Flocculation properties of selected

Flocculation properties of selected strains were tested according to Bony et al.16 with slight modification. Yeasts were cultured for 3 days at 26 °C in tubes containing 10 mL of YPD (2% peptone, 1% yeast extract and 2% glucose) medium under permanent shaking (150 rpm). Cells were collected by centrifugation and washed with deionized water. After that, cells were suspended into 10 mL of 50 mM acetate buffer (pH 4.5) enriched by 3 mM CaSO4. The tubes of suspended cells were mixed for 30 s and the turbidity of yeast suspension was evaluated by the naked eye. Flocculation degree was determined using a subjective scale which means that the sedimentation was observed depending on the time. The following evaluation was used: + the cells flocculate and sediment after 15 min (partially clear solution); ++ immediate flocculation; w – flocculation after 1 h.

Ethanol tolerance was tested in 5 mL of YPD medium supplemented by 12, 14, 15, 16 and 17% (v/v) ethanol and the tubes were inoculated by 100 μL of cell suspension (cell concentration approx. 5 log CFU mL−1). Inoculated tubes were cultivated at 26 °C for 10 days. The culture density was measured daily by DEN-1B densitometer (Biosan, Latvia). Specific growth rate μ (h−1) and the length of the lag phase t (h) were estimated.

Osmotolerance of selected strains was tested in 5 mL of YPD medium with 40% (w/v) and 50% (w/v) glucose. The cells density was measured as described above.

H2S production by selected strains was tested on Biggy agar (Himedia, India) which contains bismuth as an indicator. After incubation at 26 °C for 3–5 days, the zone surrounding the colony was evaluated as the follows: − no production; + white colonies; ++ light brown; +++ brown; ++++ dark brown/black.5

Malic and acetic acid utilization by selected strains was tested on 0.67% yeast nitrogen base (YNB, Himedia) agar plates containing 0.5% (w/v) malic acid, respectively, 0.25% (w/v) acetic acid. The growth of colonies was screened. Acetic acid production was screened on CaCO3 agar plates (Custer's chalk medium) containing 0.5% yeast extract, 5% glucose, 0.5% CaCO3 and 2% agar. The acetic acid production enabled solubility of CaCO3 which resulted as a clear zone surrounding the colonies.5

The isolated yeasts were also tested for some enzymatic activities such as β-glucosidase and glycosidase activities. The activities were determined by agar plating. The plates were incubated at 26 °C for 3–5 days.17

β-Glucosidase activity was screened onto selective medium containing 0.67% yeast nitrogen base (YNB, Himedia), 0.5% arbutin and 2% agar. The pH of the medium was adjusted to 5 before autoclaving. Two milliliters of a filter sterilized 1% ferric ammonium citrate solution was added to 100 mL media before plates pouring. Colonies showing activity were identified by a dark brown halo around the colonies.17

Glycosidase activity was determined using the plates with the selective medium containing 0.67% yeast nitrogen base (YNB, Himedia), 0.2% rutin and 2% agar. The glycosidase activity was detected as a clear zone around the colonies

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดสอบคุณสมบัติการเกาะกลุ่มของสายพันธุ์ที่เลือกตามกระดูก et al.16 มีปรับเปลี่ยนเล็กน้อย รายีสต์ถูกล้าง 3 วันที่ 26 ° C ในหลอดบรรจุ 10 mL ของ YPD (peptone 2% สารสกัดจากยีสต์ 1% และ 2% กลูโคส) กลางใต้ถาวรสั่น (150 rpm) เซลล์ถูกรวบรวม โดยหมุนเหวี่ยง และล้าง ด้วยน้ำจุ หลังจากนั้น เซลล์ถูกหยุดชั่วคราวเป็น 10 mL ของบัฟเฟอร์ acetate 50 มม. (pH 4.5) อุดมไป ด้วย 3 มม. CaSO4 หลอดของระงับเซลล์รวม 30 s และความขุ่นของกันกระเทือนยีสต์ประกอบ ด้วยตาเปล่า องศาเกาะกลุ่มที่ถูกกำหนดโดยใช้มาตราส่วนแบบอัตนัยซึ่งหมายความ ว่า การตกตะกอนพบว่า ขึ้นอยู่กับเวลา การประเมินต่อไปนี้ใช้: + flocculate เซลล์และตะกอนหลังจาก 15 นาที (ทางออกชัดเจนบางส่วน); ++ เกาะกลุ่มได้ทันที w – เกาะกลุ่มหลังจาก 1 ชมยอมรับเอทานอลได้รับการทดสอบใน 5 มล.ของ YPD กลางเสริม ด้วย 12, 14, 15, 16 และ 17% (v/v) เอทานอล และหลอดถูก inoculated โดย μL 100 ของระงับเซลล์ (เซลล์ความเข้มข้นประมาณ 5 ล็อก CFU mL−1) หลอด inoculated ได้ปลูกที่ 26 ° C เป็นเวลา 10 วัน ความหนาแน่นของวัฒนธรรมโดยวัดทุกวันจาก densitometer DEN 1B (Biosan ลัตเวีย) เติบโตเฉพาะอัตราμ (h−1) และความยาวของการหน่วงเฟส t (h) ได้ประมาณOsmotolerance ของสายพันธุ์ที่เลือกได้รับการทดสอบใน 5 มล.ของ YPD กลาง 40% (w/v) และน้ำตาลกลูโคส 50% (w/v) ความหนาแน่นของเซลล์ถูกวัดตามที่อธิบายไว้ข้างต้นH2S ผลิต โดยเลือกสายพันธุ์ที่ได้รับการทดสอบบนวุ้น Biggy (Himedia อินเดีย) ซึ่งประกอบด้วยบิสมัทเป็นตัวบ่งชี้ หลังจากบ่มที่อุณหภูมิ 26 ° C 3-5 วัน โซนรอบอาณานิคมถูกประเมินดังนี้: −ไม่ผลิต + ขาว อาณานิคม ++ สีน้ำตาลใส +++ สีน้ำตาล +++ brown/black.5 มืดทดสอบการใช้ประโยชน์ โดยเลือกสายพันธุ์มาลิกและกรดอะซิติกใน 0.67% ยีสต์ไนโตรเจนฐาน (YNB, Himedia) แผ่นวุ้นที่ประกอบด้วยกรดมาลิก 0.5% (w/v) ตามลำดับ กรดอะซิติก 0.25% (w/v) การเติบโตของอาณานิคมถูกฉาย กรดอะซิติกผลิตถูกฉายบนแผ่นวุ้น CaCO3 (ชอล์กกลางของคัสเตอร์) ที่ประกอบด้วยกลูโคส 5%, 0.5% วุ้น CaCO3 และ 2% สารสกัดจากยีสต์ 0.5% ละลายของ CaCO3 ซึ่งเป็นโซนชัดเจนรอบ colonies.5 เปิดใช้งานการผลิตกรดอะซิติกรายีสต์แยกยังรับการทดสอบสำหรับบางกิจกรรมเอนไซม์เช่นβ-glucosidase และกิจกรรม glycosidase กิจกรรมที่ดำเนินการ โดยชุบวุ้น แผ่นได้รับการกกที่ 26 ° C สำหรับ 3-5 days.17Β-Glucosidase กิจกรรมถูกฉายลงบนงานปานกลางที่ประกอบด้วยไนโตรเจนยีสต์ 0.67% ฐาน (YNB, Himedia), อาร์บูติน 0.5% และ 2% วุ้น มีการปรับปรุงค่า pH ของตัวกลางเป็น 5 ก่อนสปอร์ สองมิลลิลิตรของโซลูชันซิเตรทแอมโมเนีย ferric 1% กรองฆ่าเชื้อถูกสื่อ 100 มล.ก่อนแผ่นเท แสดงกิจกรรมของอาณานิคมถูกระบุ โดยรัศมีสีน้ำตาลเข้มรอบ colonies.17Glycosidase กิจกรรมที่ถูกกำหนดโดยใช้แผ่นงานขนาดกลางที่ประกอบด้วยไนโตรเจนยีสต์ 0.67% ฐาน (YNB, Himedia), rutin 0.2% และ 2% วุ้น พบกิจกรรม glycosidase เป็นโซนชัดเจนทั่วอาณานิคม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

คุณสมบัติตะกอนของสายพันธุ์ที่คัดได้รับการทดสอบตามกระดูกและ al.16 มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ยีสต์เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 3 วันที่ 26 ° C ในหลอดบรรจุ 10 มล YPD (2% เปปโตน, สารสกัดจากยีสต์ 1% และกลูโคส 2%) กลางภายใต้ถาวรสั่น (150 รอบต่อนาที) เซลล์ที่ถูกเก็บรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยงและล้างด้วยน้ำปราศจากไอออน หลังจากนั้นเซลล์ถูกระงับเป็น 10 มิลลิลิตรขนาด 50 มมบัฟเฟอร์อะซิเตท (pH 4.5) อุดมไปด้วย 3 mm CaSO4 หลอดของเซลล์ที่ถูกระงับถูกผสมเป็นเวลา 30 วินาทีและความขุ่นของการระงับยีสต์ถูกประเมินด้วยตาเปล่า การศึกษาระดับปริญญาตะกอนถูกกำหนดโดยใช้ขนาดอัตนัยซึ่งหมายความว่าการตกตะกอนได้สังเกตขึ้นอยู่กับเวลา การประเมินผลดังต่อไปนี้ถูกนำมาใช้: + เซลล์ flocculate และตะกอนหลังจาก 15 นาที (วิธีการแก้ปัญหาที่ชัดเจนบางส่วน); ++ ตะกอนทันที W -. ตะกอนหลังวันที่ 1 H

อดทนเอทานอลได้รับการทดสอบในขนาด 5 ml ของกลาง YPD เสริมด้วย 12, 14, 15, 16 และ 17% (v / v) เอทานอลและท่อถูกเชื้อโดย 100 ไมโครลิตรของเซลล์แขวนลอย (เซลล์ความเข้มข้นประมาณ 5. log CFU mL-1) หลอดเชื้อได้รับการปลูกฝังที่ 26 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 วัน ความหนาแน่นของวัฒนธรรมวัดทุกวันโดย DEN-1B densitometer (Biosan ลัตเวีย) อัตราการเจริญเติบโตจำเพาะμ (H-1) และความยาวของระยะล่าช้า T (H) อยู่ที่ประมาณ.

Osmotolerance ของสายพันธุ์ที่คัดได้รับการทดสอบในขนาด 5 ml ของกลาง YPD 40% (w / v) และ 50% (w / v ) กลูโคส ความหนาแน่นของเซลล์วัดตามที่อธิบายไว้ข้างต้น.

ผลิต H2S โดยสายพันธุ์ที่คัดได้รับการทดสอบ Biggy วุ้น (HIMEDIA อินเดีย) ซึ่งมีบิสมัทเป็นตัวบ่งชี้ หลังจากการบ่มที่อุณหภูมิ 26 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3-5 วันโซนรอบอาณานิคมได้รับการประเมินดังนี้ - การผลิตไม่มี; + อาณานิคมสีขาว; ++ สีน้ำตาลอ่อน; +++ สีน้ำตาล ++++ สีน้ำตาลเข้ม / black.5

Malic และการใช้กรดอะซิติกโดยสายพันธุ์ที่คัดได้รับการทดสอบบนฐานยีสต์ไนโตรเจน 0.67% (YNB, HIMEDIA) วุ้นแผ่นที่มี 0.5% (w / v) กรดมาลิกตามลำดับ, 0.25% (w / v) กรดอะซิติก การเจริญเติบโตของโคโลนีที่ได้รับการคัดเลือก การผลิตกรดอะซิติกกำลังฉายบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อ CaCO3 (กลางชอล์กคัสเตอร์) ที่มีสารสกัดจากยีสต์ 0.5%, 5% กลูโคส CaCO3 0.5% และ 2% วุ้น การผลิตกรดอะซิติกเปิดใช้งานการละลายของ CaCO3 ซึ่งส่งผลให้เป็นโซนที่ชัดเจนรอบ colonies.5

ยีสต์บางแห่งยังมีการทดสอบสำหรับกิจกรรมของเอนไซม์บางอย่างเช่นβ-glucosidase และกิจกรรม glycosidase กิจกรรมที่ถูกกำหนดโดยการชุบวุ้น แผ่นถูกบ่มที่อุณหภูมิ 26 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3-5 days.17

กิจกรรมβ-glucosidase กำลังฉายลงบนกลางเลือกที่มี 0.67% ฐานยีสต์ไนโตรเจน (YNB, HIMEDIA), อาร์บูติ 0.5% และ 2% วุ้น ค่า pH ของกลางมีการปรับถึง 5 ก่อนที่จะนึ่งฆ่าเชื้อ สองมิลลิลิตรกรองฆ่าเชื้อ 1% ferric แก้ปัญหาแอมโมเนียมซิเตรตถูกบันทึกอยู่ใน 100 มลสื่อก่อนที่จะเทแผ่น อาณานิคมแสดงกิจกรรมโดยระบุรัศมีสีน้ำตาลเข้มรอบ colonies.17

กิจกรรม glycosidase ถูกกำหนดโดยใช้แผ่นที่มีขนาดกลางเลือกที่มี 0.67% ฐานยีสต์ไนโตรเจน (YNB, HIMEDIA), รูติน 0.2% และ 2% วุ้น กิจกรรม glycosidase ถูกตรวจพบว่าเป็นโซนที่ชัดเจนรอบอาณานิคม