Reverse phase HPLC using a Zorbax S

Reverse phase HPLC using a Zorbax SB-C18 column(4.6 mm  50 mm, 1.8 lm particle size, Agilent, USA) was used toquantify L-5-MTHF according to (Liu et al., 2012). L-5-MTHF in the phosphate buffer, grape must and wine were diluted with HEPES/CHES buffer (0.5 M, pH 7.85) with 2% NaAsc and eluted using a gradient of acetonitrile (ACN) and 1.0% formic acid: 0–1 min, 5% ACN; 1–3 min, 5–15% ACN; 3–5 min, 15–70% ACN; 5–6 min, 70% ACN; 6–7 min, 70–5% and maintained at 5% ACN for 1 min before the assay was terminated. L-5-MTHF was detected using a fluorescent detector (excitation at 290 nm and emission at 365 nm). The retention time of L-5-MTHF was 2.4 min. Concentrations were calculated on the basis of the peak area in comparison to L-5-MTHF standard solutions

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กลับเฟส HPLC โดยใช้คอลัมน์ Zorbax SB-C18 (4.6 มม. 50 มม. 1.8 lm ขนาดอนุภาค Agilent สหรัฐอเมริกา) ถูกใช้ toquantify L-5-MTHF ตาม (หลิว et al., 2012) L-5-MTHF ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ต้ององุ่น และไวน์ที่ผสมกับบัฟเฟอร์ HEPES/บำรุง ทรวงอก (0.5 M, pH 7.85) กับ 2% NaAsc eluted ใช้ไล่ acetonitrile (ACN) และ 1.0% กรด: 0 – 1 นาที 5% ACN 1 – 3 นาที 5 – 15% ACN 3 – 5 นาที 15 – 70% ACN 5 – 6 นาที 70% ACN 6 – 7 นาที 70 – 5% และคงที่ 5% ACN สำหรับ 1 นาทีก่อนทดสอบการหยุดชะงัก L-5-MTHF พบใช้จับเรืองแสง (ในการกระตุ้นที่ 290 nm และมลพิษที่ 365 nm) เวลาเก็บรักษาของ L-5 MTHF มีความเข้มข้นต่ำสุด 2.4 ได้คำนวณพื้นที่สูงสุดโดยโซลูชั่นมาตรฐาน L-5 MTHF

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ขั้นตอนการย้อนกลับ HPLC โดยใช้คอลัมน์ Zorbax SB-C18 (4.6 มิลลิเมตร 50 มิลลิเมตร 1.8 ไมครอนขนาดอนุภาค Agilent, สหรัฐอเมริกา) ใช้ toquantify L-5-MTHF ตาม (Liu et al., 2012) L-5-MTHF ในบัฟเฟอร์ฟอสเฟตองุ่นและไวน์ต้องถูกเจือจางด้วยบัฟเฟอร์ HEPES / CHES (0.5 M ค่า pH 7.85) กับ 2% NaAsc และใช้ชะลาด acetonitrile (ที่ ACN) และ 1.0% กรด: 0- 1 นาที, 5% ACN; 1-3 นาที, 5-15% ACN; 3-5 นาที, 15-70% ACN; 5-6 นาที, 70% ACN; 6-7 นาที, 70-5% และการบำรุงรักษาที่ 5% ACN เป็นเวลา 1 นาทีก่อนที่จะทดสอบถูกยกเลิก L-5-MTHF ถูกตรวจพบโดยใช้เครื่องตรวจจับเรืองแสง (การกระตุ้นที่ 290 นาโนเมตรและการปล่อยที่ 365 นาโนเมตร) เวลาการเก็บรักษาของ L-5-MTHF เป็น 2.4 นาที ความเข้มข้นจะถูกคำนวณบนพื้นฐานของพื้นที่จุดสูงสุดเมื่อเทียบกับ L-5-MTHF โซลูชั่นมาตรฐาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โดยขั้นตอนย้อนกลับโดยใช้ zorbax sb-c18 คอลัมน์ ( 4.6 มม.  50 mm 1.8 LM , อนุภาค , Agilent , USA ) ใช้ toquantify l-5-mthf ตาม ( Liu et al . , 2012 ) l-5-mthf ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ , องุ่นและไวน์ก็ต้องเจือจางด้วยฮีเปส / เชษฐ์ บัฟเฟอร์ ( 0.5 M Ph 7.85 ) ร้อยละ 2 และ naasc ตัวอย่างโดยใช้ความลาดชันไน ( ACN ) และ 1.0 % กรด : 0 – 1 นาที , 5 % ACN 1 – 3 นาที 5 – 15 % ACN ;3 – 5 นาที 15 – 70% ACN ; 5 – 6 นาที 70 % ACN ; 6 – 7 นาที 70 – 5% และเก็บรักษาไว้ที่ 5% ACN สำหรับ 1 นาทีก่อนที่จะ ( ถูกยกเลิก l-5-mthf ตรวจโดยใช้เครื่องตรวจจับเรืองแสง ( แบบที่ 290 nm และการปล่อยที่ 365 nm ) ในเวลาของ l-5-mthf คือ 2.4 นาที โดยมีการคำนวณบนพื้นฐานของพื้นที่ l-5-mthf โซลูชั่นมาตรฐานสูงสุดในการเปรียบเทียบ