The การประดิษฐ์ also provides antib

The การประดิษฐ์ also provides antibodies ซึ่งประกอบรวมด้วย a ฮิวเมไนซ์ variable
25 region selected from the ฮิวเมไนซ์ variable regions of antibodies 12H3_VL1VH1;
the 12H3_VL1VH2; the 12H3_VL1VH3; the 12H3_VL2VH1; the 12H3_VL2VH2; the 12H3_VL2VH3; the 20E5_VL1VH1; the 20E5 VL1VH2; the 20E5_VL1VH3; the 20E5_VL2VH1; the 20E5_VL2VH2; หรือ the 20E_VL2VH3 (as indicated in the previous paragraph and the examples), หรือ บริเวณ แปรผัน สายหนักs ของ SEQ ID
30 NOs: 101-133 and 146-151.
ในบาง รูปลักษณะ, the ฮิวเมไนซ์ antibody คือ the ฮิวเมไนซ์ 12H3 antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 90 (minus the N-terminal
signal sequence "MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") and the heavy chain ของ SEQ
ID NO: 87 (minus the signal sequence "MELGLSWIFLLAILKGVQC".
ในบาง รูปลักษณะ, the ฮิวเมไนซ์ antibody คือ the ฮิวเมไนซ์ 12H3
antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 90 (minus the N-terminal
5 signal sequence "MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") and the heavy chain of SEQ
ID NO: 88 (minus the signal sequence "MELGLSWIFLLAILKGVQC".
ในบาง รูปลักษณะ, the ฮิวเมไนซ์ antibody คือ the ฮิวเมไนซ์ 12H3
antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 90 (minus the N-terminal
signal sequence "MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") and the heavy chain ของ SEQ 10 ID NO: 89 (minus the signal sequence "MELGLSWIFLLAILKGVQC".
ในบาง รูปลักษณะ, the ฮิวเมไนซ์ antibody คือ the ฮิวเมไนซ์ 12H3
antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 91 (minus the N-terminal
signal sequence "MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") and the heavy chain ของ SEQ ID NO: 87 (minus the signal sequence "MELGLSWIFLLAILKGVQC".
15 ในบาง รูปลักษณะ, the ฮิวเมไนซ์ antibody คือ the ฮิวเมไนซ์ 12H3
antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 91 (minus the N-terminal
signal sequence "MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") and the heavy chain ของ SEQ
ID NO: 88 (minus the signal sequence "MELGLSWIFLLAILKGVQC".
ในบาง รูปลักษณะ, the ฮิวเมไนซ์ antibody คือ the ฮิวเมไนซ์ 12H3
20 antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 91 (minus the N-terminal
signal sequence "MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") and the heavy chain ของ SEQ
ID NO: 89 (minus the signal sequence "MELGLSWIFLLAILKGVQC".
ในบาง รูปลักษณะ, the ฮิวเมไนซ์ antibody คือ the ฮิวเมไนซ์ 20E5
antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 85 (minus the N-terminal 25 signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") and the heavy chain ของ SEQ ID
NO: 82 (minus the signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS".
ในบาง รูปลักษณะ, the ฮิวเมไนซ์ antibody คือ the ฮิวเมไนซ์ 20E5
antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 85 (minus the N-terminal
signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") and the heavy chain ของ SEQ ID 30 NO: 83 (minus the signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS".
ในบาง รูปลักษณะ the ฮิวเมไนซ์ antibody คือ the ฮิวเมไนซ์ 20E5
antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 85 (minus the N-terminal
signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") and the heavy chain ของ SEQ ID
NO: 84 (minus the signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS".
ในบาง รูปลักษณะ, the ฮิวเมไนซ์ antibody คือ the ฮิวเมไนซ์ 20E5
antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 86 (minus the N-terminal 5 signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") and the heavy chain ของ SEQ ID
NO: 82 (minus the signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS".
ในบาง รูปลักษณะ, the ฮิวเมไนซ์ antibody คือ the ฮิวเมไนซ์ 20E5
antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 86 (minus the N-terminal
signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") and the heavy chain ของ SEQ ID 10 NO: 83 (minus the signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS".
ในบาง รูปลักษณะ, the ฮิวเมไนซ์ antibody คือ the ฮิวเมไนซ์ 20E5
antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 86 (minus the N-terminal
signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") and the heavy chain ของ SEQ ID NO: 84 (minus the signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS".
15 The antibodies of the การประดิษฐ์ can ประกอบรวมด้วย one หรือ more of these CDRs, or
one หรือ more of these CDRS with 1, 2 หรือ 3 amino acid substitutions per CDR. The
substitutions may be 'conservative' substitutions. Conservative substitutions
providing functionally similar amino acids are well known in the art, and are
described for example in Table 1 of WO 2010/019702, which คือ incorporated herein 20 by reference. Exemplary conservative substitutions are shown in Table 1. Amino
acids are indicated using the well known three-letter code.


Table 1.


Original amino acid Exemplary conservative substitution
Given that clone 12H3 and clone 20E5 bind to the ฮิวเมน CD134, the VH
and VL sequences of each of them can be "mixed and matched" with other แอนติ-
CD134 antibodies to create additional antibodies. The binding of such "mixed and
matched" antibodies to the ฮิวเมน CD134 can be tested using the binding assays
known in the art, ที่รวมถึง an assay described in the Examples. In one case, when 10 VH and VL regions are mixed and matched, a VH sequence from a particular
VH/VL pairing คือ replaced with a structurally similar VH sequence. Likewise, in







39
another case a VL sequence from a particular VH/VL pairing คือ replaced with a structurally similar VL sequence.
Molecules containing only one หรือ two CDR regions (in some cases, even just
a single CDR หรือ a part ของมัน, especially CDR3) are capable of retaining the
5 antigen-binding activity of the antibody from which the CDR(s) are derived. See,
for example, Laune et al. JBC 1997; 272: 30937-44; Monnet et al. JBC 1999; 274
3789-96; Qiu et al. Nature Biotechnology 2007; 25: 921-9; Ladner et at Nature
Biotechnology 2007; 25: 875-7; Heap et al. J Gen Virol 2005; 86: 1791-1800;
Nicaise et al. Protein Science 2004; 13: 1882-91; Vaughan and Sollazzo
10 Combinatorial Chemistry & High Throughput Screening 2001; 4:417-430; Quiocho
Nature 1993; 362: 293-4; Pessi et al. Nature 1993; 362: 367-9; Bianchi et al. J Mol
Biol 1994; 236: 649-59; และ Gao et al. J Biol Chem 1994; 269: 32389-93.
Accordingly, one embodiment of the การประดิษฐ์นี้ คือ an isolated แอนติ-
ฮิวเมน CD134 antibody that ประกอบรวมด้วย: (a) a บริเวณ แปรผัน สายหนัก
15 ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 12; (b) a light chain variable
region ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 13.
In a further embodiment according to the การประดิษฐ์ คือ provided an isolated
CD134 โมเลกุลยึดเกาะ that ประกอบรวมด้วย: (a) a heavy chain CDR1 ซึ่งประกอบรวมด้วย the
amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 14; และ/or (b) a heavy chain CDR2 ซึ่งประกอบรวมด้วย 20 the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 15; และ/or (c) heavy chain CDR3
ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 16.
In a further embodiment according to the การประดิษฐ์ คือ provided an isolated
CD134 โมเลกุลยึดเกาะ that ประกอบรวมด้วย (a) a light chain CDR1 ซึ่งประกอบรวมด้วย the
amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 17; และ/or (b) a light chain CDR2 ซึ่งประกอบรวมด้วย 25 the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 18; และ/or (c) a light chain CDR3
ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 19.
Accordingly, one embodiment of the การประดิษฐ์นี้ คือ an isolated แอนติ-
ฮิวเมน CD134 antibody that ประกอบรวมด้วย: (a) a บริเวณ แปรผัน สายหนัก
ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 4; (b) a light chain variable 30 region ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 5.
In a further embodiment according to the การประดิษฐ์ คือ provided an isolated
CD134 โมเลกุลยึดเกาะ that ประกอบรวมด้วย: (a) a heavy chain CDR1 ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 6; และ/or (b) a heavy chain CDR2 ซึ่งประกอบรวมด้วย







40
the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 7; และ/or (c) heavy chain CDR3 ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 8.
In a further embodiment according to the การประดิษฐ์ คือ provided an isolated
CD134 โมเลกุลยึดเกาะ that ประกอบรวมด้วย (a) a light chain CDR1 ซึ่งประกอบรวมด้วย the 5 amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 9; และ/or (b) a light chain CDR2 ซึ่งประกอบรวมด้วย
the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 10; และ/or (c) a light chain CDR3
ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 11.
Given that clone 12H3 and clone 20E5 bind to the ฮิวเมน CD134 and that
antigen-binding specificity คือ provided primarily by the CDR1, CDR2, and CDR3 10 regions, the VH CDR1, CDR2, and CDR3 sequences and VL CDR1, CDR2, and
CDR3 sequences can be "mixed and matched" to create additional แอนติ-CD134
antibodies.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การประดิษฐ์มีแอนตี้ซึ่งประกอบรวมด้วยตัวแปรฮิวเมไนซ์เลือกจากภูมิภาคแปรฮิวเมไนซ์ของแอนตี้ 12H3_VL1VH1 ภูมิภาค 2512H3_VL1VH2 12H3_VL1VH3 12H3_VL2VH1 12H3_VL2VH2 12H3_VL2VH3 20E5_VL1VH1 20E5 VL1VH2 20E5_VL1VH3 20E5_VL2VH1 20E5_VL2VH2 หรือ 20E_VL2VH3 (ตามที่ระบุในย่อหน้าก่อนหน้านี้และตัวอย่าง), หรือบริเวณแปรผัน สายหนักs นั้น ๆ รหัสลำดับหมายเลข 30:101-133 และ 146-151ในบางรูปลักษณะ คือแอนติบอดีของฮิวเมไนซ์ฮิวเมไนซ์ 12H 3 แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยไฟโซ่นั้น ๆ ลำดับ ID ไม่: 90 (ลบ N-เทอร์มินัลสัญญาณเตือนลำดับ "MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") และนั้น ๆ โซ่หนักลำดับ รหัส NO: 87 (ลบลำดับสัญญาณ "MELGLSWIFLLAILKGVQC" ในบางรูปลักษณะ คือแอนติบอดีของฮิวเมไนซ์ฮิวเมไนซ์ 12H 3 แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยไฟโซ่นั้น ๆ ลำดับ ID ไม่: 90 (ลบ N-เทอร์มินัล 5 สัญญาณลำดับ "MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") และโซ่หนักของลำดับรหัสไม่มี: 88 (ลบลำดับสัญญาณ "MELGLSWIFLLAILKGVQC"ในบางรูปลักษณะ คือแอนติบอดีของฮิวเมไนซ์ฮิวเมไนซ์ 12H 3แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยไฟโซ่นั้น ๆ ลำดับ ID ไม่: 90 (ลบ N-เทอร์มินัลสัญญาณเตือนลำดับ "MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") และหนักโซ่นั้น ๆ ลำดับ 10 ID ไม่: 89 (ลบลำดับสัญญาณ "MELGLSWIFLLAILKGVQC" ในบางรูปลักษณะ คือแอนติบอดีของฮิวเมไนซ์ฮิวเมไนซ์ 12H 3แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยไฟโซ่นั้น ๆ ลำดับ ID ไม่: 91 (ลบ N-เทอร์มินัลสัญญาณเตือนลำดับ "MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") และหนักโซ่นั้น ๆ ลำดับ ID ไม่: 87 (ลบลำดับสัญญาณ "MELGLSWIFLLAILKGVQC"15 ในบางรูปลักษณะ คือแอนติบอดีของฮิวเมไนซ์ฮิวเมไนซ์ 12H 3แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยไฟโซ่นั้น ๆ ลำดับ ID ไม่: 91 (ลบ N-เทอร์มินัลสัญญาณเตือนลำดับ "MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") และนั้น ๆ โซ่หนักลำดับ รหัสไม่มี: 88 (ลบลำดับสัญญาณ "MELGLSWIFLLAILKGVQC" ในบางรูปลักษณะ คือแอนติบอดีของฮิวเมไนซ์ฮิวเมไนซ์ 12H 3 20 ซึ่งประกอบรวมด้วยแอนติบอดีนั้น ๆ โซ่ไฟลำดับรหัส NO: 91 (ลบ N-เทอร์มินัล สัญญาณเตือนลำดับ "MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") และนั้น ๆ โซ่หนักลำดับ รหัส NO: 89 (ลบลำดับสัญญาณ "MELGLSWIFLLAILKGVQC"ในบางรูปลักษณะ คือแอนติบอดีฮิวเมไนซ์ฮิวเมไนซ์ 20E5 แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยไฟโซ่นั้น ๆ ลำดับ ID ไม่: 85 (ลบสถานี N 25 สัญญาณลำดับที่ "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") และหนักโซ่ลำดับ ID นั้น ๆ NO: 82 (ลบลำดับสัญญาณ "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS"ในบางรูปลักษณะ คือแอนติบอดีฮิวเมไนซ์ฮิวเมไนซ์ 20E5แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยไฟโซ่นั้น ๆ ลำดับ ID ไม่: 85 (ลบ N-เทอร์มินัลสัญญาณเตือนลำดับ "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") และหนักโซ่นั้น ๆ ลำดับรหัส 30 ไม่: 83 (ลบลำดับสัญญาณ "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS" ในบางรูปลักษณะคือแอนติบอดีฮิวเมไนซ์ฮิวเมไนซ์ 20E5แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยไฟโซ่นั้น ๆ ลำดับ ID ไม่: 85 (ลบ N-เทอร์มินัลสัญญาณเตือนลำดับ "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") และนั้น ๆ หนักโซ่รหัสลำดับ NO: 84 (ลบลำดับสัญญาณ "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS" ในบางรูปลักษณะ คือแอนติบอดีฮิวเมไนซ์ฮิวเมไนซ์ 20E5 antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 86 (minus the N-terminal 5 signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") and the heavy chain ของ SEQ IDNO: 82 (minus the signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS".ในบาง รูปลักษณะ, the ฮิวเมไนซ์ antibody คือ the ฮิวเมไนซ์ 20E5antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 86 (minus the N-terminalsignal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") and the heavy chain ของ SEQ ID 10 NO: 83 (minus the signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS". ในบาง รูปลักษณะ, the ฮิวเมไนซ์ antibody คือ the ฮิวเมไนซ์ 20E5antibody ซึ่งประกอบรวมด้วย the light chain ของ SEQ ID NO: 86 (minus the N-terminalsignal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") and the heavy chain ของ SEQ ID NO: 84 (minus the signal sequence "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS".15 The antibodies of the การประดิษฐ์ can ประกอบรวมด้วย one หรือ more of these CDRs, orone หรือ more of these CDRS with 1, 2 หรือ 3 amino acid substitutions per CDR. The substitutions may be 'conservative' substitutions. Conservative substitutions providing functionally similar amino acids are well known in the art, and are described for example in Table 1 of WO 2010/019702, which คือ incorporated herein 20 by reference. Exemplary conservative substitutions are shown in Table 1. Amino acids are indicated using the well known three-letter code.Table 1.Original amino acid Exemplary conservative substitutionGiven that clone 12H3 and clone 20E5 bind to the ฮิวเมน CD134, the VHand VL sequences of each of them can be "mixed and matched" with other แอนติ-CD134 antibodies to create additional antibodies. The binding of such "mixed and matched" antibodies to the ฮิวเมน CD134 can be tested using the binding assays known in the art, ที่รวมถึง an assay described in the Examples. In one case, when 10 VH and VL regions are mixed and matched, a VH sequence from a particular VH/VL pairing คือ replaced with a structurally similar VH sequence. Likewise, in 39another case a VL sequence from a particular VH/VL pairing คือ replaced with a structurally similar VL sequence.Molecules containing only one หรือ two CDR regions (in some cases, even just a single CDR หรือ a part ของมัน, especially CDR3) are capable of retaining the 5 antigen-binding activity of the antibody from which the CDR(s) are derived. See, for example, Laune et al. JBC 1997; 272: 30937-44; Monnet et al. JBC 1999; 274 3789-96; Qiu et al. Nature Biotechnology 2007; 25: 921-9; Ladner et at Nature Biotechnology 2007; 25: 875-7; Heap et al. J Gen Virol 2005; 86: 1791-1800; Nicaise et al. Protein Science 2004; 13: 1882-91; Vaughan and Sollazzo 10 Combinatorial Chemistry & High Throughput Screening 2001; 4:417-430; QuiochoNature 1993; 362: 293-4; Pessi et al. Nature 1993; 362: 367-9; Bianchi et al. J Mol Biol 1994; 236: 649-59; และ Gao et al. J Biol Chem 1994; 269: 32389-93. Accordingly, one embodiment of the การประดิษฐ์นี้ คือ an isolated แอนติ- ฮิวเมน CD134 antibody that ประกอบรวมด้วย: (a) a บริเวณ แปรผัน สายหนัก 15 ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 12; (b) a light chain variableregion ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 13.In a further embodiment according to the การประดิษฐ์ คือ provided an isolated CD134 โมเลกุลยึดเกาะ that ประกอบรวมด้วย: (a) a heavy chain CDR1 ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 14; และ/or (b) a heavy chain CDR2 ซึ่งประกอบรวมด้วย 20 the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 15; และ/or (c) heavy chain CDR3 ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 16.In a further embodiment according to the การประดิษฐ์ คือ provided an isolated CD134 โมเลกุลยึดเกาะ that ประกอบรวมด้วย (a) a light chain CDR1 ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 17; และ/or (b) a light chain CDR2 ซึ่งประกอบรวมด้วย 25 the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 18; และ/or (c) a light chain CDR3 ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 19.Accordingly, one embodiment of the การประดิษฐ์นี้ คือ an isolated แอนติ- ฮิวเมน CD134 antibody that ประกอบรวมด้วย: (a) a บริเวณ แปรผัน สายหนัก ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 4; (b) a light chain variable 30 region ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 5. In a further embodiment according to the การประดิษฐ์ คือ provided an isolatedCD134 โมเลกุลยึดเกาะ that ประกอบรวมด้วย: (a) a heavy chain CDR1 ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 6; และ/or (b) a heavy chain CDR2 ซึ่งประกอบรวมด้วย 40the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 7; และ/or (c) heavy chain CDR3 ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 8.In a further embodiment according to the การประดิษฐ์ คือ provided an isolated CD134 โมเลกุลยึดเกาะ that ประกอบรวมด้วย (a) a light chain CDR1 ซึ่งประกอบรวมด้วย the 5 amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 9; และ/or (b) a light chain CDR2 ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 10; และ/or (c) a light chain CDR3 ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence ของ SEQ ID NO: 11.Given that clone 12H3 and clone 20E5 bind to the ฮิวเมน CD134 and that antigen-binding specificity คือ provided primarily by the CDR1, CDR2, and CDR3 10 regions, the VH CDR1, CDR2, and CDR3 sequences and VL CDR1, CDR2, and CDR3 sequences can be "mixed and matched" to create additional แอนติ-CD134 antibodies.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การประดิษฐ์นอกจากนี้ยังมีแอนติบอดี้ซึ่งประกอบรวมด้วยฮิวเมไนซ์ตัวแปร
25 พื้นที่ที่เลือกจากฮิวเมไนซ์ภูมิภาคตัวแปรของแอนติบอดี 12H3_VL1VH1;
12H3_VL1VH2 นั้น 12H3_VL1VH3 นั้น 12H3_VL2VH1 นั้น 12H3_VL2VH2 นั้น 12H3_VL2VH3 นั้น 20E5_VL1VH1 นั้น 20E5 VL1VH2; 20E5_VL1VH3 นั้น 20E5_VL2VH1 นั้น 20E5_VL2VH2 นั้น หรือ 20E_VL2VH3 (ตามที่ระบุไว้ในวรรคก่อนและตัวอย่าง) หรือบริเวณแปรผันสายหนัก s ของ SEQ ID
30 Nos. 101-133 และ 146-151
ในบางรูปลักษณะที่ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีคือฮิ วเมไนซ์ 12H3 แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยห่วงโซ่แสงของ SEQ ID NO: 90 (ลบ n-
ขั้วสัญญาณลำดับ"MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") และห่วงโซ่หนักของ SEQ
ID NO: 87 (ลบสัญญาณลำดับ "MELGLSWIFLLAILKGVQC"
ในบางรูปลักษณะที่ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีคือฮิวเมไนซ์ 12H3
แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยห่วงโซ่แสงของ SEQ ID NO: 90 (ลบ n- ขั้ว
5 สัญญาณลำดับ "MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") และหนัก ห่วงโซ่ของ SEQ
ID NO. 88 (ลบสัญญาณลำดับ "MELGLSWIFLLAILKGVQC"
ในบางรูปลักษณะที่ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีคือฮิวเมไนซ์ 12H3
แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยห่วงโซ่แสงของ SEQ ID NO: 90 (ลบ n-
ขั้วสัญญาณลำดับ"MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") และห่วงโซ่หนักของ SEQ 10 ID NO. 89 (ลบสัญญาณลำดับ "MELGLSWIFLLAILKGVQC"
ในบางรูปลักษณะที่ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีคือฮิวเมไน ซ์ 12H3
แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยห่วงโซ่แสงของ SEQ ID NO: 91 (ลบ n-
ขั้วสัญญาณลำดับ"MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") และห่วงโซ่หนักของ SEQ ID NO. 87 (ลบสัญญาณลำดับ "MELGLSWIFLLAILKGVQC"
15 ในบาง รูปลักษณะที่ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีคือฮิวเมไนซ์ 12H3
แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยห่วงโซ่แสงของ ID SEQ NO: 91 (ลบ n-
ขั้วสัญญาณลำดับ"MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") และห่วงโซ่หนักของ SEQ
NO ID: 88 (ลบสัญญาณลำดับ "MELGLSWIFLLAILKGVQC".
ในบางรูปลักษณะที่ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีคือฮิวเมไนซ์ 12H3
20 แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยห่วงโซ่แสงของ SEQ ID NO: 91 (ลบ
N-ขั้วสัญญาณลำดับ"MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC") และห่วงโซ่หนักของ SEQ
ID NO: 89 (ลบสัญญาณลำดับ "MELGLSWIFLLAILKGVQC".
ในบางรูปลักษณะที่ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีคือฮิวเมไนซ์ 20E5
แอนติบอดี ซึ่งประกอบรวมด้วยห่วงโซ่แสงของ SEQ ID NO: 85 (ลบ n- ขั้ว 25 สัญญาณลำดับ "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") และห่วงโซ่หนักของ SEQ ID
NO. 82 (ลบสัญญาณลำดับ "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS"
ในบางรูปลักษณะ, ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีคือฮิวเมไนซ์ 20E5
แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยห่วงโซ่แสงของ SEQ ID NO: 85 (ลบ n-
ขั้วสัญญาณลำดับ"MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") และห่วงโซ่หนักของ SEQ ID 30 NO : 83 (ลบสัญญาณลำดับ "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS".
ในบางรูปลักษณะแอนติบอดีฮิวเมไนซ์คือฮิวเมไนซ์ 20E5
แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยห่วงโซ่แสงของ SEQ ID NO: 85 (ลบ n- ขั้ว
สัญญาณลำดับ "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") และห่วงโซ่หนักของ SEQ ID
NO: 84 (ลบสัญญาณลำดับ "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS".
ในบางรูปลักษณะที่ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีคือฮิวเมไนซ์ 20E5
แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วย ห่วงโซ่แสงของ SEQ ID NO: 86 (ลบ n- ขั้ว 5 สัญญาณลำดับ "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") และห่วงโซ่หนักของ SEQ ID
NO: 82 (ลบสัญญาณลำดับ "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS".
ในบางรูปลักษณะที่ฮิวเม ไนซ์แอนติบอดีคือฮิวเมไนซ์ 20E5
แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยห่วงโซ่แสงของ SEQ ID NO: 86 (ลบ n-
ขั้วสัญญาณลำดับ"MEWSGVFMFLLSVTAGVHS") และห่วงโซ่หนักของ SEQ ID 10 NO: 83 (ลบ สัญญาณลำดับ "MEWSGVFMFLLSVTAGVHS".
ในบางรูปลักษณะที่ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีคือฮิวเมไนซ์ 20E5
แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยห่วงโซ่แสงของ SEQ ID NO: 86 (ลบ n-
ขั้วลำดับสัญญาณ" MEWSGVFMFLLSVTAGVHS ") และห่วงโซ่หนักของ SEQ ID NO: 84 (ลบสัญญาณลำดับ". MEWSGVFMFLLSVTAGVHS
"15 แอนติบอดีของการประดิษฐ์สามารถประกอบรวมด้วยหนึ่งหรือมากกว่าของ CDRs
เหล่านี้หรืออย่างใดอย่างหนึ่งหรือมากกว่าของCDRS เหล่านี้ด้วย 1, 2 หรือ 3 แทนกรดอะมิโนต่อ CDR
แทนอาจจะเป็น 'อนุรักษ์นิยม' แทน แทนอนุรักษ์นิยมให้กรดอะมิโนที่คล้ายกันตามหน้าที่ที่รู้จักกันดีในงานศิลปะและมีการอธิบายเช่นในตารางที่1 ของ WO 2010/019702 ซึ่งในที่นี้คือ 20 นิติบุคคลที่จัดตั้งขึ้นโดยการอ้างอิง แทนอนุรักษ์นิยมที่เป็นแบบอย่างที่แสดงในตารางที่ 1 อะมิโนกรดจะถูกระบุโดยใช้รหัสที่รู้จักกันดีทั้งสามตัวอักษร. ตารางที่ 1 กรดอะมิโนต้นฉบับทดแทนอนุรักษ์นิยมที่เป็นแบบอย่างระบุว่าโคลนและโคลน 12H3 20E5 ผูกกับฮิวเมน CD134 ที่ VH และ VL ลำดับของแต่ละของพวกเขาสามารถ "ผสมและจับคู่" กับคนอื่น ๆ แอนติ - CD134 แอนติบอดีในการสร้างแอนติบอดี้เพิ่มเติม มีผลผูกพันดังกล่าว "ผสมและจับคู่กับ" แอนติบอดี้กับฮิวเมน CD134 สามารถทดสอบได้โดยใช้การตรวจผูกพันที่รู้จักกันในศิลปะที่รวมถึงเป็นการตรวจสอบที่อธิบายไว้ในตัวอย่าง ในกรณีหนึ่งเมื่อ 10 VH และภูมิภาค VL จะผสมและจับคู่ลำดับ VH โดยเฉพาะอย่างยิ่งจากการจับคู่VH / VL คือแทนที่ด้วยลำดับ VH ใกล้เคียงกัน ในทำนองเดียวกันใน39 อีกกรณีลำดับ VL จากโดยเฉพาะอย่างยิ่งการจับคู่ VH / VL คือแทนที่ด้วยลำดับ VL ใกล้เคียงกัน. โมเลกุลที่มีเพียงหนึ่งหรือสองภูมิภาค CDR (ในบางกรณีแม้เพียงCDR เดียวหรือเป็นส่วนหนึ่งของมันโดยเฉพาะอย่างยิ่ง CDR3) มีความสามารถในการรักษา5 กิจกรรมแอนติเจนผูกพันของแอนติบอดีจากที่ CDR (s) จะได้มา ดูตัวอย่างเช่น Laune et al, JBC 1997; 272: 30937-44; Monnet et al, JBC 1999; 274 3789-96; Qiu et al, ธรรมชาติเทคโนโลยีชีวภาพ 2007; 25: 921-9; Ladner ที่ธรรมชาติและเทคโนโลยีชีวภาพ2007; 25: 875-7; กอง et al, J Gen Virol 2005; 86: 1791-1800; Nicaise et al, โปรตีนวิทยาศาสตร์ 2004; 13: 1882-1891; วอห์นและ Sollazzo 10 Combinatorial เคมีและสูงกำลังการคัดกรอง 2001; 4: 417-430; Quiocho ธรรมชาติ 1993; 362: 293-4; Pessi et al, ธรรมชาติ 1993; 362: 367-9; Bianchi et al, J Mol Biol 1994; 236: 649-59; และ Gao et al, J Biol Chem 1994; 269: 32389-93. ดังนั้นหนึ่งในศูนย์รวมของการประดิษฐ์นี้คือแยกแอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดี CD134 ที่ประกอบรวมด้วย: (ก) บริเวณแปรผันสายหนัก15 ซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดอะมิโนของ SEQ ID NO: 12; (ข) ตัวแปรห่วงโซ่แสงภูมิภาคซึ่งประกอบรวมด้วยกรดอะมิโนลำดับของSEQ ID NO: 13 ในศูนย์รวมต่อไปตามคือการประดิษฐ์ให้แยกCD134 โมเลกุลยึดเกาะที่ประกอบรวมด้วย (ก) หนัก ห่วงโซ่ CDR1 ซึ่งประกอบรวมด้วยกรดอะมิโนลำดับของSEQ ID NO: 14; และ / หรือ (ข) ห่วงโซ่หนัก CDR2 ซึ่งประกอบรวมด้วย 20 กรดอะมิโนลำดับของ SEQ ID NO: 15; และ / หรือ (ค) ห่วงโซ่หนัก CDR3 ซึ่งประกอบรวมด้วยกรดอะมิโนลำดับของ SEQ ID NO: 16 ในศูนย์รวมต่อไปตามการประดิษฐ์คือให้แยกCD134 โมเลกุลยึดเกาะที่ประกอบรวมด้วย (ก) แสง ห่วงโซ่ CDR1 ซึ่งประกอบรวมด้วยกรดอะมิโนลำดับของSEQ ID NO: 17; และ / หรือ (ข) ห่วงโซ่แสง CDR2 ซึ่งประกอบรวมด้วย 25 กรดอะมิโนลำดับของ ID SEQ NO: 18; และ / หรือ (ค) ห่วงโซ่แสง CDR3 ซึ่งประกอบรวมด้วยกรดอะมิโนลำดับของ SEQ ID NO: 19 ดังนั้นหนึ่งในศูนย์รวมของการประดิษฐ์นี้คือแยกแอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดี CD134 ที่ประกอบรวมด้วย (ก) สายแปรผันบริเวณหนักซึ่งประกอบรวมด้วยกรดอะมิโนลำดับของSEQ ID NO: 4; (ข) ตัวแปรห่วงโซ่แสง 30 ภูมิภาคซึ่งประกอบรวมด้วยกรดอะมิโนลำดับของ SEQ ID NO: 5. ในศูนย์รวมต่อไปตามการประดิษฐ์คือให้แยกCD134 โมเลกุลยึดเกาะที่ประกอบรวมด้วย: (ก) ห่วงโซ่หนัก CDR1 ซึ่งประกอบรวมด้วยกรดอะมิโนลำดับของ SEQ ID NO: 6; และ / หรือ (ข) ห่วงโซ่หนัก CDR2 ซึ่งประกอบรวมด้วย40 กรดอะมิโนลำดับของ SEQ ID NO: 7; และ / หรือ (ค) ห่วงโซ่หนัก CDR3 ซึ่งประกอบรวมด้วยกรดอะมิโนลำดับของ SEQ ID NO: 8. ในศูนย์รวมต่อไปตามการประดิษฐ์คือให้แยกCD134 โมเลกุลยึดเกาะที่ประกอบรวมด้วย (ก) แสง ห่วงโซ่ CDR1 ซึ่งประกอบรวมด้วยอะมิโน 5 ลำดับกรดของ SEQ ID NO: 9; และ / หรือ (ข) ห่วงโซ่แสง CDR2 ซึ่งประกอบรวมด้วยกรดอะมิโนลำดับของID SEQ NO: 10; และ / หรือ (ค) ห่วงโซ่แสง CDR3 ซึ่งประกอบรวมด้วยกรดอะมิโนลำดับของ ID SEQ NO: 11 ระบุว่าโคลนและโคลน 12H3 20E5 ผูกกับฮิวเมน CD134 และความจำเพาะแอนติเจนผูกพันคือให้หลักโดยCDR1, CDR2 และ CDR3 10 ภูมิภาคที่ VH CDR1, CDR2 และลำดับ CDR3 และ VL CDR1, CDR2 และลำดับCDR3 สามารถ "ผสมและจับคู่" เพื่อสร้างเพิ่มเติมแอนติ -CD134 แอนติบอดี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การประดิษฐ์ยังมีภูมิคุ้มกันซึ่งประกอบรวมด้วยเป็นฮิวเมไนซ์ตัวแปร
25 เขตเลือกจากฮิวเมไนซ์ภูมิภาคตัวแปรของแอนติบอดี 12h3_vl1vh1 ;
12h3_vl1vh2 ; 12h3_vl1vh3 ; 12h3_vl2vh1 ; 12h3_vl2vh2 ; 12h3_vl2vh3 ; 20e5_vl1vh1 ; 20e5 vl1vh2 ; 20e5_vl1vh3 ; 20e5_vl2vh1 ; 20e5_vl2vh2 ;ที่ 20e_vl2vh3 ค็อค ( ตามที่ระบุในย่อหน้าก่อนหน้านี้และตัวอย่าง ) , ค็อคบริเวณแปรผันสายหนัก S ของ seq id
30 1 . และ 101-133 146-151 .
ในบางรูปลักษณะ , ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีที่ฮิวเมไนซ์ความ 12h3 แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยโซ่แสงของ seq id : 90 ( ลบกรดอะมิโน
สัญญาณดับ " mdmrvpaqllgllllwfpgarc " ) และหนักโซ่ของ seq
ไม่มี ID : 87 ( ลบสัญญาณลำดับ " melglswifllailkgvqc "
ในบางรูปลักษณะ , ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีที่ฮิวเมไนซ์ความ 12h3
แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยโซ่แสงของ seq id : 90 ( ลบกรดอะมิโน
5 สัญญาณลำดับ " mdmrvpaqllgllllwfpgarc " ) และหนักโซ่ seq
ไม่มี ID : 88 ( ลบสัญญาณลำดับ " melglswifllailkgvqc "
ในบางรูปลักษณะ , ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีที่ฮิวเมไนซ์ความ 12h3
แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยโซ่แสงของ seq id : 90 ( ลบกรดอะมิโน
สัญญาณดับ " mdmrvpaqllgllllwfpgarc " ) และโซ่หนักของ seq 10 ไม่มี ID : 89 ( ลบสัญญาณลำดับ " melglswifllailkgvqc "
ในบางรูปลักษณะ , ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีที่ฮิวเมไนซ์ความ 12h3
แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยโซ่แสงของ seq id : 91 ( ลบกรดอะมิโน
สัญญาณดับ " mdmrvpaqllgllllwfpgarc " ) และหนักโซ่ของ seq id : 87 ( ลบสัญญาณลำดับ " melglswifllailkgvqc " .
15 ในบางรูปลักษณะ , ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีที่ฮิวเมไนซ์ความ 12h3
แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยแสงโซ่ของ seq id : 91 ( ลบกรดอะมิโน
สัญญาณดับ " mdmrvpaqllgllllwfpgarc " ) และหนักโซ่ของ seq
ไม่มี ID : 88 ( ลบสัญญาณลำดับ " melglswifllailkgvqc "
ในบางรูปลักษณะ , ความฮิวเมไนซ์แอนติบอดีที่ฮิวเมไนซ์ 12h3
20 ) ซึ่งประกอบรวมด้วยโซ่แสงของ seq id : 91 ( ลบกรดอะมิโน
สัญญาณดับ " mdmrvpaqllgllllwfpgarc " ) และหนักโซ่ของ seq
ไม่มี ID : 89 ( ลบสัญญาณลำดับ " melglswifllailkgvqc "
ในบางรูปลักษณะ , ฮิวเมไนซ์แอนติบอดีที่ฮิวเมไนซ์ความ 20e5
แอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยโซ่แสงของ seq id ไม่ :