2.5. Antioxidant activity assays2.5

2.5. Antioxidant activity assays
2.5.1. DPPH radical scavenging assay
The stable 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging
activity was determined by the method of Hatano (1995).
The samples and reference dissolved in ethanol (75%) were mixed
with DPPH solution (1.5
×
10−4 M) and left for 20 min incubation
in dark at room temperature. Remaining DPPH amount was
measured at 520 nm using a Unico 4802 UV-visible double beam
spectrophotometer (Dayton, NJ, USA). Gallic acid was employed as
the reference and the experiments were performed in triplicate.
Inhibition of DPPH in percent (I%) was calculated as given below:
I% = [(Ablank −
Asample)/Ablank]
×
100, where Ablank is the
absorbance of the control reaction (containing all reagents
except the test sample), and Asample is the absorbance of the
extracts/reference.
2.5.2. Metal-chelation capacity by Fe+2–ferrozine test system
The metal-chelation capacity of the samples by Fe+2–ferrozine
test system was estimated by the method of Chua et al. (2008).
Briefly, 740 L of ethanol and the samples were incubated with
2 mM FeCl2 solution. The reaction was initiated by the addition
of 40 L of ferrozine solution into the mixture and left standing
at ambient temperature for 10 min. The absorbance of the reaction
mixture was measured at 562 nm. The ratio of inhibition of
ferrozine–Fe2+ complex formation was calculated as follows:
% inhibition = [(absorbance of control
−
absorbance of test sample)/
absorbance of control]
×
100. The control contained only FeCl2
and ferrozine. Analyses were run in triplicate and expressed as
average values with SEM (standard error mean). The reference used
in this method was ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA).
2.5.3. Ferric-reducing antioxidant power assay (FRAP)
The ferric-reducing power was tested using the assay of Oyaizu
(1986). According to the method; the samples were added to phosphate
buffer (pH 6.6) and potassium ferricyanide. Later, the mixture
was incubated at 50 ◦C for 20 min, which was followed by addition
of trichloroacetic acid. After the mixture was shaken vigorously,
the solution was mixed with distilled water and FeCl3 (0.1%, w/v).
After 30 min incubation, absorbance was read at 700 nm using a
Unico 4802 UV-visible double beam spectrophotometer (Dayton,
NJ, USA). Analyses were performed in triplicate. The reference used
in this method was chlorogenic acid. Increasing absorbance of the
reaction indicated increase in reducing power.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 ชุดตรวจสารต้านอนุมูลอิสระ
2.5.1 DPPH
ทดสอบต้านอนุมูลมั่นคง2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)
ต้านอนุมูลกิจกรรมถูกกำหนดโดยวิธีการHatano (1995).
กลุ่มตัวอย่างและการอ้างอิงละลายในเอทานอล (75%)
ได้รับการผสมกับการแก้ปัญหาDPPH (1.5
×
10-4 M) และที่เหลือสำหรับ 20
นาทีบ่มในที่มืดที่อุณหภูมิห้อง ที่เหลืออยู่จำนวน DPPH
ได้รับการวัดที่520 นาโนเมตรโดยใช้ยูนิโก้ 4802 ยูวีที่มองเห็นลำแสงคู่
spectrophotometer (เดย์ตัน, นิวเจอร์ซีย์, สหรัฐอเมริกา)
กรดฝรั่งเศสถูกจ้างมาเป็นข้อมูลอ้างอิงและทดลองดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า.
ยับยั้งการ DPPH ร้อยละ (ผม%)
ที่คำนวณได้ตามที่กำหนดดังต่อไปนี้ฉัน% = [(Ablank -
Asample) / Ablank]
×
100 ที่ Ablank
คือการดูดกลืนแสงของการเกิดปฏิกิริยาการควบคุม
(ที่มีสารเคมีทั้งหมดยกเว้นตัวอย่างทดสอบ) และ Asample
คือการดูดกลืนแสงของสารสกัด/ อ้างอิง.
2.5.2 กำลังการผลิตโลหะขับโดยเฟ + 2 ferrozine
ระบบการทดสอบกำลังการผลิตโลหะขับของกลุ่มตัวอย่างโดยเฟ+ 2 ferrozine
ระบบการทดสอบได้รับการประเมินโดยวิธีการของฉั่วเอตอัล (2008).
สั้น ๆ , 740? L เอทานอลและตัวอย่างที่ถูกบ่มกับ
2 มิลลิแก้ปัญหา FeCl2 ปฏิกิริยาที่ได้ริเริ่มขึ้นโดยการเพิ่ม
40? L ของการแก้ปัญหา ferrozine
ลงในส่วนผสมและที่เหลืออยู่ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา10 นาที การดูดกลืนแสงของการเกิดปฏิกิริยาส่วนผสมวัดที่ 562 นาโนเมตร
อัตราส่วนของการยับยั้งของ
ferrozine-Fe2 +
เชิงซ้อนที่คำนวณได้ดังนี้ยับยั้ง% = [(การดูดกลืนแสงของการควบคุม
-
การดูดกลืนแสงของตัวอย่างทดสอบ) /
การดูดกลืนแสงของการควบคุม]
×
100 การควบคุมที่มีอยู่เพียง FeCl2
และ ferrozine วิเคราะห์ได้ทำงานในเพิ่มขึ้นสามเท่าและแสดงเป็นค่าเฉลี่ยกับ SEM (ข้อผิดพลาดมาตรฐานหมายความว่า)
การอ้างอิงที่ใช้ในวิธีการนี้เป็นกรด tetraacetic ethylenediamine (EDTA). 2.5.3 เฟอร์ริกลดอำนาจการทดสอบสารต้านอนุมูลอิสระ (FRAP) พลังธาตุเหล็กลดได้รับการทดสอบโดยใช้การวิเคราะห์ของ Oyaizu (1986) ตามวิธีการนั้น ตัวอย่างที่ถูกเพิ่มเข้าฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.6) และโพแทสเซียม ferricyanide ต่อมาผสมถูกบ่มที่ 50 ◦Cเป็นเวลา 20 นาทีซึ่งตามมาด้วยนอกจากนี้ของกรดไตรคลอโร หลังจากผสมเขย่าแรง ๆ , การแก้ปัญหาที่ได้รับการผสมกับน้ำกลั่นและ FeCl3 (0.1% w / v). หลังจาก 30 นาทีการบ่มการดูดกลืนแสงได้อ่านที่ 700 นาโนเมตรโดยใช้ยูนิโก้4802 ยูวีที่มองเห็น spectrophotometer ลำแสงคู่ (เดย์ตัน, นิวเจอร์ซีย์ , สหรัฐอเมริกา). วิเคราะห์ได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า การอ้างอิงที่ใช้ในวิธีการนี้เป็นกรด chlorogenic การดูดกลืนแสงที่เพิ่มขึ้นของปฏิกิริยาที่แสดงให้เห็นการเพิ่มขึ้นในการลดการใช้พลังงาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 หรือสารต้านอนุมูลอิสระ
ดาวน์โหลด . dpph เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา (
2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl มั่นคง ( dpph ) เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา
กิจกรรมถูกกำหนดโดยวิธีการของ ฮาตาโน่ ( 2538 ) .
ตัวอย่างอ้างอิงและละลายในเอทานอล ( 75 % ) ผสมกับสารละลาย ( 1.5 dpph


× 10 − 4 M ) และทิ้งไว้ 20 นาทีบ่ม
ในที่มืดที่ อุณหภูมิของห้อง ที่เหลือเป็นเงิน
dpphวัดที่ 520 nm ใช้ Unico 4802 UV มองเห็นคู่บีม
Spectrophotometer ( เดย์ , NJ , USA ) กรดแกลลิคใช้
การอ้างอิงและผลการทดลองทั้งสามใบ dpph
การยับยั้งร้อยละ ( % ) คำนวณได้โดยได้รับด้านล่าง :
ฉัน % = [ ( ablank −
จำนวน ) / ablank ]
×
100 ที่ ablank เป็น
การดูดกลืนแสงของปฏิกิริยา ( ที่มีการควบคุมทั้งหมด สารเคมี
นอกจากตัวอย่างการทดสอบ ) และจำนวนเป็นค่า

งานวางสารสกัด / อ้างอิง . . การล้างพิษโลหะความจุโดย Fe 2 – ferrozine ทดสอบระบบ
chelation โลหะความจุของตัวอย่างโดยทดสอบระบบ ferrozine
- เฟ 2 ประมาณด้วยวิธีชั่ว et al . ( 2551 ) .
สั้น , 740  ลิตรเอทานอลและตัวอย่างที่บ่มด้วยโซลูชั่น fecl2
2 มิลลิเมตร ปฏิกิริยาที่ถูกริเริ่มโดยนอกเหนือจาก
40  l ferrozine สารละลายลงในส่วนผสมและออกไปยืนที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที

มีการดูดกลืนแสงของปฏิกิริยาผสมถูกวัดที่ 562 นาโนเมตร อัตราส่วนของการยับยั้ง
ferrozine – fe2 ซับซ้อนรูปแบบคำนวณได้ดังนี้ :
% ยับยั้ง = [ ( การดูดกลืนแสงของการควบคุมของตัวอย่างทดสอบค่า−

)


ค่าการควบคุม ] × 100 การควบคุมและมีเพียง fecl2
ferrozine .วิเคราะห์ข้อมูลใช้ทั้งสามใบ และแสดงเป็นค่าเฉลี่ยด้วย SEM
( ค่าความคลาดเคลื่อนมาตรฐานของค่าเฉลี่ย ) เอกสารอ้างอิงที่ใช้ในวิธีนี้คือลลีนไดแอม
tetraacetic acid ( EDTA )
2.5.3 . การใช้สารต้านอนุมูลอิสระพลังงานเฟอริค ( VDO )
เฟอร์ลดพลังถูกทดสอบโดยใช้การทดสอบของ oyaizu
( 1986 ) ตามวิธีการ ; จำนวนเพิ่ม
( ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ พีเอช 6 .6 ) และโพแทสเซียมเฟอร์ริกไซนาไนด์ . ต่อมา ส่วนผสม
ถูกบ่มที่ 50 ◦ C นาน 20 นาที ซึ่งตามนอกจากนี้
ของกรดไตรคลอโรอะซิติก . หลังจากส่วนผสมที่ถูกเขย่าอย่างจริงจัง
สารละลายที่ผสมกับน้ำกลั่นและ FeCl3 ( 0.1 % W / V )
หลังจาก 30 นาทีระยะเวลาการดูดกลืนแสงก็อ่านที่ 700 nm ใช้
Unico 4802 UV Spectrophotometer ( มองเห็นคู่บีมเดย์
, NJ , USA )วิเคราะห์ได้ทั้งสามใบ เอกสารอ้างอิงที่ใช้ในวิธีนี้คือ กรดคลอโรจีนิก
. การเพิ่มค่าการดูดกลืนแสงของปฏิกิริยา พบเพิ่มขึ้นในการลดใช้พลังงาน
.