The transfer of transgenic DNA, fro

The transfer of transgenic DNA, from tested GM feed materials to sows’ organism, was also estimated. DNA was extracted from heparinised blood with commercial extraction kit (Blood Genomic AX Kit by DNA, Poland), according to the manufacturer’s instruction. PCR was performed in 20 μL mixtures (Applied Biosystem, Inc., USA) containing: 1 x buffer for PCR; 0.2 mM dNTP; 2.5 mM MgCl2; 0.5 μM forward and reverse primers; 0.025 U/μL of Amplitaq Gold polymerase, and genomic DNA templates. For detection of corn gene sequences, DNA was incubated in thermocycler under the following programme: 12 min denaturation at 95ºC, and 40 cycles: 30 s at 95ºC, 30 s at 64ºC, and 30 s at 72ºC, with final extention step of 3 min at 72ºC. For detection of soybean gene sequences, DNA was incubated in thermocycler under the following programme: 10 min denaturation at 95ºC, and 40 cycles: 30 s at 95ºC, 30 s at 60ºC, and 25 s at 72ºC, with final extention step of 3 min at 72ºC. In case of MON810 maize, the fragment of 170 bp, and for RR soybean, the fragment of 172 bp were amplified. The PCR products were analysed by electrophoresis in 2.0% agarose gels containing SYBRGOLD dye.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การโอนย้ายของ DNA ถั่วเหลือง จากจีเอ็มผ่านการทดสอบอาหารวัสดุ sows ของสิ่งมีชีวิต นอกจากนี้ยังมีประเมิน ดีเอ็นเอที่สกัดจากเลือด heparinised กับชุดแยกพาณิชย์ (AX Genomic เลือดชุด โดยดีเอ็นเอ โปแลนด์), ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ทำ PCR ใน 20 μL น้ำยาผสม (ประยุกต์ Biosystem, Inc., USA) ประกอบด้วย: 1 x บัฟเฟอร์สำหรับ PCR 0.2 mM dNTP 2.5 mM MgCl2 0.5 μM ไปข้างหน้า และย้อนกลับไพรเมอร์ 0.025 U/μL ของพอลิเมอเรสทอง Amplitaq, genomic DNA แม่แบบ สำหรับการตรวจหาลำดับยีนข้าวโพด ดีเอ็นเอถูก incubated ใน thermocycler ภายใต้โครงการดังต่อไปนี้: 12 นาที denaturation 95ºC และ 40 รอบ: 30 s ที่ 95ºC, 30 s ที่ 64ºC และ 30 s ที่ 72ºC ขั้นตอนสุดท้ายสำหรับ 3 นาทีที่ 72ºC สำหรับการตรวจหาลำดับยีนของถั่วเหลือง ดีเอ็นเอถูก incubated ใน thermocycler ภายใต้โครงการดังต่อไปนี้: denaturation 10 นาทีที่ 95ºC และ 40 รอบ: 30 s ที่ 95ºC, 30 s ที่ 60ºC และ 25 s ที่ 72ºC ขั้นตอนสุดท้ายสำหรับ 3 นาทีที่ 72ºC ในกรณีของข้าวโพด MON810 ส่วนของ 170 bp และถั่ว เหลือง RR ส่วนของ 172 bp ได้ขยาย ผลิตภัณฑ์ PCR ถูก analysed โดย electrophoresis ใน 2.0% agarose เจประกอบด้วยย้อม SYBRGOLD

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การโอนยีนดีเอ็นเอจากวัสดุที่ผ่านการทดสอบอาหารจีเอ็มที่จะมีชีวิตสุกร 'ยังเป็นที่คาดกัน ถูกสกัดดีเอ็นเอจากเลือดสาร heparinised กับชุดสกัดในเชิงพาณิชย์ (เลือดจีโนมขวานชุดโดยดีเอ็นเอโปแลนด์) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต PCR ได้ดำเนินการใน 20 ไมโครลิตรผสม (ประยุกต์ Biosystem, Inc, USA) ที่มี: 1 x บัฟเฟอร์สำหรับ PCR; 0.2 มิลลิ dNTP; 2.5 มิลลิ MgCl2; 0.5 ไมครอนไปข้างหน้าและย้อนกลับไพรเมอร์; 0.025 U / ไมโครลิตรของ Amplitaq โพลิเมอร์ทองและแม่แบบดีเอ็นเอ ในการตรวจหาลำดับยีนข้าวโพดดีเอ็นเอถูกบ่มใน thermocycler ภายใต้โครงการดังต่อไปนี้: 12 นาที denaturation ที่95ºCและ 40 รอบ: 30 วินาทีที่95ºC, 30 วินาทีที่64ºCและ 30 วินาทีที่72ºCกับขั้นตอนการขยายสุดท้ายของ 3 นาที ที่72ºC ในการตรวจหาลำดับยีนถั่วเหลืองดีเอ็นเอถูกบ่มใน thermocycler ภายใต้โครงการดังต่อไปนี้: 10 นาที denaturation ที่95ºCและ 40 รอบ: 30 วินาทีที่95ºC, 30 วินาทีที่ 60 ° C และ 25 s ที่72ºCกับขั้นตอนการขยายสุดท้ายของ 3 นาที ที่72ºC ในกรณีของข้าวโพด MON810 ชิ้น 170 bp และถั่วเหลือง RR, ชิ้นส่วนของ 172 bp ที่ถูกขยาย ผลิตภัณฑ์ PCR วิเคราะห์อิเล็ก 2.0% agarose เจลที่มีส่วนผสมของสีย้อม SYBRGOLD

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การถ่ายโอนยีน ดีเอ็นเอ จากการทดสอบวัสดุจีเอ็มอาหารแม่สุกร ' สิ่งมีชีวิต พบว่า ดีเอ็นเอจากเลือด heparinised การสกัดชุดพาณิชย์ ( เลือดขวานชุดโดยจีโนมดีเอ็นเอ , โปแลนด์ ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต เทคนิคในการปฏิบัติ 20 μผมผสม ( ใช้ biosystem , Inc . , USA ) ประกอบด้วย : 1 x บัฟเฟอร์สำหรับ PCR ; dntp 0.2 มม. ; 2.5 มม. ชุด ; 05 μ M ไปข้างหน้าและย้อนกลับไพรเมอร์ ; 0.025 U / L โดยμ amplitaq ทองและสร้างแม่แบบดีเอ็นเอ การตรวจหายีนข้าวโพด ลำดับ DNA ถูกบ่มในเทอร์มอไซเคล ์ภายใต้โครงการต่อไปนี้ : 12 นาที ( 95 º C และ 40 รอบ 30 s 95 º C 30 S ที่ 64 º C และ 30 s 72 º C กับขั้นตอนการสุดท้ายของ 3 นาทีที่ 72 º C สำหรับการตรวจสอบของยีนและลำดับดีเอ็นเอ ) เทอร์มอไซเคล ์ภายใต้โครงการต่อไปนี้ : 10 นาที ( 95 º C และ 40 รอบ 30 s 95 º C 30 เป็น 60 º C , และ 25 s 72 º C กับขั้นตอนการสุดท้ายของ 3 นาทีที่ 72 º C ในกรณีของ mon810 ข้าวโพด เศษเสี้ยวของ 170 BP และ RR ถั่วเหลือง ส่วนของ 172 BP ถูกขยาย . ผลิตภัณฑ์วิเคราะห์โดยวิธี PCR ใน 20 % หรือเจลที่มี sybrgold ย้อม