูปร่างสูงสุด และแยกสิ่งเจือปนในหลักอย่างใกล้ชิด hexane –กะลาคอลัมน์เมื่อวิเคราะห์ตัวอย่างซึ่ง RNA

การเปรียบเทียบผลเปลือกและแก่น ( คอลัมน์ kinetex c18 ) และอนุภาคเต็มรูพรุน ( ลูน่า c18 ( 2 ) คอลัมน์ ) พบมากช่วงแคบกว้าง ( ฐาน ) สำหรับหลัก–กะลาอนุภาค ( 0.10 นาทีเมื่อเทียบกับ 017 นาทีสำหรับอนุภาคเต็มรูพรุน ) นี้ส่งผลในการปรับปรุงที่สำคัญในการแยกเมื่อใช้แกนและเปลือกอนุภาคที่ให้ความละเอียดของอนุภาคเต็มรูพรุนประมาณ 1.1 สำหรับการแยกบริสุทธิ์ hexane บนหางของยอดเขาหลักและแกนและเปลือกอนุภาคให้มากขึ้นความละเอียดประมาณ 2.0

การเปรียบเทียบที่แตกต่างกันแกน–กะลา c18 คอลัมน์พบที่สุดยอดรูปร่างกับคอลัมน์ kinetex xb-c18 ที่ความกว้างสูงสุด ( ฐาน ) สำหรับองค์ประกอบหลักเป็น 0.26 นาที ascentis แสดงคอลัมน์ c18 0.18 นาทีสำหรับคอลัมน์ poroshell ec-c18 และ 0.13 มินกับ kinetex xb-c18 คอลัมน์ล่าสุด sub-2  M หลัก kinetex กะลา– c18 คอลัมน์ให้ยิ่งแยกประสิทธิภาพที่ยอดมากอาจแยกออกจากซับซ้อนสูงสุดกลุ่มตัวอย่างเหล่านี้

แต่ปริมาณคอลัมน์สำคัญพิเศษสมทบจากเครื่องมือ HPLC ปกติต้องได้รับการพิจารณาระวังการปรับเปลี่ยนและลดการเขียนปริมาณคอลัมน์พิเศษ , sub-2  M หลัก–กะลาอนุภาคคอลัมน์สามารถใช้เครื่องมือ HPLC ทั่วไปสำหรับการวิเคราะห์ที่ดีขึ้นและการแยกของตัวอย่างซึ่ง .

ของคอลัมน์เหล่านี้ อย่างไรก็ตามมีเสถียรภาพระยะยาวเจียมเนื้อเจียมตัวในเงื่อนไขของคอลัมน์ pH เป็นกลางเฟสเคลื่อนที่ และยกระดับอุณหภูมิ 60 ◦ C หรือสูงกว่า อย่างไรก็ตาม การปรับปรุงที่สำคัญในประสิทธิภาพของแกนและเปลือกอนุภาคบวกกับความก้าวหน้าทางเทคโนโลยีและการปรับปรุงอย่างรวดเร็วในชั้นเรียนใหม่ของอนุภาคเฟสเครื่องเขียนแนะนำให้อนาคตดีขึ้น ซึ่งการแยก .