AbstractThrough PCR amplification,

Abstract
Through PCR amplification, 5′ flanking region and partial open reading frame (ORF) of gene of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) was cloned by PCR amplification. Sequence analysis showed that no difference was found in known functional regions. This study was to construct and identify the mammalian expression vector of pEGFP-β-actin and to detect whether it could express in HEK 293T cell line. pEGFP-β-actin was transfected into HEK 293T cells with Lipofectamine 2000. The results showed that correct construction of recombinant pEGFP-β-actin has been shown by restriction enzyme digestion. The expression of gene in HEK 293T cells could be observed under microfluoroscope. pEGFP-β-actin could repress EGFP protein in HEK 293T cells. The results showed that β-actin gene promoter possessed effective transcription activities in eukaryotic cells. The work laid foundations for further study on the gene engineering and autotransgenic tilapia.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อผ่าน PCR ขยาย 5′ flanking ภูมิภาคและกรอบเปิดอ่านบางส่วน (ORF) ของยีนของนิล (Oreochromis niloticus) ถูกโคลน โดยขยาย PCR การวิเคราะห์พบว่า ความแตกต่างไม่พบในภูมิภาครู้จักทำงาน การศึกษานี้ได้สร้าง และระบุเวกเตอร์นิพจน์ mammalian ของ pEGFP-β-แอกติน และพบว่า สามารถแสดงในรายการเซลล์ 293T HEK pEGFP-β-แอกตินถูก transfected เป็นเซลล์ 293T HEK Lipofectamine 2000 ผลพบว่า ได้รับการแสดง recombinant pEGFP-β-แอกตินถูกสร้าง โดยย่อยอาหารเอนไซม์จำกัด ไม่สามารถสังเกตค่าของยีนในเซลล์ 293T HEK ภายใต้ microfluoroscope pEGFP-β-แอกตินสามารถปราบปราม EGFP โปรตีนในเซลล์ 293T HEK ผลพบว่าβ-แอกตินยีนโปรโมเตอร์ต้อง transcription มีประสิทธิภาพกิจกรรมในเซลล์ eukaryotic งานวางรากฐานสำหรับการศึกษาต่อในปลานิลวิศวกรรมและ autotransgenic ยีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อผ่านการขยาย PCR, 5 'ขนาบภูมิภาคและกรอบบางส่วนอ่านเปิด (ORF) ของยีนของปลานิล (Oreochromis niloticus) เป็นโคลนโดยขยาย PCR
การวิเคราะห์ลำดับแสดงให้เห็นว่าไม่แตกต่างกันพบว่าในภูมิภาคที่รู้จักกันในการทำงาน การศึกษาครั้งนี้เพื่อสร้างและระบุเวกเตอร์การแสดงออกของการเลี้ยงลูกด้วยนม pEGFP-β-โปรตีนและการตรวจสอบไม่ว่าจะสามารถแสดงใน HEK 293T เซลล์ pEGFP-β-โปรตีนถูก transfected เข้าไปในเซลล์ HEK 293T กับ Lipofectamine 2000 ผลการศึกษาพบว่าการก่อสร้างที่ถูกต้องของ recombinant pEGFP-β-โปรตีนได้รับการแสดงโดยการย่อยอาหารเอนไซม์ จำกัด การแสดงออกของยีนในเซลล์ HEK 293T สามารถสังเกตภายใต้ microfluoroscope pEGFP-β-โปรตีนสามารถระงับ EGFP โปรตีนในเซลล์ HEK 293T ผลการศึกษาพบว่าผู้ก่อการยีนβ-โปรตีนมีกิจกรรมที่มีประสิทธิภาพในการลอกเซลล์ eukaryotic งานวางรากฐานสำหรับการศึกษาต่อด้านวิศวกรรมของยีนและ autotransgenic ปลานิล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

นามธรรม
ผ่าน PCR ( 5 ’ flanking region บางส่วนและเปิดอ่านกรอบ ( ORF ) ของยีนของปลานิลถูกโคลนโดยวิธี PCR แบบ . การวิเคราะห์ลำดับเบส พบว่าไม่มีความแตกต่างที่พบในภูมิภาคที่รู้จักหน้าที่นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อสร้างและศึกษาการควบคุมการแสดงออกของเวกเตอร์ pegfp - บีตา - actin และตรวจสอบว่ามันสามารถแสดงใน hek 293t เซลล์ไลน์ pegfp - บีตา - actin คือ transfected เป็น hek 293t เซลล์ที่มี lipofectamine 2000 ผลการศึกษาพบว่า การก่อสร้างที่ถูกต้องของรีคอมบิแนนท์ pegfp - บีตา - actin ได้ถูกแสดง โดยเอนไซม์ย่อยอาหารการแสดงออกของยีนในเซลล์ hek 293t สามารถสังเกตได้ที่ microfluoroscope . pegfp - บีตา - actin สามารถปราบปราม egfp hek 293t โปรตีนในเซลล์ ผลการศึกษาพบว่าบีตา - actin ยีนส่งเสริมมีกิจกรรมถอดความมีประสิทธิภาพในยูคาริโอติกเซลล์ งานวางฐานรากเพื่อการศึกษาเกี่ยวกับยีนวิศวกรรมและ autotransgenic ปลานิล