PCNA-1 cells were treated with lupe

PCNA-1 cells were treated with lupeol (0, 15, 30, and 60μM) for 36 h, respectively. Then, the cells were collected, washed twice with ice-cold PBS, and lysed on the culture dishes using RIPA lysis buffer (1 % NP-40, 0.1 % SDS, 0.5 % sodium deoxycholate, 150 mmol/L NaCl, and 10 mmol/L Tris–HCl) containing 1/100 phenylmethanesulfonyl fluoride solution (Beyotime Institute of Biotechnology, Shanghai, China). The total protein concentration was analyzed by the bicinchoninic acid (Beyotime Institute ofBiotechnology)method, and 40μg of each sample was separated by SDS-PAGE (8, 10, or 12 %) and then transblotted onto a PVDF membrane

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

PCNA-1 เซลล์ได้รับการรักษา ด้วย lupeol (0, 15, 30 และ 60μM) สำหรับ 36 h ตามลำดับ เซลล์ถูกรวบรวม ล้าง ด้วย PBS ฉ่ำสองครั้ง แล้ว lysed บนอาหารวัฒนธรรมใช้ริป้าราคา lysis บัฟเฟอร์ (1% NP-40, SDS 0.1%, 0.5% โซเดียม deoxycholate, 150 mmol/L NaCl และ 10 mmol/L ตรี – HCl) ประกอบด้วย 1/100 phenylmethanesulfonyl ฟลูออไรด์โซลูชัน (สถาบันเทคโนโลยีชีวภาพ Beyotime เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) ความเข้มข้นของโปรตีนรวมได้วิเคราะห์ โดยวิธีกรด (ofBiotechnology Beyotime สถาบัน) bicinchoninic และ 40μg ของแต่ละอย่างถูกคั่น ด้วยเพ SDS (8, 10 หรือ 12%) และ transblotted จากนั้นไปเมมเบรน PVDF

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เซลล์ PCNA-1 ได้รับการรักษาด้วย lupeol (0, 15, 30 และ60μM) สำหรับ 36 ชั่วโมงตามลำดับ จากนั้นเซลล์ถูกเก็บล้างครั้งที่สองกับพีบีเอสเย็นและ lysed ในอาหารเพาะเลี้ยงโดยใช้บัฟเฟอร์ lysis RIPA (1% NP-40, 0.1% SDS, 0.5% Deoxycholate โซเดียม 150 มิลลิโมล / ลิตรโซเดียมคลอไรด์และ 10 มิลลิโมล / L Tris-HCl) ที่มีวิธีการแก้ปัญหา 1/100 phenylmethanesulfonyl ลูออไรด์ (Beyotime สถาบันเทคโนโลยีชีวภาพ, เซี่ยงไฮ้, จีน) ความเข้มข้นของโปรตีนรวมได้รับการวิเคราะห์โดยกรด bicinchoninic (Beyotime สถาบัน ofBiotechnology) วิธีการและ40μgของกลุ่มตัวอย่างแต่ละคนถูกแยกจากกันโดย SDS-PAGE (8, 10, หรือ 12%) และ transblotted แล้วลงบนเมมเบรน PVDF