The DNA was extracted following a C

The DNA was extracted following a CTAB protocol. The sample
material was homogenized using a hand blender (M160, ESGE,
Mettlen, Switzerland); 2 g were weighed into a 50 mL falcon tube
and incubated over night at 65 C with 10 mL of CTAB buffer [2%
(w/v) cetyltrimethylammoniumbromide, 1.4 M NaCl, 0.1 M 2-amino-
2-hydroxymethyl-propane-1,3-diol (TRIS), and 20 nM ethylenediaminetetraacetic
acid (EDTA) at pH 8] and 30 lL Proteinase
K (>600 mAU/mL) (Qiagen, Hilden, Germany) in a platform shaker
with incubator (Heidolph Instruments, Schwabach, Germany).
After centrifugation at 7200g for 10 min, 1000 lL of the supernatant
was added to 700 lL ReadyRed chlorophorm/isoamylalcohol
(MP Biomedicals, Illkirch, France) in a 2 mL tube and shaken in
an overhead shaker (Heidolph Instruments, Kehlheim, Germany)
for 15 min. The sample was centrifuged for 15 min at 20,000g
and 750 lL of the clear supernatant was added to 750 lL of cold
isopropanol and incubated at room temperature for 30 min. The
sample was centrifuged at 20,000g for 15 min, the supernatant
was discarded and 500 lL of ethanol (70%) was added. After gentle
shaking, the sample was centrifuged at 20,000g for 5 min, the ethanol
was removed and the residual pellet was dissolved in TE buffer
(1) [10 mM TRIS  HCl at pH 8.0, containing 1 mM EDTA].
The dissolved DNA was purified using the QiaQuick PCR purification
kit (Qiagen, Hilden Germany) and eluted with 30 lL elution
buffer.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ดีเอ็นเอถูกแยกตามโพรโทคอ CTAB ตัวอย่าง
วัสดุถูก homogenized เป็นกลุ่มใช้ blender มือ (M160, ESGE,
Mettlen สวิตเซอร์แลนด์); 2 g มีน้ำหนักเป็นหลอด 50 mL เหยี่ยว
และ incubated ข้ามคืนที่ C 65 กับ 10 mL ของบัฟเฟอร์ที่ CTAB [2%
(w/v) cetyltrimethylammoniumbromide, 1.4 M NaCl, 0.1 M 2-amino-
2-hydroxymethyl-propane-1,3-diol (ตรี), และ 20 nM ethylenediaminetetraacetic
กรด (EDTA) ที่ pH 8] และ 30 lL Proteinase
K (> เหมา 600 mL) (Qiagen, Hilden เยอรมนี) ในเชคเกอร์เป็นแพลตฟอร์ม
กับบ่มเพาะวิสาหกิจ (เครื่องมือ Heidolph, Schwabach เยอรมนี) .
หลัง centrifugation ที่ 7200 g สำหรับ 10 นาที จะ 1000 ของ supernatant
ถูกเพิ่ม 700 จะ ReadyRed chlorophorm/isoamylalcohol
(MP Biomedicals, Illkirch ฝรั่งเศส) ในหลอด 2 มล. และหวั่นไหวใน
การเชคเกอร์จ่าย (Heidolph เครื่องมือ, Kehlheim เยอรมนี)
สำหรับ 15 นาที ตัวอย่างถูก centrifuged สำหรับ 15 นาทีที่ 20, 000g
และ 750 จะของ supernatant ชัดเจนถูกเพิ่ม 750 จะเย็น
isopropanol และ incubated ที่อุณหภูมิห้องใน 30 นาที
อย่างถูก centrifuged ที่ 20000 g สำหรับ 15 นาที supernatant
ถูกจะถูกละทิ้ง และ 500 ของเอทานอล (70%) เพิ่มขึ้น หลังจากใจ
สั่น ตัวอย่างถูก centrifuged ที่ 20000 g สำหรับ 5 นาที เอทานอล
ถูกเอาออก และเม็ดส่วนที่เหลือถูกละลายในบัฟเฟอร์ TE
(1) [10 มม.การ HCl ตรีที่ค่า pH 8.0 ที่ประกอบด้วย 1 mM EDTA] .
DNA ละลายที่บริสุทธิ์ที่ใช้ฟอก QiaQuick PCR
kit (Qiagen, Hilden เยอรมนี) และ eluted กับ 30 จะ elution
บัฟเฟอร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ดีเอ็นเอการสกัดต่อไปนี้โปรโตคอล CTAB ตัวอย่าง
วัสดุที่ถูกปั่นโดยใช้เครื่องปั่นมือ (M160, ESGE,
Mettlen, วิตเซอร์แลนด์); 2 กรัมถูกชั่งน้ำหนักลงในหลอดเหยี่ยว 50 มล.
และบ่มข้ามคืนที่ 65 องศาเซลเซียส 10 มิลลิลิตรบัฟเฟอร์ CTAB [2%
(w / v) cetyltrimethylammoniumbromide, 1.4 M NaCl, 0.1 M-2 อะมิโน
2 hydroxymethyl-โพรเพน 1,3-ไดออล (ทริส) และ 20 นาโนเมตร Ethylenediaminetetraacetic
กรด (EDTA) ที่ pH 8] และ 30 lL โปร
K (> 600 MAU / มิลลิลิตร) (Qiagen, ฮิลเดน, เยอรมนี) ในเครื่องปั่นแพลตฟอร์ม
ที่มีศูนย์บ่มเพาะ (Heidolph Instruments, Schwabach, เยอรมนี)
หลังจากการหมุนเหวี่ยงที่ 7200g เป็นเวลา 10 นาที 1000 lL ของสารละลาย
ถูกบันทึกอยู่ใน 700 lL ReadyRed chlorophorm / isoamylalcohol
(MP Biomedicals, สตรา, ฝรั่งเศส) ใน 2 มิลลิลิตรหลอดและสั่นใน
เครื่องปั่นค่าใช้จ่าย (Heidolph Instruments, Kehlheim, เยอรมนี)
เป็นเวลา 15 นาที ตัวอย่างที่ได้รับการปั่นเป็นเวลา 15 นาทีที่ 20,000 กรัม
และ 750 lL ของสารละลายที่ชัดเจนถูกบันทึกอยู่ใน 750 lL เย็น
isopropanol และบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที
กลุ่มตัวอย่างได้รับการหมุนเหวี่ยงที่ 20,000 กรัมเป็นเวลา 15 นาที, ใส
ทิ้งและ 500 lL ของเอทานอล (70%) ถูกเพิ่มเข้ามา หลังจากที่อ่อนโยน
สั่นตัวอย่างที่ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 20,000 กรัมเป็นเวลา 5 นาที, เอทานอล
จะถูกลบออกและเม็ดที่เหลือก็เลือนหายไปในบัฟเฟอร์ TE
(1) [10 มิลลิทริส? HCl ที่ pH? 8.0, มี 1 มิลลิ EDTA]
ละลายดีเอ็นเอบริสุทธิ์ใช้บริสุทธิ์ QiaQuick PCR
ชุด (Qiagen, ฮิลเดนเยอรมนี) และชะด้วย elution 30 lL
บัฟเฟอร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ดีเอ็นเอที่สกัดตาม ctab โปรโตคอล วัสดุตัวอย่าง
ถูกบดโดยใช้มือปั่น ( m160 esge
, , mettlen , สวิตเซอร์แลนด์ ) 2 กรัม ( ชั่งเป็น 50 ml หลอด
Falcon บ่มข้ามคืนที่ 65  C 10 มิลลิลิตร ctab บัฟเฟอร์ [ 2 %
( w / v ) cetyltrimethylammoniumbromide 1.4 M NaCl 0.1 M 2-amino -
2-hydroxymethyl-propane-1,3-diol ( ห ) , และ 20 nm บอน
acid ( EDTA ) ที่ pH 8 ] และ 30 จะโปร
K ( > 600 เมา / ml ) ( QIAGEN Hilden , Germany ) ในแพลตฟอร์มปั่น
กับเครื่องฟักไข่ ( เครื่องมือ heidolph Schwabach , เยอรมนี ) .
หลังการปั่นเหวี่ยงที่ 7200g 10 นาที 1000 จะของนำ
เพิ่ม 700 จะ readyred chlorophorm / isoamylalcohol
( MP biomedicals illkirch , ฝรั่งเศส ) ใน 2 ml หลอด และหวั่นไหวในเครื่องปั่น ( เครื่องมือ heidolph
ค่าใช้จ่าย ,kehlheim , เยอรมนี )
เป็นเวลา 15 นาที ตัวอย่างที่ระดับ 15 นาทีที่ 20000g
750 จะของนำใสเพิ่ม 750 จะหนาว
ไอโซโพรพานอลบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที ระดับที่ 20000g
ตัวอย่าง 15 นาที น่าน
ถูกทิ้งและ 500 จะได้เอทานอล ( 70% ) ถูกเพิ่มเข้ามา หลังจากอ่อนโยน
เขย่าจำนวนไฟฟ้าที่ 20000g เป็นเวลา 5 นาทีเอทานอล
ถูกลบออกและเม็ดที่เหลือถูกละลายใน TE buffer
( 1  ) [ 10 มม. นอกจากนี้  กรดไฮโดรคลอริก pH  8.0 ( 1 mM EDTA ] .
เจือจางดีเอ็นเอบริสุทธิ์โดยใช้เชื้อบริสุทธิ์ qiaquick
ชุด ( เพิ่ม Hilden , เยอรมนี ) และตัวอย่าง 30 จะใช้
บัฟเฟอร์