Free fatty acids are important flav

Free fatty acids are important flavor compounds in cheese. Propionibacterium freudenreichii is the main agent of their release
through lipolysis in Swiss cheese. Our aim was to identify the esterase(s) involved in lipolysis by P. freudenreichii. We targeted
two previously identified esterases: one secreted esterase, PF#279, and one putative cell wall-anchored esterase, PF#774. To evaluate
their role in lipolysis, we constructed overexpression and knockout mutants of P. freudenreichii CIRM-BIA1T for each corresponding
gene. The sequences of both genes were also compared in 21 wild-type strains. All strains were assessed for their lipolytic
activity on milk fat. The lipolytic activity observed matched data previously reported in cheese, thus validating the relevance
of the method used. The mutants overexpressing PF#279 or PF#774 released four times more fatty acids than the wild-type
strain, demonstrating that both enzymes are lipolytic esterases. However, inactivation of the pf279 gene induced a 75% reduction
in the lipolytic activity compared to that of the wild-type strain, whereas inactivation of the pf774 gene did not modify the
phenotype. Two of the 21 wild-type strains tested did not display any detectable lipolytic activity. Interestingly, these two strains
exhibited the same single-nucleotide deletion at the beginning of the pf279 gene sequence, leading to a premature stop codon,
whereas they harbored a pf774 gene highly similar to that of the other strains. Taken together, these results clearly demonstrate
that PF#279 is the main lipolytic esterase in P. freudenreichii and a key agent of Swiss cheese lipolysis

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กรดไขมันอิสระมีสารสำคัญรสชีส Propionibacterium freudenreichii เป็นตัวแทนหลักของรุ่นของพวกเขาผ่านการผลิตระหว่างประเทศในสวิสชีส เป้าหมายของเราคือการ ระบุ esterase(s) ที่เกี่ยวข้องในการผลิตระหว่างประเทศ โดย P. freudenreichii เป้าหมายของเราสองก่อนหน้านี้ระบุ esterases: หนึ่ง secreted esterase, PF #279 และหนึ่ง putative ยึดผนังเซลล์ esterase, PF #774 ในการประเมินบทบาทของตนในการผลิตระหว่างประเทศ เราสร้างสายพันธุ์ overexpression และน่าพิศวงของ P. freudenreichii CIRM-BIA1T สำหรับแต่ละที่สอดคล้องกันยีน ลำดับของยีนทั้งสองยังได้ถูกเปรียบเทียบในสายพันธุ์ป่าชนิด 21 สายพันธุ์ทั้งหมดถูกประเมินตน lipolyticกิจกรรมในเนย กิจกรรม lipolytic พบข้อมูลตรงกันกับรายงานก่อนหน้านี้ ในเนยแข็ง การตรวจสอบความเกี่ยวข้องดังนั้นของวิธีการที่ใช้ สายพันธุ์ overexpressing PF #279 หรือ PF #774 ออกสี่เท่ากรดไขมันมากกว่าชนิดป่าต้องใช้ เห็นเอนไซม์ทั้งสอง lipolytic esterases อย่างไรก็ตาม ยกเลิกการเรียกของยีน pf279 เกิดลด 75%ในกิจกรรม lipolytic เปรียบเทียบกับป่าชนิดพันธุ์ ในขณะที่ไม่ได้แก้ไขยกเลิกการเรียกของยีน pf774phenotype สองสายพันธุ์ป่าชนิด 21 ที่ทดสอบได้แสดงกิจกรรม lipolytic ใด ๆ สามารถตรวจสอบได้ เป็นเรื่องน่าสนใจ สายพันธุ์เหล่านี้สองจัดแสดงการลบเดียวนิวคลีโอไทด์เหมือนที่จุดเริ่มต้นของลำดับของยีน pf279 นำไปสู่การหยุดก่อนกำหนดรหัสพันธุกรรมในขณะที่พวกเขา harbored ยีน pf774 สูงคล้ายกับสายพันธุ์อื่น ๆ ปวง ผลลัพธ์เหล่านี้ชัดเจนแสดงให้เห็นถึงที่ PF #279 esterase lipolytic หลัก P. freudenreichii และเป็นตัวแทนสำคัญของผลิตระหว่างประเทศสวิสชีส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กรดไขมันเป็นสารประกอบสำคัญในรสชีส Propionibacterium : เป็นหลัก ตัวแทนของพวกเขาปล่อย
ผ่าน lipolysis ในเนยแข็งสวิส เป้าหมายของเราคือเพื่อระบุ esterase ( s ) ที่เกี่ยวข้องกับไลโปไลซิส โดยหน้า : . เรากำหนดเป้าหมาย
2 ระบุก่อนหน้านี้หาอาหารที่พบในประเทศไทย : หนึ่งหลั่ง esterase , PF # 279 และหนึ่งซึ่งเซลล์ผนังยึด esterase , PF # 774 . เพื่อประเมิน
บทบาทในไลโปไลซิส เราสร้างและ overexpression มหัศจรรย์พันธ์ของหน้า : cirm-bia1t แต่ละสอดคล้อง
ยีน ลำดับของยีนทั้งสองมาเปรียบเทียบใน 21 สายพันธุ์ของ . ทุกสายพันธุ์ มีการประเมินกิจกรรมกับ
ของไขมันนม กิจกรรมจับคู่กับสังเกตข้อมูลรายงานว่า ก่อนหน้านี้ในเนยแข็งจึงตรวจสอบความเกี่ยวข้อง
ของวิธีการที่ใช้ พวก overexpressing PF PF #หรือว่า# 774 ออกสี่ครั้งมากกว่าไขมันกรดของ
เมื่อย , แสดงให้เห็นว่าเอนไซม์ทั้งสองกับกำลังหาอาหารที่พบในประเทศไทย . อย่างไรก็ตาม เมื่อนำยีนของ pf279
ลด 75% ในกิจกรรมกับเมื่อเทียบกับที่ของของความเครียด ในขณะที่การยับยั้งของ pf774 ยีนไม่ได้ปรับเปลี่ยน
+ .สองของ 21 ของสายพันธุ์ทดสอบไม่แสดงกับกิจกรรมใด ๆที่ตรวจพบ แต่ทั้งสองสายพันธุ์
แสดงเดียวกันการลบซิงเกิลนิวคลีโอไทด์ที่จุดเริ่มต้นของ pf279 ลำดับยีน ทำให้เกิดเป็น codon เลิกก่อนวัยอันควร
ในขณะที่พวกเขายอมรับเป็น pf774 ยีนสูงคล้ายกับที่ของสายพันธุ์อื่น ๆ ถ่ายด้วยกัน ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นอย่างชัดเจน
ที่ทำให้# 279 เป็นหลักกับในหน้า : 4 และตัวแทนหลักของ lipolysis ชีสสวิส