The CChMVd-HHR was synthesized by o

The CChMVd-HHR was synthesized by overnight in vitro transcription of the PCR products. To avoid cleavage during transcription,a deoxyribonucleotide (5′-CATGGATCTTCATCAGGACACC
GAC-3′), complementary to a part of the HHR [15]was used in the transcription mixture at a concentration of 10 μM. The RNAs obtained were purified by denaturing (7 M urea) 15% polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE) and eluted from the gel overnight in 300 mM sodium acetate, pH 5.2 at 4 °C. The RNAs were recovered from the solution by filtration through 0.22 μm diameter micro-filters and precipitation with ethanol. The purified ribozyme was finally resuspended in water and stored at −20 °C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

CChMVd-HHR ถูกสังเคราะห์ โดย transcription ค้างคืนในผลิตภัณฑ์ PCR เพื่อหลีกเลี่ยงความแตกแยกระหว่าง transcription, deoxyribonucleotide (5′-CATGGATCTTCATCAGGACACCGAC-3′), เสริมเพื่อใช้เป็นส่วนหนึ่งของ HHR [15] ใน transcription ส่วนผสมที่เข้มข้นของ 10 μM RNAs ได้บริสุทธิ์ โดย denaturing (ยูเรีย 7 M) 15% polyacrylamide เจ electrophoresis(PAGE) และ eluted จากเจลค้างคืนใน 300 mM โซเดียม acetate, pH 5.2 ที่ 4 องศาเซลเซียส RNAs ถูกกู้คืนจากการแก้ปัญหา โดยการกรองผ่าน 0.22 μm ขนาดไมโครกรองและฝนกับเอทานอล ไรโบไซม์บริสุทธิ์ในที่สุด resuspended ในน้ำ และเก็บไว้ที่ −20 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

CChMVd-HHR ถูกสังเคราะห์โดยค้างคืนในหลอดทดลองการถอดรหัสของผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ เพื่อหลีกเลี่ยงความแตกแยกในระหว่างการถอดความ deoxyribonucleotide (5'-CATGGATCTTCATCAGGACACC
GAC-3 ') ประกอบกับส่วนหนึ่งของ HHR [15] ถูกนำมาใช้ในส่วนผสมถอดความที่ความเข้มข้น 10 ไมโครโมลา RNAs ได้มาบริสุทธิ์โดย denaturing (7 M ยูเรีย) 15% ใช้ polyacrylamide gel electrophoresis (หน้า) และชะจากเจลค้างคืนในน้ำนมโซเดียม 300 มิลลิพีเอช 5.2 ที่ 4 ° C RNAs หายจากการแก้ปัญหาโดยการกรองผ่าน 0.22 ไมโครเมตรเส้นผ่าศูนย์กลางกรองไมโครและฝนที่มีเอทานอล ribozyme บริสุทธิ์ถูก resuspended ที่สุดในน้ำและเก็บไว้ที่ -20 ° C

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การ cchmvd HHR ถูกสังเคราะห์โดยการถอดความในชั่วข้ามคืนของผลิตภัณฑ์ PCR เพื่อหลีกเลี่ยงความแตกแยกในระหว่างการถอดความ , deoxyribonucleotide ( 5 ’ - catggatcttcatcaggacacc
gac-3 School ) ซึ่งเป็นส่วนหนึ่งของ HHR [ 15 ] ถูกใช้ในการถอดรหัสผสมที่ความเข้มข้น 10 μม.ที่ได้ถูกทำให้บริสุทธิ์ด้วย RNAs ี่ ( 7 M ยูเรีย ) 15% polyacrylamide gel electrophoresis ( หน้า ) และตัวอย่างจากเจลค้างคืนในโซเดียมอะซีเตท 300 มม. , 5.2 pH 4 ° C RNAs พบทางออกโดยการกรองผ่าน 0.22 เมตรμไมโครกรองและการตกตะกอนด้วยเอทานอล และเน็ตแวร์ก็ resuspended ในน้ำและอุณหภูมิ− 20 ° C