Figure .5. Flow microfluorometry of histone gene deletion strains.
The fluorescence histograms for diploid strains from early logarithmic
growth cultures were determined as described in Materials and
Methods. The experimental fluorescence data are plotted in the
open circles. The results of the model fitting calculations are shown
as the solid lines through the experimental data. The results for the
individual cell cycle periods are drawn at one-half scale under each
curve. These represent the 131, S, and 132 period distributions, left
to right, respectively. (a) MSY167 wild type. (b) MSYI64 copy-I
deletion. (c) MSY165 copy-II deletion.
and stained with mithramycin, a fluorescent DNA-binding
dye (17, 43). The stained cells were analyzed for DNA content
on an EPICS flow cytometer (Coulter Electronics, Inc.,
Hialeah, FL). Histograms of DNA content for the diploid
strains are presented in Fig. 5. These histograms were decomposed
into G1, S, and G2 populations as described in
Materials and Methods and the results of these calculations
are listed in Table IV.
To a first approximation all three strains have similar cell
cycle distributions. From this analysis we conclude that the
H3-H4 gene deletion strains do not have a severe defect in
a specific period of the division cycle. In particular, there was
not a large increase in the proportion of cells in S-phase in
the deletion strains. The major difference between the strains
was an increase in the proportion of cells in the early periods
of the division cycle in the deletion strains. From the measured
generation times and the fraction of cells in each cell
division cycle phase, the lengths of the periods can be estimated
(44). The cell cycle analysis ofS. cerevisiaeis complicated
by the fact that the two cells at cell separation are not
equivalent; the larger "mother" may have a shorter G1 period
than the smaller "daughter" cell (38). For this analysis we
have adopted two limiting assumptions as proposed by Slater
et al. (44). In the first model, the "homogeneous daughter
model; it is assumed that all cells, both mother and daughter,
have identical G1 periods. In the second model, the
"mixed mother-daughter cell model," it is assumed that the
mother cells do not have a G1 period at all but progress
directly from cell separation into a new S period. The calculations
for these two limiting assumptions are presented in
Table IV. The length of the G2 period was similar for all three
strains, '~57 min. Both deletion strains, however, had longer
G1 periods, particularly for daughter cells in the mixed cell
model calculations. Therefore, we conclude that the longer
division times for the deletion strains are the result of an increase
in the lengths of the early cell cycle periods, especially
G1.
0.5 รูป ไหล microfluorometry ของสโตนยีนสายพันธุ์ลบ.
histograms เรืองแสงสำหรับสายพันธุ์จากต้นซ้ำลอการิทึม
วัฒนธรรมการเจริญเติบโตได้รับการพิจารณาตามที่อธิบายไว้ในด้านวัสดุและ
วิธีการ ข้อมูลเรืองแสงทดลองพล็อตใน
วงการเปิด ผลของรูปแบบการคำนวณที่เหมาะสมจะปรากฏ
เป็นเส้นทึบผ่านข้อมูลการทดลอง ผลการสำหรับ
งวดวงจรมือถือแต่ละรายจะมีการวาดที่ครึ่งหนึ่งของขนาดในแต่ละ
โค้ง เหล่านี้เป็นตัวแทนของ 131, S 132 และการกระจายระยะเวลาซ้าย
ไปขวาตามลำดับ (ก) MSY167 ป่าประเภท (ข) การคัดลอกฉัน MSYI64
ลบ (ค) สำเนา MSY165-II ลบ. และย้อมด้วยสี mithramycin เป็นเรืองแสงดีเอ็นเอผูกพันย้อม (17, 43) เซลล์ย้อมสีได้วิเคราะห์หาปริมาณดีเอ็นเอในการไหลของมหากาพย์ cytometer (โคลเตอร์ Electronics, Inc. ไฮอาลีอาห์, FL) Histograms เนื้อหาดีเอ็นเอซ้ำสำหรับสายพันธุ์ที่ถูกนำเสนอในรูป 5. histograms เหล่านี้ถูกย่อยสลายลงใน G1, S, และประชากร G2 ที่อธิบายไว้ในวัสดุและวิธีการและผลของการคำนวณเหล่านี้มีการระบุไว้ในตารางที่ IV. ครั้งแรกประมาณทั้งสามสายพันธุ์ที่มีมือถือที่คล้ายกันกระจายรอบ จากการวิเคราะห์นี้เราสรุปได้ว่าH3-H4 สายพันธุ์ของยีนลบไม่ได้มีข้อบกพร่องอย่างรุนแรงในระยะเวลาที่กำหนดของวงจรการแบ่ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งมีไม่ได้เพิ่มขึ้นมากในสัดส่วนของเซลล์ใน S-เฟสในสายพันธุ์ลบ ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างสายพันธุ์คือการเพิ่มขึ้นในสัดส่วนของเซลล์ในงวดต้นของวงจรการแบ่งสายพันธุ์ในการลบ จากการวัดครั้งรุ่นและส่วนของเซลล์ในแต่ละเซลล์เฟสวงจรส่วนความยาวของระยะเวลาที่สามารถประมาณได้(44) OFS วิเคราะห์วงจรมือถือ cerevisiaeis ซับซ้อนด้วยความจริงที่ว่าทั้งสองเซลล์ที่แยกมือถือไม่เทียบเท่า ว่า "แม่" ที่มีขนาดใหญ่อาจมีระยะเวลา G1 สั้นกว่าขนาดเล็ก "ลูกสาว" มือถือ (38) สำหรับการวิเคราะห์ครั้งนี้เราได้นำสองสมมติฐาน จำกัด ตามที่เสนอโดยตำหนิet al, (44) ในรูปแบบแรก "ลูกสาวที่เป็นเนื้อเดียวกันรูปแบบมันจะสันนิษฐานว่าทุกเซลล์ทั้งแม่และลูกสาวมีช่วงเวลา G1 เหมือนกันในรูปแบบที่สอง. " มือถือรุ่นที่แม่ของลูกสาวผสม "มันจะสันนิษฐานว่าเซลล์แม่ ไม่ได้มีระยะเวลา G1 ที่ทุกคน แต่ความคืบหน้าโดยตรงจากการแยกเซลล์ในช่วงใหม่ S. การคำนวณสำหรับทั้งสองสมมติฐาน จำกัด ถูกแสดงไว้ในตารางที่ IV. ความยาวของระยะเวลา G2 เป็นที่คล้ายกันสำหรับทั้งสามสายพันธุ์ '~ 57 นาที . สายพันธุ์ทั้งสองลบ แต่มีอีกต่อไประยะเวลา G1 โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับเซลล์ลูกสาวในเซลล์ผสมการคำนวณรูปแบบ. ดังนั้นเราจึงสรุปได้ว่าอีกครั้งส่วนสำหรับสายพันธุ์ที่ลบที่มีผลมาจากการเพิ่มขึ้นในความยาวของวัฏจักรของเซลล์ต้น ระยะเวลาโดยเฉพาะอย่างยิ่งG1
การแปล กรุณารอสักครู่..

รูปที่ 5 การไหลของยีน microfluorometry ช่วยลบสายพันธุ์เรืองแสงด้วยฮิสโตแกรมซ้ำสายพันธุ์จากต้นลอการิทึมวัฒนธรรมการเติบโตเป็นตามที่อธิบายไว้ในวัสดุ และวิธีการ ข้อมูลการทำการวางแผนในเปิดวงการ ผลของรูปแบบการคำนวณที่เหมาะสมจะแสดงเป็นเส้นทึบ ผ่านการทดลอง ผลลัพธ์สำหรับแต่ละวัฏจักรเซลล์ช่วงวาดที่ครึ่งหนึ่งในแต่ละขนาดโค้ง เหล่านี้แสดงถึง 131 , 132 , ระยะเวลาและการกระจาย , ซ้ายไปขวา ตามลำดับ ( ) msy167 ป่าประเภท ( ข ) msyi64 copy-iการลบ ( C ) msy165 คัดลอก 2 ลบ .และย้อมสีด้วย mithramycin , เรืองแสงดีเอ็นเอมัดสี ( 17 , 43 ) การย้อมเซลล์มาวิเคราะห์หาปริมาณดีเอ็นเอในมหากาพย์การใช้โมโนโคลเตอร์ ( อิเล็กทรอนิกส์ )ฝรั่งเศส , FL ) ฮิสโตแกรมของดีเอ็นเอซ้ำเนื้อหาสำหรับสายพันธุ์ที่แสดงในรูปที่ 5 ฮิสโตแกรมเหล่านี้ถูกย่อยสลายเป็น G1 , S และ G2 ประชากรตามที่อธิบายไว้ในวัสดุและวิธีการ และผลลัพธ์ของการคำนวณเหล่านี้อยู่ในโต๊ะ IVการประมาณทั้ง 3 สายพันธุ์มีเซลล์ใกล้เคียงก่อนการกระจายรอบ จากการวิเคราะห์สรุปได้ว่าh3-h4 ยีนลบสายพันธุ์ที่ไม่มีข้อบกพร่องร้ายแรงในระยะเวลาที่เฉพาะเจาะจงของรอบดิวิชั่น โดยเฉพาะมีไม่เพิ่มขึ้นมากในสัดส่วนของเซลล์ใน s-phase ในการลบสายพันธุ์ ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างสายพันธุ์การเพิ่มสัดส่วนของเซลล์ในช่วงก่อนส่วนรอบในการลบสายพันธุ์ จากวัดครั้งรุ่นและเศษเซลล์แต่ละเซลล์ส่วนระยะรอบ ความยาวของระยะเวลาที่สามารถประมาณ( 44 ) วัฏจักรของเซลล์การวิเคราะห์ ofs . cerevisiaeis ซับซ้อนโดยความจริงที่ว่าสองเซลล์ที่แยกเซลล์ไม่ได้เทียบเท่า ; ใหญ่ " แม่ " อาจมีระยะ G1 สั้นขนาดเล็กกว่า " ลูกสาว " เซลล์ ( 38 ) สำหรับการวิเคราะห์นี้เรายังเป็นสมมติฐานที่เสนอโดยสเลเตอร์ 2 จำกัดet al . ( 44 ) ในรุ่นแรก " เนื้อเดียวกันลูกสาวรูปแบบ ; มันเป็นสันนิษฐานว่าเซลล์ทั้งแม่และลูกสาวมีระยะเวลา G1 เหมือนกัน ในรุ่นที่สอง" ลูกสาวแม่ผสมแบบเซลล์ " จะสันนิษฐานว่าแม่เซลล์ไม่มีระยะ G1 เลย แต่ความก้าวหน้าโดยตรงจากการแยกเซลล์ในใหม่ระยะเวลา การคํานวณเหล่านี้จะถูกนำเสนอในสมมติฐานสองจำกัดตารางที่ 4 . ความยาวของระยะ G2 เหมือนกันทั้งสามสายพันธุ์ , ~ 57 นาทีทั้งการลบสายพันธุ์ อย่างไรก็ตาม ได้อีกต่อไปG1 ระยะเวลา โดยเฉพาะลูกสาวเซลล์ในเซลล์ผสมการคำนวณแบบ ดังนั้นเราจึงสรุปได้ว่า ยาวครั้ง ส่วนการลบจำนวนที่มีผลเพิ่มในความยาวของช่วงเซลล์รอบระยะเวลา โดยเฉพาะG1 .
การแปล กรุณารอสักครู่..
