Infection of traumatized cornea by

Infection of traumatized cornea by Pseudomonas aeruginosa is usually rapid and self-limiting and often results in impaired vision due to corneal scarring (22). The hallmark of this infection is a liquefactive necrosis associated with extensive ulceration and corneal perforation (1). Years ago, Fisher and Allen (7) suggested that the characteristic damage observed with P. aeruginosa eye infections may be attributable to the action of bacterial proteases on the corneal proteoglycan. Several groups, including Kawaharajo et al. (16), Hirao and Homma (12), Kreger and Gray (20) and Kreger and Griffin (21) have since provided data to support this hypothesis. Recently, Ohman et al. (27) initiated a genetic study to examine the role of bacterial toxin and protease in corneal infection. They examined the virulence of an elastolysis-deficient mutant of P. aeruginosa and concluded that elastolysis was not required to establish an active infection. They also concluded that if extracellular protease is required for virulence in Pseudomonas eye infections, then alkaline protease produced by the mutant strain they examined may have been sufficient to cause corneal damage. Isolation of mutants specifically deficient in the production of alkaline protease would facilitate definitive studies addressing the role of alkaline protease in P. aeruginosa infections. This approach has been complicated by the fact that most strains of P. aeruginosa produce at least two distinct extracellular proteases (25) and that alkaline protease does not possess a unique or stringent substrate specificity (26). We have been unable to specifically inhibit the activity of interfering protease (elastase) to facilitate detection of alkaline protease mutants on skim milk agar plates (unpublished data). To circumvent these problems, we chose to isolate alkaline protease mutants in strain PA103, which produces alkaline protease (4) but no detectable elastase (28). Despite the fact that strain PA103 is serum sensitive (41), it is virulent in a mouse eye model of corneal infection (17, 27). We have isolated alkaline protease-deficient mutants of strain PA103 after ethyl methanesulfonate (EMS) mutagenesis and screening of mutagenized colonies on skim milk agar plates. After in vitro characterization of these
* Corresponding author.
mutants, mutants specifically deficient in alkaline protease production were identified, and the virulence of these mutants was compared with that of the wild-type strain in a mouse eye model.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ติดเชื้อของกระจกตาที่บอบช้ำจาก Pseudomonas aeruginosa เป็นปกติอย่างรวดเร็ว และจำกัดด้วยตนเอง และมักจะส่งผลในผู้ที่มีวิสัยทัศน์เนื่องจากกระจกตาเกิดแผลเป็น (22) จุดเด่นของเชื้อนี้คือ การตายเฉพาะส่วน liquefactive เกี่ยวข้องกับ ulceration อย่างละเอียดและ perforation กระจกตา (1) ปีที่ผ่านมา Fisher และอัลเลน (7) แนะนำว่า ความเสียหายลักษณะสังเกต ด้วยติดเชื้อ P. aeruginosa ตาอาจรวมการกระทำของแบคทีเรีย proteases ใน proteoglycan กระจกตา กลุ่มหลาย รวมทั้ง Kawaharajo et al. (16), Hirao และ Homma (12), Kreger และสีเทา (20) และ Kreger และกริฟฟอน (21) มีตั้งแต่ให้ข้อมูลสนับสนุนสมมติฐานนี้ ล่าสุด Ohman et al. (27) เริ่มต้นการศึกษาพันธุกรรมการตรวจสอบบทบาทของสารพิษจากแบคทีเรียและรติเอสในการติดเชื้อที่กระจกตา พวกเขาตรวจสอบ virulence ของ mutant elastolysis ไม่มีของ P. aeruginosa และสรุป elastolysis ที่ไม่ต้องสร้างติดเชื้อใช้งาน พวกเขายังสรุปที่ว่าจำเป็นสำหรับในการติดเชื้อตาลี virulence รติเอส extracellular แล้วอาจได้รับด่างรติเอสผลิต โดยสายพันธุ์กลายพันธุ์พวกเขาตรวจสอบเพียงพอที่จะทำให้เกิดความเสียหายของกระจกตา แยกของสายพันธุ์โดยเฉพาะขาดสารในการผลิตอัลคาไลน์รติเอสจะช่วยกำหนดบทบาทของรติเอสด่างในเชื้อ P. aeruginosa การศึกษาทั่วไป วิธีการนี้มีการซับซ้อนความจริงที่ว่า สายพันธุ์ส่วนใหญ่ของ P. aeruginosa ผลิต extracellular proteases น้อยสองหมด (25) และรติเอสอัลคาไลน์ที่มี specificity พื้นผิวเฉพาะ หรือเข้มงวด (26) เราได้รับไม่สามารถยับยั้งกิจกรรมของรติเอสรบกวน (elastase) เพื่อตรวจหาสายพันธุ์ด่างรติเอสบนแผ่นนม skim agar (ยกเลิกประกาศข้อมูล) โดยเฉพาะ เพื่อหลีกเลี่ยงปัญหาเหล่านี้ เราเลือกที่จะแยกสายพันธุ์รติเอสด่างในต้องใช้ PA103 ซึ่งสร้างรติเอสด่าง (4) แต่ไม่สามารถตรวจสอบได้ elastase (28) ทั้ง ๆ ที่สายพันธุ์ PA103 เป็นเซรั่มสำคัญ (41) เป็น virulent ในเมาส์รุ่นตาติดเชื้อกระจกตา (17, 27) เราได้แยกต่างหากไม่รติเอสสายพันธุ์ที่ด่างของต้องใช้ PA103 หลังจากเอทิล mutagenesis methanesulfonate (EMS) และการคัดกรองของอาณานิคม mutagenized บนแผ่น agar skim นม หลังจากเพาะเลี้ยงจำแนกเหล่านี้* ผู้สอดคล้องกันระบุสายพันธุ์ สายพันธุ์ขาดสารโดยเฉพาะในการผลิตอัลคาไลน์รติเอส และ virulence ของสายพันธุ์เหล่านี้ถูกเปรียบเทียบกับของสายพันธุ์ชนิดป่าในรูปแบบตาเมาส์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การติดเชื้อของกระจกตาบอบช้ำจากเชื้อ Pseudomonas aeruginosa เป็นปกติอย่างรวดเร็วและ จำกัด ตัวเองและมักจะส่งผลในการมองเห็นผิดปกติอันเนื่องมาจากรอยแผลเป็นที่กระจกตา (22) จุดเด่นของการติดเชื้อนี้เป็นเนื้อร้าย liquefactive เกี่ยวข้องกับแผลอย่างกว้างขวางและทะลุกระจกตา (1) ปีที่ผ่านมาฟิชเชอร์และอัลเลน (7) ชี้ให้เห็นว่าเกิดความเสียหายลักษณะที่สังเกตกับพี aeruginosa ติดเชื้อที่ตาอาจจะเนื่องมาจากการกระทำของแบคทีเรียโปรตีเอสบนกระจกตา proteoglycan หลายกลุ่มรวมทั้ง Kawaharajo และคณะ (16), Hirao และ Homma (12), Kreger และสีเทา (20) และกริฟฟิ Kreger และ (21) เนื่องจากข้อมูลมีไว้ให้เพื่อสนับสนุนสมมติฐานนี้ เมื่อเร็ว ๆ นี้ทรงเสน่ห์และคณะ (27) เริ่มมีการศึกษาทางพันธุกรรมเพื่อตรวจสอบบทบาทของสารพิษแบคทีเรียและโปรติเอสในการติดเชื้อที่กระจกตา พวกเขาตรวจสอบความรุนแรงของการกลายพันธุ์ elastolysis ขาดของเชื้อ P. aeruginosa และสรุปได้ว่า elastolysis ก็ไม่จำเป็นต้องสร้างการติดเชื้อ พวกเขายังได้ข้อสรุปว่าถ้าโปรติเอสสารเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับความรุนแรงในการติดเชื้อที่ตา Pseudomonas แล้วอัลคาไลน์โปรติเอสที่ผลิตโดยสายพันธุ์ที่พวกเขาตรวจสอบอาจจะได้รับเพียงพอที่จะทำให้เกิดความเสียหายกระจกตา การแยกการกลายพันธุ์โดยเฉพาะขาดในการผลิตเอนไซม์โปรติเออัลคาไลน์จะอำนวยความสะดวกในการศึกษาที่ชัดเจนอยู่บทบาทของโปรติเอสอัลคาไลน์ในการติดเชื้อ P. aeruginosa วิธีการนี้จะได้รับความซับซ้อนโดยความจริงที่ว่าสายพันธุ์ส่วนใหญ่ของเชื้อ P. aeruginosa ผลิตอย่างน้อยสองโปรตีเอสสารที่แตกต่างกัน (25) และอัลคาไลน์โปรติเอสที่ไม่ได้มีความจำเพาะไม่ซ้ำกันหรือพื้นผิวที่เข้มงวด (26) เราได้รับไม่สามารถเฉพาะยับยั้งกิจกรรมของเอนไซม์โปรติเอรบกวน (elastase) เพื่ออำนวยความสะดวกการตรวจหาการกลายพันธุ์อัลคาไลน์โปรติเอสในนมพร่องมันเนยแผ่นวุ้น (ข้อมูลที่ไม่ถูกเผยแพร่) เพื่อหลีกเลี่ยงปัญหาเหล่านี้เราเลือกที่จะแยกการกลายพันธุ์โปรติเอสอัลคาไลน์ในสายพันธุ์ PA103 ซึ่งผลิตเอนไซม์โปรติเออัลคาไลน์ (4) แต่ไม่มี elastase ตรวจพบ (28) แม้จะมีความจริงที่ว่า PA103 ความเครียดเป็นซีรั่มที่สำคัญ (41) มันเป็นความรุนแรงในรูปแบบตาเมาส์ของการติดเชื้อที่กระจกตา (17, 27) เราได้แยกอัลคาไลน์โปรติเอสกลายพันธุ์ขาดของ PA103 ความเครียดหลังจากเอทิล methanesulfonate (EMS) ฉับและการคัดกรองของอาณานิคม mutagenized ในนมพร่องมันเนยแผ่นวุ้น หลังจากที่ในหลอดทดลองลักษณะของเหล่านี้
* ผู้รับผิดชอบ.
กลายพันธุ์กลายพันธุ์โดยเฉพาะขาดในการผลิตเอนไซม์โปรติเออัลคาไลน์ที่ถูกระบุและความรุนแรงของการกลายพันธุ์เหล่านี้ได้รับการเปรียบเทียบกับสายพันธุ์ชนิดป่าในรูปแบบตาเมาส์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การติดเชื้อของกระจกตาบอบช้ำโดย Pseudomonas aeruginosa เป็นปกติอย่างรวดเร็วและตนเองจำกัดและมักจะส่งผลในด้านวิสัยทัศน์ เพราะนำมาซึ่ง ( 22 ) จุดเด่นของการติดเชื้อนี้เป็น liquefactive เนื้อร้ายที่เกี่ยวข้องกับแผลที่กว้างขวาง และกระจกตาทะลุ ( 1 ) ปี ชาวประมงและอัลเลน ( 7 ) พบว่า ลักษณะความเสียหายและหน้า? ตา เชื้ออาจจะเนื่องมาจากการกระทำของทางแบคทีเรียในโปรตีนโอไกลแคนที่กระจกตา . หลายกลุ่ม รวมทั้ง kawaharajo et al . ( 16 ) , hirao และ homma ( 12 ) , kreger และสีเทา ( 20 ) และ kreger กริฟฟิน ( 21 ) มีตั้งแต่ให้ข้อมูล เพื่อสนับสนุนสมมุติฐานนี้ เมื่อเร็ว ๆนี้ , โอเมิ่น et al .( 27 ) ริเริ่มการศึกษาพันธุกรรมเพื่อตรวจสอบบทบาทของแบคทีเรียสารพิษและ protease ในการติดเชื้อที่กระจกตา . พวกเขาตรวจสอบความรุนแรงของการขาดของ P . aeruginosa perifollicolare กลายพันธุ์และสรุปว่า perifollicolare ไม่ต้องสร้างการติดเชื้ออยู่ พวกเขายังกล่าวทิ้งท้ายว่า หากพบว่า โปรตีนเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับในส่วนของโรคตาติดเชื้อจากนั้นอัลคาไลน์โปรติเอสที่ผลิตโดยสายพันธุ์กลายที่พวกเขาตรวจสอบอาจได้รับเพียงพอที่จะก่อให้เกิดความเสียหายกระจกตา . การแยกสายพันธุ์ โดยเฉพาะการขาดในการผลิตอัลคาไลน์โปรติเอสจะอำนวยความสะดวกในการศึกษาที่ชัดเจนกับบทบาทของอัลคาไลน์โปรติเอสใน P . aeruginosa การติดเชื้อ วิธีการนี้มีความซับซ้อน โดยข้อเท็จจริงที่ว่า สายพันธุ์มากที่สุดของหน้าลดการผลิตอย่างน้อยสองแตกต่างกันพบว่าน้ำหนักโมเลกุล ( 25 ) และการผลิตอัลคาไลน์โปรติเอสไม่ได้มีเฉพาะ หรืออย่างเข้มงวด ( ความจำเพาะ ( 26 ) เราไม่สามารถยับยั้งกิจกรรมของเอนไซม์โปรติเอสรบกวนโดยเฉพาะ ( elastase ) เพื่อความสะดวกในการตรวจสอบของอัลคาไลน์โปรติเอสกลายพันธุ์บนจานวุ้นนม ( ข้อมูลจากประกาศ ) เพื่อหลีกเลี่ยงปัญหาเหล่านี้เราเลือกที่จะแยกแอลคาไล pa103 กลายพันธุ์ในสายพันธุ์ที่ผลิตอัลคาไลน์โปรติเอส ( 4 ) แต่ยังไม่พบอีลาสเตส ( 28 ) แม้จะมีความจริงที่ว่า pa103 เมื่อยเซรั่มไว ( 41 ) มันรุนแรงในรูปแบบของการติดเชื้อที่กระจกตาเมาส์ตา ( 17 , 27 )เราได้แยกแอลคาไลขาดสายพันธุ์สายพันธุ์ pa103 หลังจากการ methanesulfonate ( EMS ) การกลายพันธุ์และการคัดเลือก mutagenized อาณานิคมบนหางวุ้นจานนม หลังจากการคุณลักษณะเหล่านี้

กลายพันธ์ที่สอดคล้องกันของผู้เขียน โดยเฉพาะขาดการยับยั้งการผลิตอัลคาไลน์โปรติเอสยังระบุและความรุนแรงของสายพันธุ์เหล่านี้เมื่อเทียบกับที่ของของความเครียดในสายตา
เมาส์แบบ