In order to genotype the investigat

In order to genotype the investigated accessions, 15 SSR
pair primers were chosen for their amplification capacity
and polymorphism (Table 2). Each 25-mL PCR reaction
contained 100 ng DNA, 1.5 U of Taq polymerase, 5 mL of
PCR buffer 5X, 2.5 mM of MgCl2, 0.2 mM of dNTPs, 0.5 mM
of SSR forward and reverse primer. PCR reactions were
performed in Veriti 96-well thermal cycler programmed at
95 8C for 60 s, then 35 cycles of 94 8C for 45 s, 56 8C for 45 s
(TAA15, TAA41, CAC23, ATC09) and 58 8C for 75 s (for the
remaining primers) and 72 8C for 75 s, ending with 72 8C for
7 min. The separation of PCR products was carried out by
electrophoresis on a 2.6% agarose gel. The size of the
amplified fragments was estimated using the 100-pb DNA
ladder.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในสั่งการจีโนไทป์ accessions สอบสวน 15 SSRไพรเมอร์คู่ถูกเลือกสำหรับความจุ amplificationและความแตกต่าง (ตาราง 2) แต่ละปฏิกิริยา PCR 25 มิลลิลิตรมีอยู่ 100 ฉบับดีเอ็นเอ พอลิเมอเรส U Taq, 5 มล.ของ 1.5PCR บัฟเฟอร์ 5 X, 2.5 มม.ของ 0.2 mM dNTPs, 0.5 mM, MgCl2SSR พื้นไปข้างหน้า และย้อนกลับ ปฏิกิริยา PCR ได้ดำเนินการใน Veriti 96 หลุม cycler ความร้อนโปรแกรมที่95 C 8 60 s แล้วรอบ 35 ของ 94 8C 45 s, 8C 56 45 s(TAA15, TAA41, CAC23, ATC09) และ 58 8C สำหรับ 75 s (สำหรับการไพรเมอร์ที่เหลือ) และ 72 8C สำหรับ 75 s ลงท้าย ด้วย 8C 72 สำหรับ7 นาที แบ่งแยกผลิตภัณฑ์ PCR ได้ดำเนินการโดยอิบนเจล 2.6% agarose ขนาดของการประมาณ amplified เศษใช้ดีเอ็นเอ 100 pbบันได

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อที่จะตรวจสอบ genotype สาย 15 SSR
ไพรเมอร์คู่ที่ได้รับเลือกสำหรับความจุ Fi ไอออนบวกของพวกเขา ampli
และ polymorphism (ตารางที่ 2) แต่ละ 25 มล PCR ปฏิกิริยา
ที่มีอยู่ 100 ดีเอ็นเอ NG 1.5 U ของ Taq โพลิเมอร์ 5 มล
PCR บัฟเฟอร์ 5X, 2.5 มิลลิเมตร MgCl2 0.2 มิลลิเมตร dNTPs, 0.5 มิลลิ
ของ SSR ไปข้างหน้าและย้อนกลับไพรเมอร์ ปฏิกิริยา PCR ถูก
ดำเนินการใน Veriti 96 หลุม Cycler ความร้อนโปรแกรมที่
95 8C 60 s แล้ว 35 รอบของ 94 8C 45 S, 56 8C 45 s
(TAA15, TAA41, CAC23, ATC09) และ 58 8C 75 วินาที ( สำหรับ
ไพรเมอร์ที่เหลือ) และ 72 8C 75 s, ลงท้ายด้วย 72 8C สำหรับ
7 นาที การแยกผลิตภัณฑ์ PCR ได้ดำเนินการโดย
electrophoresis บน agarose gel ที่ 2.6% ขนาดของ
ampli Fi เศษเอ็ดเป็นที่คาดกันใช้ 100-PB ดีเอ็นเอ
บันได

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อศึกษาพันธุกรรม สายพันธุ์ SSR 15คู่ไพรเมอร์ที่ถูกเลือกสำหรับพวกเขา ampli จึงบวกความจุแล้ว ) ( ตารางที่ 2 ) แต่ละ 25 มิลลิลิตรปฏิกิริยา PCRมี 100 ของดีเอ็นเอ 1.5 U ของแท็กการ 5 มิลลิลิตรPCR buffer 5x , 2.5 มม. ไอโซโทป , 0.2 มม. dntps 0.5 มม.ของ SSR ไปข้างหน้าและย้อนกลับ ไพรเมอร์ ปฏิกิริยา PCR คือดำเนินการใน veriti 96 ดีความร้อนรอบโปรแกรมที่95 8C 60 s 35 รอบ 94 8C 45 , 56 8C 45 วินาที( taa15 taa41 cac23 , , , atc09 ) และ 58 8C 75 ( สำหรับไพรเมอร์ที่เหลือ ) และ 72 8C 75 S ลงท้ายด้วย 72 8C สำหรับ7 . แยกผลิตภัณฑ์ PCR ถูกทำโดยเจลอิเลคโตรโฟรีซีสบน , 2.6 % ขนาดของampli จึงเอ็ดชิ้นส่วนประมาณ 100 PB โดยใช้ดีเอ็นเอบันได