Foodborne outbreaks, involving pine nuts and peanut butter, illustrate the need to rapidly detect Salmonella in low moisture foods. However, the current Bacteriological Analytical Manual (BAM) culture method for Salmonella, using lactose broth (LB) as a pre enrichment medium, has not reliably supported real-time quantitative PCR (qPCR) assays for certain foods. We evaluated two qPCR assays in LB and four other pre enrichment media: buffered peptone water (BPW), modified BPW (mBPW), Universal Pre enrichment broth (UPB), and BAX® MP media to detect Salmonella in naturally-contaminated pine nuts (2011 outbreak). A four-way comparison among culture method, Pathatrix® Auto, VIDAS® Easy SLM, and qPCR was conducted. Automated DNA extraction techniques were compared with manual extraction methods (boiling or InstaGene™). There were no significant differences (P > 0.05) among the five pre enrichment media for pine nuts using the culture method. While both qPCR assays produced significantly (P ≤ 0.05) higher false negatives in 24 h pre enriched LB than in the other four media, they were as sensitive as the culture method in BPW, mBPW, UPB, and BAX media. The VIDAS Easy and qPCR were equivalent; Pathatrix was the least effective method. The Automatic PrepSEQ™ DNA extraction, using 1000 μL of pre enrichment, was as effective as manual extraction methods
การระบาดของโรคที่เกิดจากอาหารที่เกี่ยวข้องกับต้นสนถั่วและเนยถั่วลิสง, แสดงให้เห็นถึงความจำเป็นในการตรวจสอบอย่างรวดเร็ว Salmonella ในอาหารมีความชื้นต่ำ อย่างไรก็ตามปัจจุบันคู่มือวิเคราะห์แบคทีเรีย (BAM) วิธีการเพาะเลี้ยงเชื้อ Salmonella โดยใช้น้ำซุปแลคโตส (LB) เป็นสื่อกลางในการเพิ่มคุณค่าก่อนยังไม่ได้รับการสนับสนุนอย่างน่าเชื่อถือแบบ real-time PCR เชิงปริมาณ (qPCR) สำหรับการตรวจอาหารบางชนิด เราประเมินการตรวจ qPCR สองในสี่ LB และสื่ออื่น ๆ ที่เพิ่มคุณค่าก่อนน้ำเปปโตนบัฟเฟอร์ (BPW) แก้ไข BPW (mBPW), ยูนิเวอร์แซน้ำซุปเพิ่มคุณค่า Pre (UPB) และBAX®สื่อ MP เพื่อตรวจหาเชื้อ Salmonella ในธรรมชาติที่ปนเปื้อนถั่วไพน์ ( 2011 ระบาด) เปรียบเทียบสี่วิธีในหมู่วิธีวัฒนธรรมPathatrix®อัตโนมัติ, VIDAS®ง่าย SLM และ qPCR ได้ดำเนินการ อัตโนมัติเทคนิคการสกัดดีเอ็นเอถูกเมื่อเทียบกับวิธีการสกัดคู่มือ (เดือดหรือ InstaGene ™) ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (P> 0.05) ในห้าสื่อการตกแต่งล่วงหน้าสำหรับถั่วไพน์โดยใช้วิธีการเพาะเลี้ยง ขณะที่ทั้งสองชุดตรวจ qPCR การผลิตอย่างมีนัยสำคัญ (P ≤ 0.05) เชิงลบเท็จที่สูงขึ้นใน 24 ชั่วโมงก่อนอุดม LB กว่าในอีกสี่สื่อที่พวกเขามีความละเอียดอ่อนเป็นวิธีการเพาะเลี้ยงใน BPW, mBPW, UPB และสื่อ BAX ง่าย VIDAS และ qPCR เทียบเท่า; Pathatrix เป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพน้อย สกัดดีเอ็นเออัตโนมัติ PrepSEQ ™โดยใช้ 1,000 ไมโครลิตรของการตกแต่งไว้ล่วงหน้าเป็นที่มีประสิทธิภาพเป็นวิธีการสกัดคู่มือ
การแปล กรุณารอสักครู่..
