Fresh leaves and stems of C. procera, C. roseus, E. prostrata, V. amygdalina were collected from Khartoum (15°38′ N 32°32′ E) and T. foenum-graecum seeds were obtained from Khartoum local market. The plants were identified by Dr. Haider Abdalgadir, taxonomist in the Medicinal and Aromatic Plants Research Institute in Khartoum (Sudan).
Endophytic fungi were isolated from different parts of the collected medicinal plants after surface sterilization as described by Zhang et al. [4]. The sterilized pieces were cultivated on potato dextrose agar medium which was amended with chloramphenicol (500 mg/L) to suppress bacterial growth. The efficiency of the surface sterilization procedure was confirmed by plating the final rinse water. Furthermore, the endophytic fungi were subcultured in order to obtain pure cultures, numbered and reserved at 4 °C. Identification of the fungal strains was based on the morphology of cultures or hyphae, the characteristics of the spores, and reproductive structures if the feature were discernible [5]. The cultures which failed to sporulate were grouped as mycelia sterilia [6].
Each fungal strain was cultivated on 20 petri dishes potato dextrose agar, and was incubated at 30 °C for 7–15 d. The solid fungal culture was crushed and extracted with ethyl acetate overnight, filtered, evaporated and preserved at 4 °C.
Dry leaves and stems of V. amygdalina, C. procera, C. roseus, E. prostrata and seeds of T. foenum-graecum were ground into fine powder. Each sample (20 g) was extracted with ethyl acetate overnight, filtered, evaporated and stored at 4 °C.
Total phenolic contents were determined using the Folin–Ciocalteu method as described by Wolfe et al. [7]. The absorbance of the resulting was measured with spectrophotometer at 760 nm using a microtiter plate reader (Synergy HT Biotek, logiciel GEN5). Analysis was done in triplicate for each extract. Quantification was based on the standard curve of gallic acid. The results were expressed as gallic acid equivalent (GAE), i.e., mg gallic acid/g.
Total antioxidant capacity (TAC) of the extracts was estimated using DPPH in vitro method as described by Yagi et al. [8]. The absorbance was measured spectrophotometrically at 517 nm using a microtiter plate reader (Synergy HT Biotek, logiciel GEN5). Ascorbic acid was used as reference antioxidant compound. Each analysis was done in triplicate. The IC50 value was calculated from the linear regression of plots of concentration of the test sample against the mean percentage of the antioxidant activity. Results were expressed as mean ± SEM and the IC50 values obtained from the regression plots (Sigma PlotsR 2001, SPSS Science) had a good coefficient of correlation, (R2 = 0.998).
ใบสดและลำต้นของ C. procera, C. ฝรั่ง E. prostrata, V. amygdalina ได้รวบรวมจากคาร์ทูม (15 ° 38′ N 32 ° 32′ อี) และต. foenum graecum เมล็ดพืชได้รับจากคาร์ทูมตลาดท้องถิ่น พืชที่ระบุ โดยดร. Haider Abdalgadir, taxonomist Medicinal และ สถาบันวิจัยพืชหอมทุม (ซูดาน)เชื้อรา endophytic ได้แยกต่างหากจากส่วนต่าง ๆ ของพืชสมุนไพรรวบรวมหลังจากฆ่าเชื้อพื้นผิวตามที่อธิบายไว้โดย Zhang et al. [4] ชิ้น sterilized ถูก cultivated บนสื่อกลาง agar ขึ้นมันฝรั่งที่ถูกแก้ไขกับ chloramphenicol (500 mg/L) จะระงับการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย ประสิทธิภาพของกระบวนการฆ่าเชื้อที่ผิวได้รับการยืนยัน โดยชุบน้ำล้างสุดท้าย นอกจากนี้ เชื้อรา endophytic ถูก subcultured เพื่อรับวัฒนธรรมบริสุทธิ์ ลำดับเลข และสำรองไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส รหัสของสายพันธุ์เชื้อราได้ขึ้นอยู่กับรูปร่างวัฒนธรรม หรือ hyphae ลักษณะเพาะเฟิร์น และโครงสร้างสืบพันธุ์หากคุณลักษณะ discernible [5] วัฒนธรรมที่ไม่สามารถ sporulate ถูกจัดกลุ่มเป็น mycelia sterilia [6]ต้องใช้แต่ละเชื้อราถูก cultivated บน 20 จาน petri มันฝรั่งขึ้น agar และถูก incubated ที่ 30 ° C สำหรับ d 7 – 15 วัฒนธรรมเชื้อราแข็งบด และสกัด ด้วยเอทิล acetate ค้างคืน กรอง ที่หายไป และเก็บรักษาไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสแห้งใบ และลำต้นของ V. amygdalina, C. procera, C. ฝรั่ง E. prostrata และเมล็ดของต. foenum-graecum มีพื้นดินเป็นผงดี แต่ละตัวอย่าง (20 กรัม) ถูกสกัด ด้วยเอทิล acetate ค้างคืน กรอง ที่หายไป และเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสฟีนอเนื้อหาทั้งหมดถูกกำหนดโดยใช้วิธี Folin-Ciocalteu ตามที่อธิบายไว้โดย Wolfe et al. [7] มีวัด absorbance ของการส่งผลกับเครื่องทดสอบกรดด่างที่ 760 nm ใช้เป็น microtiter plate อ่าน (Synergy เอชที Biotek, logiciel GEN5) ทำการวิเคราะห์ใน triplicate สำหรับการดึงข้อมูลแต่ละ นับเป็นไปตามเส้นโค้งมาตรฐานของกรด gallic ผลลัพธ์ได้แสดงเป็น gallic กรดเทียบเท่า (GAE), คือ มิลลิกรัมกรด gallic/gรวมหม่อน (มาตรวัด) สารสกัดจากการถูกประเมินโดยใช้ DPPH ในหลอดวิธีตามที่อธิบายไว้โดย Yagi et al. [8] Absorbance ที่ถูกวัด spectrophotometrically ที่ 517 nm ใช้เป็น microtiter plate อ่าน (Synergy เอชที Biotek, logiciel GEN5) มีใช้กรดแอสคอร์บิคเป็นสารต้านอนุมูลอิสระของการอ้างอิงผสม แต่ละการวิเคราะห์ที่ทำใน triplicate ค่า IC50 ถูกคำนวณจากการถดถอยเชิงเส้นของที่ดินของความเข้มข้นของตัวอย่างทดสอบกับเปอร์เซ็นต์เฉลี่ยของกิจกรรมการต้านอนุมูลอิสระ ผลลัพธ์ที่แสดงหมายถึง ± SEM และดีสัมประสิทธิ์ของความสัมพันธ์ มีค่า IC50 ที่ได้รับจากผืนถดถอย (ซิก PlotsR 2001 โปรแกรมวิทยาศาสตร์) (R2 = 0.998)
การแปล กรุณารอสักครู่..

ใบสดและลำต้นของซี procera ซี roseus อี prostrata โวลต์ amygdalina ถูกเก็บรวบรวมจากคาร์ทูม (15 ° 38 'N 32 ° 32' E) ตันและเมล็ด foenum-graecum ที่ได้รับจากคาร์ทูมตลาดท้องถิ่น พืชที่ถูกระบุโดยดร Abdalgadir ไฮเดอร์, taxonomist ในสมุนไพรและพืชหอมสถาบันวิจัยในคาร์ทูม (ซูดาน). ราเอนโดไฟต์ที่แยกได้จากส่วนต่าง ๆ ของพืชสมุนไพรที่เก็บรวบรวมหลังจากการฆ่าเชื้อที่พื้นผิวตามที่อธิบายไว้โดย Zhang et al, [4] ชิ้นที่ผ่านการฆ่าเชื้อได้รับการปลูกฝังในสื่อวุ้นเดกซ์โทรสมันฝรั่งซึ่งแก้ไขเพิ่มเติมกับ chloramphenicol (500 มก. / ลิตร) ในการยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรีย ประสิทธิภาพของขั้นตอนการฆ่าเชื้อพื้นผิวที่ได้รับการยืนยันโดยการชุบน้ำล้างสุดท้าย นอกจากนี้เชื้อราเอนโดไฟท์ที่ถูกเลี้ยงเพื่อให้ได้เชื้อบริสุทธิ์, หมายเลขและลิขสิทธิ์ที่ 4 ° C บัตรประจำตัวของสายพันธุ์เชื้อราก็ขึ้นอยู่กับลักษณะทางสัณฐานวิทยาของวัฒนธรรมหรือเส้นใยลักษณะของสปอร์และโครงสร้างสืบพันธุ์ถ้าคุณลักษณะที่ถูกมองเห็นได้ [5] วัฒนธรรมที่ล้มเหลวในการสร้างสปอร์ได้รับการจัดกลุ่มเป็น sterilia เส้นใย [6]. แต่ละสายพันธุ์ของเชื้อราได้รับการปลูกฝังในวันที่ 20 อาหารเลี้ยงเชื้อมันฝรั่งวุ้นเดกซ์โทรสและได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7-15 วัน วัฒนธรรมของเชื้อราที่เป็นของแข็งถูกบดและสกัดด้วยเอทิลอะซิเตค้างคืนกรองระเหยและเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส. ใบแห้งและลำต้นของโวลต์ amygdalina ซี procera ซี roseus อี prostrata และเมล็ดของต foenum- graecum ถูกบดเป็นผงละเอียด แต่ละตัวอย่าง (20 กรัม) ถูกสกัดด้วยเอทิลอะซิเตค้างคืนกรองระเหยและเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส. เนื้อหาฟีนอลทั้งหมดได้รับการพิจารณาโดยใช้วิธี Folin-Ciocalteu ตามที่อธิบายไว้โดยวูล์ฟและอัล [7] การดูดกลืนแสงของผลการวัดที่มี spectrophotometer ที่ 760 นาโนเมตรโดยใช้เครื่องอ่านแผ่นไมโครนี้ (Synergy HT Biotek, logiciel GEN5) วิเคราะห์ได้ทำในเพิ่มขึ้นสามเท่าสำหรับสารสกัดแต่ละ ปริมาณมีพื้นฐานอยู่บนกราฟมาตรฐานของกรดฝรั่งเศส ผลการวิจัยแสดงเป็นกรดเทียบเท่าฝรั่งเศส (GAE) คือกรดมิลลิกรัมฝรั่งเศส / g. รวมสารต้านอนุมูลอิสระ (TAC) ของสารสกัดจากประมาณโดยใช้วิธีการในหลอดทดลอง DPPH ตามที่อธิบายยากิ, et al [8] การดูดกลืนแสงที่ได้รับการวัด spectrophotometrically ที่ 517 นาโนเมตรโดยใช้เครื่องอ่านแผ่นไมโคร (Synergy HT Biotek, logiciel GEN5) วิตามินซีที่ใช้เป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่อ้างอิง การวิเคราะห์แต่ละคนได้ทำในเพิ่มขึ้นสามเท่า ค่า IC50 ที่คำนวณได้จากการถดถอยเชิงเส้นของการแปลงความเข้มข้นของตัวอย่างทดสอบกับร้อยละเฉลี่ยของสารต้านอนุมูลอิสระ ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SEM และค่า IC50 ที่ได้จากแปลงถดถอย (ซิกม่า PlotsR 2001 SPSS วิทยาศาสตร์) มีค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ที่ดีของ (R2 = 0.998)
การแปล กรุณารอสักครู่..

ใบสดและลำต้นของ procera , C . roseus e . prostrata V amygdalina เก็บตัวคาร์ทูม ( 15 / 38 32 ° 32 n ’’อี ) และเมล็ด graecum ต. foenum ได้จากตลาดท้องถิ่นคาร์ทูม พืชที่ถูกระบุโดย ดร. abdalgadir taxonomist Haider , ในสถาบันวิจัยพืชสมุนไพรในคาร์ทูมและหอม
( ซูดาน )ราเอนโดไฟต์ที่แยกได้จากส่วนต่างๆของพืชสมุนไพรที่รวบรวมหลังจากการฆ่าเชื้อพื้นผิวตามที่อธิบายไว้โดย Zhang et al . [ 4 ] โดยชิ้นปลูกบนอาหาร potato dextrose agar medium ที่แก้ไขเพิ่มเติมกับ chloramphenicol ( 500 มก. / ล. ) ยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรีย ประสิทธิภาพการฆ่าเชื้อของพื้นผิวขั้นตอนที่ได้รับการยืนยันโดยการชุบน้ำล้างสุดท้ายนอกจากนี้ ราเอนโดไฟท์ที่แยกเป็น subcultured เพื่อให้ได้เชื้อบริสุทธิ์ หมายเลขไว้ที่ 4 องศา และการจำแนกสายพันธุ์ของเชื้อราขึ้นอยู่กับลักษณะของวัฒนธรรมหรือ ) , ลักษณะของสปอร์และโครงสร้างการสืบพันธุ์หากคุณสมบัติถูกมองเห็นได้ [ 5 ] วัฒนธรรมซึ่งล้มเหลวในการ sporulate ถูกจัดกลุ่มเป็นเส้นใย sterilia
[ 6 ]แต่ละปี คือ 20 จานเพาะเลี้ยงบนอาหาร Potato Dextrose Agar และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศา C นาน 7 – 15 วัน เชื้อจุลินทรีย์ชนิดแข็งบดและสกัดด้วยเอทิลอะซิเตท ข้ามคืน กรองระเหยและเก็บรักษาไว้ที่ 4 องศา C .
แห้ง ใบและลำต้นของโวลต์ amygdalina , C . procera , C . roseus E prostrata และเมล็ดของ foenum graecum มาบดเป็นผงละเอียด .แต่ละตัวอย่าง ( 20 กรัม ) ถูกสกัดด้วยเอทิลอะซิเตท ข้ามคืน กรองระเหยและเก็บที่อุณหภูมิ 4 องศา C .
รวมฟีโนลิก เนื้อหาถูกใช้ folin – ciocalteu วิธีตามที่อธิบายไว้โดยวูล์ฟ et al . [ 7 ] นจากผลวัดด้วยเครื่องที่ 760 นาโนเมตรโดยใช้ไมโครเพลท ( HT biotek โลจิเซียล ( อ่าน , gen5 )ศึกษาทั้งสามใบแต่ละแยก ปริมาณตามเส้นโค้งมาตรฐานของฝรั่งเศสกรด ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นเพิ่มขึ้นเทียบเท่า ( เก ) คือ mg / g เพิ่มขึ้น
รวมสารต้านอนุมูลอิสระความจุ ( TAC ) ของสารสกัดที่ใช้ในการประมาณ dpph วิธีตามที่อธิบายไว้โดยยากิ et al . [ 8 ]นวัดนี้ที่ 517 nm ใช้ไมโครเพลท ( HT biotek โลจิเซียล ( อ่าน , gen5 ) วิตามินซีเป็นสารต้านอนุมูลอิสระ ใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงประกอบ แต่ละวิเคราะห์ทั้งสามใบ ค่า ic50 คำนวณได้จากการวิเคราะห์การถดถอยเชิงเส้นของแปลงของความเข้มข้นของตัวอย่างทดสอบเทียบกับค่าเฉลี่ยร้อยละของการต้านอนุมูลอิสระผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SEM และ ic50 ค่าที่ได้จากสมการแปลง ( Sigma plotsr 2001 โปรแกรมวิทยาศาสตร์ ) ได้ค่าสัมประสิทธิ์ของสหสัมพันธ์ ( R2 =
0.998 )
การแปล กรุณารอสักครู่..
