2.2. Toxicity assaysFor the toxicol

2.2. Toxicity assays

For the toxicological assays, analytical grade pure chemicals were used as source of metal ions: cadmium chloride (CdCl2·2.5 H2O), copper chloride (CuCl2·2H2O), potassium dichromate (K2Cr2O7), nickel (II) chloride (NiCl2·6H2O), and lead chloride (PbCl2). Stock solutions of heavy metals were obtained by dissolving in distilled water and the pH of the tested solutions was adjusted to 7.0. Heavy metal solutions at the final concentrations were obtained adding the same mineral water used for ciliate culture.

For each ciliate species, a different set of metal concentrations in geometrical scale was used, covering the range of mortality from zero to 100%. A minimum of five test concentrations was run. Tissue culture plates with 24 wells were employed. For each concentration three replicates were run, and 24 organisms per replicate were used. Results from the replicates for each species × concentration were averaged. The ciliates were picked from the culture with a micropipette, washed in filtered mineral water (filter pore size 0.45 μm), and individually inoculated into each well (16-mm diameter containing 1 ml of heavy metal solution). As a control, 12 ciliate cells were inoculated into 12 wells containing 1 ml of metal-free medium. Ciliates were not fed during the tests. Mortality or survivorship was checked 24 h after the inoculation under a Wild stereomicroscope at low magnification (30–50×). Cells unable to swim or creep on the bottom of the well, together with disappeared cells, were regarded as dead. For each metal, the median lethal concentration (24-h LC50) was determined using the probit method (Finney, 1971).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2. toxicity assaysสำหรับ toxicological assays สารเคมีบริสุทธิ์เกรดวิเคราะห์ถูกใช้เป็นแหล่งของประจุโลหะ: แคดเมียมคลอไรด์ (CdCl2·2.5 H2O), คลอไรด์ทองแดง (CuCl2·2H2O), โพแทสเซียม dichromate (K2Cr2O7), นิกเกิล (II) คลอไรด์ (NiCl2·6H2O), และรอคลอไรด์ (PbCl2) โซลูชั่นหุ้นของโลหะหนักที่ได้รับ โดยยุบในน้ำกลั่น และปรับ pH ในโซลูชั่นทดสอบได้ 7.0 โลหะหนักโซลูชั่นที่ความเข้มข้นสุดท้ายได้รับเพิ่มน้ำแร่เดียวกันที่ใช้ในวัฒนธรรม ciliateสำหรับแต่ละชนิด ciliate ความเข้มข้นของโลหะใน geometrical ชุดอื่นใช้ ครอบคลุมช่วงของการตายจากศูนย์ 100% อย่างน้อย 5 ทดสอบความเข้มข้นถูกเรียกใช้ เยื่อแผ่น มี 24 บ่อถูกจ้าง สำหรับแต่ละความเข้มข้น เหมือนกับสามถูกใช้ และใช้ชีวิต 24 ต่อจำลอง ผลจากการคัดลอกตัวเองสำหรับแต่ละชนิดในความเข้มข้นได้ averaged Ciliates ได้รับจากวัฒนธรรมด้วย micropipette การ ล้างในน้ำแร่กรอง (กรองรูพรุนขนาด 0.45 μm), และ inoculated แยกเป็นแต่ละดี (16 มม.เส้นผ่าศูนย์กลางประกอบด้วย 1 ml ของโลหะหนัก) เป็นตัวควบคุม เซลล์ ciliate 12 ได้ inoculated เป็นบ่อ 12 ประกอบด้วย 1 ml ของกลางโลหะฟรี Ciliates ได้ไม่เลี้ยงในระหว่างการทดสอบ การตายหรือตกทอดได้รับ 24 ชมหลังจาก inoculation ภายใต้ stereomicroscope ป่าที่ขยายต่ำ (30-50 ราย) ไม่สามารถว่ายน้ำ หรือคืบด้านล่างดี พร้อมกับการหายตัวไปเซลล์ เซลล์ถูกถือว่าตาย สำหรับโลหะแต่ละ เข้มข้นยุทธภัณฑ์มัธยฐาน (24 h LC50) ที่ถูกกำหนดโดยใช้วิธี probit (Finney, 1971)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 การวิเคราะห์ความเป็นพิษสำหรับการตรวจทางพิษวิทยาในการวิเคราะห์สารเคมีบริสุทธิ์เกรดถูกนำมาใช้เป็นแหล่งที่มาของโลหะไอออน: คลอไรด์แคดเมียม (CdCl2 · 2.5 H2O) คลอไรด์ทองแดง (CuCl2 · 2H2O) โพแทสเซียม dichromate (K2Cr2O7) นิกเกิล (II) คลอไรด์ (NiCl2 · 6H2O) และคลอไรด์ตะกั่ว (PbCl2) การแก้ปัญหาสต็อกของโลหะหนักที่ได้รับโดยการละลายในน้ำกลั่นและค่า pH ของโซลูชั่นการทดสอบที่ถูกปรับ 7.0 โซลูชั่นโลหะหนักที่มีความเข้มข้นสุดท้ายที่ได้รับการเพิ่มน้ำแร่เดียวกับที่ใช้สำหรับการเพาะเลี้ยงโปรโตซัว. สำหรับสายพันธุ์ ciliate แต่ละชุดที่แตกต่างกันของความเข้มข้นของโลหะในระดับเรขาคณิตที่ใช้ครอบคลุมช่วงของการเสียชีวิตจากศูนย์ถึงผล 100% อย่างน้อยห้าความเข้มข้นของการทดสอบที่ถูกเรียกใช้ จานเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อที่มี 24 หลุมที่ถูกว่าจ้าง สำหรับแต่ละความเข้มข้นซ้ำสามวิ่งและ 24 ต่อสิ่งมีชีวิตถูกนำมาใช้ซ้ำ ผลจากการซ้ำสำหรับแต่ละชนิดเข้มข้น×ถูกเฉลี่ย ciliates ถูกเลือกจากการเพาะเลี้ยงที่มีไมโครที่ล้างในน้ำแร่กรอง (กรองขนาดรูพรุน 0.45 ไมครอน) และเชื้อเป็นรายบุคคลในแต่ละดี (เส้นผ่าศูนย์กลาง 16 มมมี 1 มิลลิลิตรของสารละลายโลหะหนัก) เป็นตัวควบคุม 12 เซลล์ ciliate ถูกเชื้อเป็น 12 หลุมที่มี 1 มิลลิลิตรของกลางโลหะฟรี ciliates ไม่ได้ถูกเลี้ยงในระหว่างการทดสอบ การตายหรือรอดถูกตรวจสอบตลอด 24 ชั่วโมงหลังจากการฉีดวัคซีนภายใต้สเตอริโอป่าที่กำลังขยายต่ำ (30-50 ×) เซลล์ไม่สามารถว่ายน้ำหรือคืบที่ด้านล่างของดีร่วมกับเซลล์หายไปถูกมองว่าเป็นตาย สำหรับโลหะแต่ละความเข้มข้นเฉลี่ยตาย (24 ชั่วโมง LC50) ถูกกำหนดโดยใช้วิธีการ probit นี้ (ฟินนีย์, 1971)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . ความเป็นพิษ )

สำหรับตรวจทางพิษวิทยา สารเคมีเกรดวิเคราะห์บริสุทธิ์ถูกใช้เป็นแหล่งของไอออนโลหะแคดเมียมคลอไรด์ ( cdcl2 ด้วย 2.5 H2O ) , ทองแดง คลอไรด์ ( cucl2 ด้วย 2H2O-dx ) โพแทสเซียมไดโครเมต ( k2cr2o7 ) นิกเกิล ( II ) คลอไรด์ ( nicl2 ด้วย 6h2o ) และตะกั่วคลอไรด์ ( pbcl2 )หุ้นโซลูชั่นของโลหะหนักได้ ละลายในน้ำกลั่นและ pH ของการทดสอบโซลูชั่นเชื่อมต่อด้วยกัน โลหะหนักในโซลูชั่นที่ความเข้มข้นสุดท้ายได้เพิ่มเหมือนน้ำแร่ใช้วัฒนธรรมระบบเลข .

สำหรับกลุ่มแต่ละชนิด การตั้งค่าที่แตกต่างกันของปริมาณโลหะในมาตราส่วนเรขาคณิตที่ใช้ครอบคลุมช่วงของการตายจากศูนย์ถึง 100 % อย่างน้อยห้าทดสอบความเข้มข้นคือวิ่ง การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อแผ่น 24 หลุมถูกจ้าง สำหรับแต่ละความเข้มข้น 3 ซ้ำมีวิ่ง และ 24 สิ่งมีชีวิตต่อทำซ้ำใช้ ผลจากซ้ำสำหรับแต่ละชนิด×ความเข้มข้นเฉลี่ย ส่วนพริกไทยถูกเลือกจากวัฒนธรรมกับไมโครปิเปต ,ล้างในกรองน้ำแร่ไส้กรองรูพรุนขนาด 0.45 μ m ) และแยกเชื้อแต่ละอย่างดี ( เส้นผ่าศูนย์กลาง 16 มม. มี 1 มิลลิลิตรของสารละลายโลหะหนัก ) เป็นเซลล์กลุ่มควบคุม 12 เป็นเชื้อ 12 บ่อ 1 มิลลิลิตร ประกอบด้วยโลหะกลางฟรี พริกไทยไม่เลี้ยงในช่วงการทดสอบการตายหรือของคุณ 24 ชั่วโมง หลังจากได้รับการตรวจสอบภายใต้ stereomicroscope ป่าที่ขยายต่ำ ( 30 – 50 × ) เซลล์ไม่สามารถว่ายน้ำหรือไปที่ด้านล่างของบ่อ พร้อมกับหายตัวไปเซลล์ ถือว่าตาย สำหรับโลหะแต่ละความเข้มข้นร้ายแรง ( median ) 24-h ) ถูกกำหนดโดยใช้ตัวแบบ ( ฟินนีย์ , 2514 )