Ten grams of fresh tissue per sample were homogenized with 70 % methanol and stirred overnight at 4
C. The extract was filtered and evaporated under vacuum to give an aqueous residue. The aqueous phase was
adjusted to pH 8.5 with a 0.1 M phosphate buffer and partitioned three times with ethyl acetate (basic
fraction). The aqueous phase was adjusted to pH 2.5 with 1N HC1 and partitioned three times with ethyl
acetate. The basic and acidic ethyl acetate fractions were passed through anhydrous sodium sulphate and
evaporated under vacuum. The dried residues containing hormones were dissolved in methanol and stored in
vials at 4°C. The acidic ethyl acetate-soluble fraction was used for determination of acidic hormones such as
3 indole acetic acid (IAA), abscisic acid (ABA), gibrellin (GA ) and jasmonic acid (JA), whereas the basic
fraction was used for determination of cytokinin (e.g. benzyl adenine BA) and methyl jasmonate (MeJA)
(Shindy and Smith, 1975; Chen, 1990). HPLC analysis was carried out according to Guinn and Brummett,
(1990); Baydar and Ulger, (1998) and Wasternack and Parthier, (1997).
สิบกรัมของเนื้อเยื่อสดต่ออย่าง homogenized เป็นกลุ่มกับเมทานอล 70% และกวนข้ามคืนที่ 4C. การดึงข้อมูลที่ถูกกรอง และหายไปภายใต้สุญญากาศให้มีสารตกค้างอควี ระยะอควีถูกปรับ pH 8.5 ด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 0.1 M และกั้นสามครั้งกับเอทิล acetate (basicเศษส่วน) ระยะอควีปรับ pH 2.5 กับ 1N HC1 และกั้นสามครั้งกับเอทิลacetate ส่วน acetate เอทิลพื้นฐาน และเปรี้ยวได้ผ่านไดโซเดียมซัลเฟต และหายไปภายใต้สุญญากาศ ตกค้างแห้งที่ประกอบด้วยฮอร์โมนละลายในเมทานอล และเก็บไว้ในvials ที่ 4 องศาเซลเซียส เศษส่วน acetate เอทิลละลายกรดใช้สำหรับความมุ่งมั่นของฮอร์โมนกรดเช่น3 กรดอินโดลอะซิติก (IAA), กรดแอบไซซิก (ABA), gibrellin (GA) และกรดจัสโมนิก (JA), ในขณะที่พื้นฐานใช้เศษ cytokinin (เช่น benzyl adenine BA) และ methyl jasmonate (MeJA)(Shindy และ Smith, 1975 เฉิน 1990) วิเคราะห์ HPLC ได้ดำเนินการตาม Guinn และ Brummett(1990); Baydar และ Ulger, (1998) และ Wasternack และ Parthier, (1997)
การแปล กรุณารอสักครู่..
