2.4. Digestive enzyme activitiesEnz

2.4. Digestive enzyme activities
Enzymatic activities were determined on digestive organs (hepatopancreas and intestine) for each individual. Single tissues were homogenized in 350–460 μl distilled water and sonicated in ice bath until total tissue disintegration (Ultrasonic Dismembrator, Fisher Scientific, USA). The homogenates were then centrifuged for 20 min at 16900 × g at 4 °C and the extracts used for the analysis. Fluorometric analyses were performed to determine the digestive activities except for neutral lipase, which was assayed as shown by Iijima et al. (1998). Trypsin and pancreatic lipase were measured according to Rotllant et al. (2008), modified by Toledo-Cuevas et al. (2011). Total alkaline proteases were performed based on Twining (1984) and amylase activity was recorded by the EnzChek Ultra AmylaseAssay kit (E33651 Molecular Probes, Invitrogen). The fluorometric measurements were carried out using a Fluoroskan Ascent equipment (Thermo Fisher Scientific, Vantaa, Finland). The activities were reported as total activity [Fluorescence Units (FU) per segment (FU segment-1)] and specific activity (FU mg protein-1). For neutral lipase, 1 U of enzyme activity was defined as 1 mmol of hydrolyzed substrate released per min. Each assay was performed in duplicate. Protein concentration was measured in homogenates as described by Bradford (1976).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 กิจกรรมเอนไซม์ย่อยอาหาร
กิจกรรมของเอนไซม์ได้รับการพิจารณาในอวัยวะย่อยอาหาร (ตับและลำไส้) สำหรับแต่ละบุคคล เนื้อเยื่อเดียวปั่นในน้ำกลั่น 350-460 ไมโครลิตรและ sonicated ในอ่างน้ำแข็งจนสลายเนื้อเยื่อรวม (dismembrator ล้ำฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ usa)homogenates ถูกปั่นแล้วเป็นเวลา 20 นาทีที่ 16900 ×กรัมที่ 4 ° C และสารสกัดที่ใช้ในการวิเคราะห์ การวิเคราะห์ fluorometric ได้ดำเนินการเพื่อตรวจสอบกิจกรรมการย่อยอาหารยกเว้นเอนไซม์ไลเปสที่เป็นกลางซึ่งได้รับการวิเคราะห์ที่แสดงโดย Iijima ตอัล (1998) trypsin และเอนไซม์ไลเปสตับอ่อนถูกวัดตาม rotllant ตอัล (2008) แก้ไขโดย toledo-cuevas ตอัล (2011)โปรตีเอสอัลคาไลน์รวมได้ดำเนินการขึ้นอยู่กับพัน (1984) และกิจกรรมอะไมเลสถูกบันทึกไว้โดยชุด enzchek พิเศษ amylaseassay (e33651 probes โมเลกุล Invitrogen) วัด fluorometric ถูกดำเนินการโดยใช้อุปกรณ์ขึ้น fluoroskan (เทอร์โมฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์วานตา, ฟินแลนด์)กิจกรรมที่ได้รับรายงานเป็นกิจกรรมรวม [หน่วยเรืองแสง (ฟู) ต่อส่วน (ฟูส่วน 1)] และกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจง (ฟูมิลลิกรัมโปรตีน 1) กับเอนไซม์ไลเปสที่เป็นกลาง 1 u ของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็น 1 มิลลิโมลของสารตั้งต้นไฮโดรไลซ์ออกต่อนาที แต่ละการทดสอบได้ดำเนินการในที่ซ้ำกัน ความเข้มข้นของโปรตีนที่ถูกวัดใน homogenates ตามที่อธิบายไว้โดยแบรดฟอ (1976)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 การกิจกรรมย่อยอาหารเอนไซม์
กิจกรรมเอนไซม์ในระบบถูกกำหนดในอวัยวะย่อยอาหาร (hepatopancreas และลำไส้) สำหรับแต่ละบุคคล เนื้อเยื่อเดียวถูก homogenized น้ำกลั่น μl 350–460 และ sonicated ในอ่างน้ำแข็งจนเนื้อเยื่อรวมบูรณภาพ (Ultrasonic Dismembrator, Fisher วิทยาศาสตร์ สหรัฐอเมริกา) Homogenates ถูก centrifuged แล้วสำหรับ 20 นาทีที่ 16900 × g ที่ 4 ° C และสารสกัดที่ใช้ในการวิเคราะห์ Fluorometric วิเคราะห์ได้ดำเนินการกำหนดกิจกรรมย่อยอาหารยกเว้นเอนไซม์ไลเปสเป็นกลาง ซึ่งถูก assayed แสดงโดย Iijima et al. (1998) ทริปซินและเอนไซม์ไลเปสที่ตับอ่อนถูกวัดตาม Rotllant et al. (2008), แก้ไขโดยโทเลโด Cuevas et al. (2011) ด่าง proteases รวมดำเนินตาม Twining (1984) และ amylase กิจกรรมบันทึก โดยชุด EnzChek Ultra AmylaseAssay (Probes โมเลกุล E33651, Invitrogen) วัด fluorometric ได้ดำเนินการใช้อุปกรณ์ Fluoroskan ขึ้น (เทอร์โม Fisher วิทยาศาสตร์ วานตา ฟินแลนด์) มีรายงานกิจกรรมเป็นกิจกรรมรวม [Fluorescence หน่วย (ฟู) ต่อเซ็กเมนต์ (ฟูเซ็กเมนต์-1)] และกิจกรรม (ฟูมิลลิกรัมโปรตีน-1) สำหรับเอนไซม์ไลเปสเป็นกลาง 1 U ของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็น 1 mmol ของ hydrolyzed พื้นผิวออกต่อนาที ทดสอบแต่ละที่ดำเนินการสำเนา ความเข้มข้นของโปรตีนถูกวัดใน homogenates ตามที่อธิบายไว้ โดยแบรดฟอร์ด (1976)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . กิจกรรม
enzymatic กิจกรรมเอนไซม์ย่อยอาหารได้ถูกกำหนดในอวัยวะย่อยอาหาร( hepatopancreas และลำไส้ใหญ่)สำหรับแต่ละรายการ เนื้อเยื่อสดพร่องมันเนยเป็นคนเดียวในน้ำกลั่น μl 350-460 sonicated ในอ่างอาบน้ำและน้ำแข็งจนกว่าความพินาศเนื้อเยื่อรวม(อัลตราโซนิค dismembrator ชาวประมงทางวิทยาศาสตร์ USA )homogenates ได้ centrifuged สำหรับ 20 นาทีที่ G 16900 ×ที่ C 4 ° C และสารสกัดจากสาหร่ายที่ใช้ในการวิเคราะห์ การวิเคราะห์ fluorometric นั้นดำเนินการเพื่อกำหนดกิจกรรมต่างๆย่อยอาหารได้ยกเว้นสำหรับ lipase เป็นธรรมชาติซึ่งก็เพียรพยายามตามที่แสดงโดย iijima et al . ( 1998 ) trypsin และ lipase pancreatic เป็นวัดตาม rotllant et al . ( 2008 )ได้รับการแก้ไขโดย toledo-cuevas et al . ( 2011 )proteases อัลคาไลน์ทั้งหมดนั้นดำเนินการตาม twining ( 1984 )และการทำกิจกรรม amylase ถูกบันทึกไว้โดย enzchek Ultra amylaseassay ชุด( อี 33651 ใช้ัคุณลักษณะ Teaming ,ระดับโมเลกุล invitrogen ) การวัดค่า fluorometric ที่ถูกหามออกมาจากการใช้ fluoroskan ทางอุปกรณ์(แบบร้อนชาวประมงทางวิทยาศาสตร์ Vantaa ,ฟินแลนด์,)กิจกรรมที่มีรายงานว่ายอดรวมการทำงานของ[คุณสมบัติฟลูเรซ - เซ็นซ( Fu )ต่อตลาด( Fu ตลาด - 1 )]และเฉพาะกิจกรรม(กังฟูมก.โปรตีน - 1 ) สำหรับ lipase เป็นกลาง 1 U ของการทำงานของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็น 1 มิลลิโมลของผิวหน้าต้มด้วยกรดเกลือจากนั้นจะถูกทำออกมาต่อนาทีสอบแต่ละครั้งได้ดำเนินการในที่ซ้ำกัน การทำสมาธิโปรตีนวัดได้ใน homogenates เช่นที่อธิบายไว้ใน Bradford ( 1976 )