Kaempferol standard (CAS 520-18-3),

Kaempferol standard (CAS 520-18-3), 2,2-di(4-tert-octylphenyl)-1-picryl-hydrazyl free radical (DPPH, CAS 84077-81-6), phosphoric acid (H3PO4) were purchased from Sigma–Aldrich Fine Chemicals, St. Louis, USA. Ethanol and Aluminium chloride anhydrous (CAS 7446-70-0) were obtained from Merck Specialities (pvt.) Ltd., India. Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry ~ 103 ~ Acetonitrile (HPLC grade) was obtained from Qualigen Fine Chemicals, USA. Other reagents like 2 deoxy-D-ribose sugar (CAS 533-67-5), di-sodium salt of ethylene diamine tetra acetic acid (EDTA) disodium salt, thiobarbituric acid (TBAR), trichloroacetic acid (TCA), tris buffer, phosphate-buffered saline (PBS) (Ca2+, Mg2+ free), RPMI-1640 media, Histopaque, quercetin were purchased from Hi Media, India. Gallic acid, ascorbic acid, Folin–Ciocalteu reagent were purchased from SRL, India. All other chemicals like di-potassium-hydrogen phosphate (K2HPO4), hydrogen peroxide (H2O2), potassium di-hydrogen phosphate (KH2PO4), Ferric chloride (FeCl3), sodium hydroxide (NaOH), sodium carbonate (Na2CO3) were purchased locally and were of analytical grade. 2.2 Preparation of ZZ Plant material of Z. zerumbet were collected locally, authenticated by plant taxonomist and voucher specimen was submitted to the herbarium of the department of Botany, University of Calcutta, Kolkata. A total of 100 gm of the dried rhizome was soaked in 1L of ethanol at room temperature (35.5 °C) and kept in dark for 7 days. The extract was filtered and evaporated to dryness. Finally 3.45 gm of semi-solid mass of ZZ was recovered and stored at -20 0 C. 2.3 Determination of Total Polyphenol Content (TPC) The total polyphenol content of the extract was determined according to the method of McDonald et al. [20] and Roy et al. [21] with modification. Briefly, 0.5 ml of extract (50 µg/ml) was mixed with Folin–Ciocalteu reagent (5 ml, 1:10 dilution with distilled water) and further neutralized by aqueous Na2CO3 (4 ml, 1 M) solution. The reaction mixture was then allowed to stand for 15 min at room temperature. The absorbance of the reaction mixture was measured at 765 nm using a UV–visible spectrophotometer [Beckman Coulter, USA]. The calibration curve was prepared using solutions of gallic acid (standard) in ethanol with final concentrations in reaction mix ranging from 0–35 µg/ml. The total polyphenol content was expressed in terms of milligram of gallic acid equivalent per gram of extract (mg GAE/g). Three replicates were performed. Results are represented as mean ± standard deviation. 2.4 Determination of Total Flavonoids The method of Ordonez et al. [22] and Taie et al. [23] was followed for the estimation of total flavonoid content with minor modifications. Briefly, 0.5 ml of 2% AlCl3 in ethanol solution was added to 0.5 ml of the extract (50 µg/ml). The reaction mixture was then allowed to stand for 1h at room temperature. The absorbance was measured at 420 nm using a UV–visible spectrophotometer [Beckman Coulter, USA] against the sample blank. Total flavonoid content was calculated as quercetin equivalent (mg/g) obtained from calibration curve (0-33 µg/ml). The total flavonoid content was expressed in terms of milligram of quercetin equivalent per gram of extract (mg QUE/g). Three replicates were performed. Results are represented as mean ± standard deviation. 2.5 HPLC Analysis of Phenolic Compounds HPLC analysis was carried out using a High Performance Liquid Chromatography apparatus equipped with a Agilent DAAD detector (Agilent, USA) and an Agilent Eclipse plus C18 column (100 mm×4.6 mm, 3.5 μm) (Agilent, USA). The mobile phases were (A) 0.1% phosphoric acid and (B) acetonitrile. The gradient was linear from 94 to 92.5% A for 4 min; stand on 92.5% for 3 min, from 92.5 to 10% A for 8 min, from 10 to 6% A for 5 min and 6% A for 5 min followed by washing with B and

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Kaempferol มาตรฐาน (CAS 520-18-3), อนุมูลอิสระ 2.2-di(4-tert-octylphenyl)-1-picryl-hydrazyl (DPPH, CAS 84077-81-6), กรดฟอสฟอริก (H3PO4) ซื้อมาจาก Sigma – Aldrich เคมี St. Louis สหรัฐอเมริกา เอทานอลและอลูมิเนียมคลอไรด์รัส (CAS 7446-70-0) ได้รับมาจากอาหารเมอร์ค (pvt) จำกัด อินเดีย สมุดรายวันของเภสัชเวทพฤกษเคมี ~ 103 ~ Acetonitrile (HPLC เกรด) ได้รับจาก Qualigen เคมี สหรัฐอเมริกา สารอื่น ๆ เช่นน้ำตาล deoxy-D-น้ำตาล (CAS 533-67-5) 2 เกลือโซเดียม di ของเอ diamine เตตร้ากรดอะซิติก (EDTA) หัวเกลือ กรด thiobarbituric (TBAR), trichloroacetic กรด (TCA), ทริกันชน บัฟเฟอร์ฟอสเฟตเกลือ (PBS) (Ca2 + ฟรี Mg2 +) สื่อ RPMI 1640, Histopaque, quercetin ซื้อมาจาก Hi Media อินเดีย กรดแอสคอร์บิค Gallic ของกรด เอเจนต์ท่อง – Ciocalteu ซื้อมาจาก SRL อินเดีย สารเคมีอื่น ๆ เช่น di-โพแทสเซียมไฮโดรเจนฟอสเฟต (K2HPO4), ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (H2O2) โพแทสเซียม di-ไฮโดรเจนฟอสเฟต (KH2PO4), คคลอไรด์ (FeCl3), โซเดียมไฮดรอกไซด์ (NaOH), โซเดียมคาร์บอเนต (เรียก) ซื้อในท้องถิ่น และของเกรดวิเคราะห์ 2.2 เตรียมวัสดุพืช ZZ ของกระทือ Z. ถูกจัดเก็บภายใน ความถูกต้อง โดย taxonomist พืช และตัวอย่างใบสำคัญถูกส่งไปยังหอพรรณไม้ภาควิชาพฤกษศาสตร์ มหาวิทยาลัยของกาลกัตต้า โกลกาตา จำนวน 100 กรัมของเหง้าแห้งแช่ในเอทานอลที่อุณหภูมิห้อง (35.5 ° C) 1L และเก็บไว้ในที่มืด 7 วัน สารสกัดกรอง และระเหยให้แห้ง ในที่สุด การกู้คืน และเก็บที่ 0-20 3.45 กรัมของมวลกึ่งแข็งของ ZZ C. 2.3 กำหนดของรวม Polyphenol เนื้อหา (TPC) กำหนดเนื้อหา polyphenol รวมของสารสกัดตามวิธีการของ McDonald et al. [20] และรอยร้อยเอ็ด [21] พร้อมปรับเปลี่ยน สั้น ๆ 0.5 ml ของสารสกัด (50 µg/ml) ถูกผสมกับรีเอเจนต์ท่อง – Ciocalteu (5 ml, 1:10 ที่เจือจางด้วยน้ำกลั่น) และต่อไป neutralized ได้ โดยละลายเรียก (4 ml, 1 M) แก้ปัญหา ส่วนผสมของปฏิกิริยาได้รับการอนุญาตแล้วให้ 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง มีวัด absorbance ของผสมปฏิกิริยาที่ 765 nm โดยใช้ spectrophotometer UV – เห็น [Beckman Coulter อเมริกา] กราฟเทียบถูกเตรียมการใช้โซลูชั่นกรด gallic (มาตรฐาน) ในเอทานอลที่มีความเข้มข้นสุดท้ายในปฏิกิริยาผสมตั้งแต่ 0 – 35 µg/ml Polyphenol รวมเนื้อหาถูกแสดงในรูปของมิลลิกรัมของกรด gallic เทียบต่อกรัมของสารสกัด (mg GAE/g) ดำเนินการเหมือนกับสาม ผลลัพธ์จะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย±ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน 2.4 กำหนดรวมฟลาวิธีของ Ordonez et al. [22] และ Taie ร้อยเอ็ด [23] ตามมาสำหรับการประเมินของ flavonoid รวมเนื้อหาด้วยการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สั้น ๆ 0.5 ml 2% AlCl3 ในเอทานอลถูกเพิ่มถึง 0.5 ml ของสารสกัด (50 µg/ml) ส่วนผสมของปฏิกิริยาได้รับการอนุญาตแล้วให้ 1 ชม.ที่อุณหภูมิห้อง มีวัด absorbance ที่ที่ 420 nm โดยใช้ spectrophotometer UV – เห็น [Beckman Coulter อเมริกา] กับตัวอย่างที่ว่างเปล่า Flavonoid รวมเนื้อหาถูกคำนวณเป็น quercetin เท่า (mg/g) ได้จากเส้นโค้งการสอบเทียบ (0 33 µg/ml) Flavonoid รวมเนื้อหาถูกแสดงในรูปของมิลลิกรัมของ quercetin เทียบต่อกรัมของสารสกัด (มิลลิกรัม QUE/g) ดำเนินการเหมือนกับสาม ผลลัพธ์จะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย±ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน 2.5 วิเคราะห์ HPLC วิเคราะห์ของฟีนอสาร HPLC ดำเนินการโดยใช้เครื่อง Chromatography ของเหลวประสิทธิภาพสูงที่มีเครื่องตรวจจับ Agilent คาด (Agilent สหรัฐอเมริกา) และคอลัมน์ Agilent คราสและ C18 (100 มม. × 4.6 มม. 3.5 ไมครอน) (Agilent สหรัฐอเมริกา) เฟสเคลื่อน (A) 0.1% กรดฟอสฟอริกและ (ข) acetonitrile ไล่ระดับสีเป็นเส้นตรงจาก 94 92.5% A 4 นาที ยืนบน 92.5% 3 นาที จาก 92.5% 10 A สำหรับ 8 นาที จาก 10% 6 A สำหรับ 5 นาทีและ 6% A 5 นาทีตาม ด้วยการล้างกับ B และ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

kaempferol มาตรฐาน (CAS 520-18-3), 2,2-di (4-tert-octylphenyl) -1-picryl-hydrazyl อนุมูลอิสระ (DPPH, CAS 84077-81-6), กรดฟอสฟอรัส (H3PO4) ที่ซื้อมาจาก Sigma-Aldrich Fine Chemicals, St. Louis, สหรัฐอเมริกา เอทานอลและอลูมิเนียมคลอไรด์ปราศจาก (CAS 7446-70-0) ที่ได้รับจากเมอร์ค Specialities (Pvt.) Ltd. อินเดีย วารสารเภสัชเวทและพฤกษเคมี ~ 103 ~ Acetonitrile (HPLC เกรด) ที่ได้รับจาก Qualigen Fine Chemicals, สหรัฐอเมริกา น้ำยาอื่น ๆ เช่น 2 Deoxy-D-น้ำตาลน้ำตาล (CAS 533-67-5) di-เกลือโซเดียมเอทิลีน diamine Tetra กรดอะซิติก (EDTA) เกลือโซเดียมกรด thiobarbituric (TBAR) กรดไตรคลอโร (TCA) บัฟเฟอร์ทริส, ฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ (PBS) (Ca2 +, Mg2 + ฟรี), RPMI-1640 สื่อ Histopaque, quercetin ที่ซื้อมาจาก Hi สื่ออินเดีย กรดฝรั่งเศส, วิตามินซี, Folin-Ciocalteu น้ำยาที่ซื้อมาจาก SRL อินเดีย ทั้งหมดเคมีภัณฑ์อื่น ๆ เช่น di-โพแทสเซียมไฮโดรเจนฟอสเฟต (K2HPO4) ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (H2O2) โพแทสเซียม di-ไฮโดรเจนฟอสเฟต (KH2PO4), เฟอร์ริกคลอไรด์ (FeCl3) โซเดียมไฮดรอกไซ (NaOH), โซเดียมคาร์บอเนต (Na2CO3) กำลังซื้อในประเทศและ เป็นของเกรดวิเคราะห์ 2.2 การเตรียมความพร้อมของวัสดุ ZZ โรงงานของซี zerumbet ถูกเก็บไว้ในเครื่องรับรองความถูกต้องโดยโรงงาน taxonomist และบัตรกำนัลชิ้นถูกส่งไปยังหอพรรณไม้ของภาควิชาพฤกษศาสตร์มหาวิทยาลัยกัลกัตโกลกาตาที่ รวม 100 กรัมเหง้าแห้งแช่ใน 1L เอทานอลที่อุณหภูมิห้อง (35.5 ° C) และเก็บไว้ในที่มืดเป็นเวลา 7 วัน สารสกัดถูกกรองและระเหยความแห้งกร้าน สุดท้าย 3.45 กรัมของมวลกึ่งของแข็งของ ZZ หายและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส 0 2.3 การกำหนดรวม Polyphenol เนื้อหา (TPC) เนื้อหาโพลีฟีนทั้งหมดของสารสกัดถูกกำหนดตามวิธีการของแมคโดนั et al, [20] และรอย et al, [21] มีการดัดแปลง สั้น ๆ , 0.5 มล. ของสารสกัด (50 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) ผสมกับ Folin-Ciocalteu น้ำยา (5 มล., 01:10 เจือจางด้วยน้ำกลั่น) และต่อไปเป็นกลางโดยน้ำ Na2CO3 (4 มล. 1 M) วิธีการแก้ปัญหา ผสมปฏิกิริยาได้รับอนุญาตแล้วจะยืนเป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ค่าการดูดกลืนของผสมปฏิกิริยาวัดที่ 765 นาโนเมตรโดยใช้ spectrophotometer UV-มองเห็น [Beckman Coulter, สหรัฐอเมริกา] เส้นโค้งการสอบเทียบถูกจัดทำขึ้นโดยใช้โซลูชั่นของกรดแกลลิ (มาตรฐาน) ในเอทานอลที่มีความเข้มข้นสุดท้ายในการผสมปฏิกิริยาตั้งแต่ 0-35 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร เนื้อหาโพลีฟีนทั้งหมดถูกแสดงออกในแง่ของมิลลิกรัมเทียบเท่ากรดแกลลิกรัมต่อของสารสกัด (MG GAE / g) สามซ้ำได้ดำเนินการ ผลการค้นหาจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย±ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน 2.4 การกำหนด Flavonoids รวมวิธีการ Ordonez et al, [22] และ Taie et al, [23] ตามการประมาณการของเนื้อหา flavonoid รวมมีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สั้น ๆ , 0.5 มล. 2% AlCl3 ในการแก้ปัญหาเอทานอลถูกเพิ่มเข้ามา 0.5 มล. ของสารสกัด (50 ไมโครกรัม / มล.) ผสมปฏิกิริยาได้รับอนุญาตแล้วจะยืน 1H ที่อุณหภูมิห้อง ค่าการดูดกลืนวัดที่ 420 นาโนเมตรโดยใช้ spectrophotometer UV-มองเห็น [Beckman Coulter, สหรัฐอเมริกา] กับกลุ่มตัวอย่างที่ว่างเปล่า เนื้อหา flavonoid รวมที่คำนวณได้เท่ากับ quercetin (mg / g) ที่ได้รับจากกราฟมาตรฐาน (0-33 ไมโครกรัม / มล.) เนื้อหา flavonoid ทั้งหมดถูกแสดงออกในแง่ของมิลลิกรัมเทียบเท่า quercetin ต่อกรัมของสารสกัด (MG QUE / ​​g) สามซ้ำได้ดำเนินการ ผลการค้นหาจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย±ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน 2.5 HPLC วิเคราะห์ของการวิเคราะห์สารประกอบฟีนอ HPLC ได้ดำเนินการโดยใช้เครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสูง Liquid Chromatography พร้อมกับเครื่องตรวจจับ Agilent DAAD (Agilent, USA) และ Agilent คราสบวก C18 คอลัมน์ (100 มิลลิเมตร× 4.6 มิลลิเมตร 3.5 ไมครอน) (Agilent, สหรัฐอเมริกา ) ขั้นตอนที่ถืออยู่ (A) กรดฟอสฟอรัส 0.1% และ (ข) acetonitrile ลาดเชิงเส้นเป็น 94-92.5% เป็นเวลา 4 นาที; ยืนอยู่บน 92.5% เป็นเวลา 3 นาทีจาก 92.5 ถึง 10% เป็นเวลา 8 นาที, 10-6% ในเวลา 5 นาทีและ 6% ในเวลา 5 นาทีตามด้วยการล้างด้วย B และ