Confocal Laser Scanning MicroscopyB

Confocal Laser Scanning Microscopy

Bactericidal effect of A. princeps extract was determined by confocal laser scanning microscopy. The cultured MRSA in BHI was diluted using BHI media to approximately 1 × 107 CFU/mL. The bacteria (1 × 107 CFU/mL) were treated with high concentrations (8–64 mg/mL) of A. princeps extract at 37°C under aerobic conditions. After 30 min of incubation, the bacteria were washed with PBS and stained with LIVE/DEAD BacLight Bacterial Viability Kit (Molecular Probes, Eugene, OR, USA), prepared according to the manufacturer's instructions, for 15 min. Stained bacteria were observed confocal laser scanning microscopy (LSM 510, Zeiss, Germany). This method is based on two nucleic acid stains: green fluorescent SYTO 9 stain and red fluorescent propidium iodide stain which differ in their ability to penetrate healthy bacterial cells. SYTO 9 stain labels live bacteria, in contrast propidium iodide penetrates only bacteria with damaged membranes.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เลเซอร์ confocal Microscopy การการสแกนผล bactericidal ของสารสกัด A. princeps ถูกกำหนด โดยเลเซอร์ confocal microscopy การสแกน MRSA อ่างใน BHI ถูกทำให้เจือจางโดยใช้สื่อ BHI ประมาณ 1 × 107 CFU/mL แบคทีเรีย (1 × 107 CFU/mL) ได้รับการรักษา ด้วยความเข้มข้นสูง (64-8 mg/mL) ของสารสกัด A. princeps ที่ 37° C ภายใต้เงื่อนไขแอโรบิก หลังจาก 30 นาทีของคณะทันตแพทยศาสตร์ แบคทีเรียถูกล้าง ด้วย PBS และสีกับ LIVE/ตาย BacLight แบคทีเรียนี้ชุด (Probes โมเลกุล Eugene หรือ สหรัฐอเมริกา), จัดทำตามคำแนะนำของผู้ผลิต สำหรับ 15 นาทีสี แบคทีเรียสุภัคเลเซอร์ confocal สแกน microscopy (510 ทต้า Zeiss เยอรมนี) วิธีการนี้จะขึ้นอยู่กับสองกรดนิวคลีอิกคราบ: สีเขียวเรืองแสง SYTO 9 คราบและคราบไอโอไดด์ propidium สีแดงเรืองแสงที่แตกต่างในความสามารถในการเข้าเซลล์แบคทีเรียเพื่อสุขภาพ SYTO 9 คราบแบคทีเรียอยู่ที่ป้ายชื่อ ไอโอไดด์ propidium แทรกซึมแบคทีเรีย ด้วยสารเสียหายตรงกันข้าม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Confocal เลเซอร์สแกนกล้องจุลทรรศน์ฆ่าเชื้อแบคทีเรียของสารสกัดจากผลท่านชายเอถูกกำหนดโดยใช้กล้องจุลทรรศน์เลเซอร์สแกนconfocal MRSA เลี้ยงใน BHI ถูกเจือจางใช้สื่อ BHI ประมาณ 1 × 107 โคโลนี / มิลลิลิตร แบคทีเรีย (1 × 107 โคโลนี / มิลลิลิตร) ได้รับการรักษาที่มีความเข้มข้นสูง (8-64 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร) ของเอสารสกัดจากท่านชายที่ 37 ° C ภายใต้เงื่อนไขแอโรบิก หลังจาก 30 นาทีของการบ่มเชื้อแบคทีเรียที่ถูกล้างด้วยพีบีเอสและย้อมด้วยสีสด / ตาย BacLight แบคทีเรียมีชีวิต Kit (วัดระดับโมเลกุล, ยู, OR, USA) จัดทำขึ้นตามคำแนะนำของผู้ผลิตเป็นเวลา 15 นาที แบคทีเรียสีถูกตั้งข้อสังเกตกล้องจุลทรรศน์เลเซอร์สแกน confocal (LSM 510 Zeiss, เยอรมนี) วิธีนี้จะขึ้นอยู่กับสองคราบกรดนิวคลีอิก: เรืองแสงสีเขียว SYTO 9 คราบและเรืองแสงสีแดง propidium คราบไอโอไดด์ที่แตกต่างกันในความสามารถในการเจาะเซลล์แบคทีเรียที่ดีต่อสุขภาพ SYTO 9 ป้ายคราบแบคทีเรียที่อาศัยอยู่ในทางตรงกันข้ามไอโอไดด์ propidium แทรกซึมเฉพาะเชื้อแบคทีเรียที่มีเยื่อเสียหาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ด้วยเลเซอร์สแกนกล้องจุลทรรศน์

ตามลำดับผลของ . princeps แยกวิเคราะห์ด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบสแกนด้วยเลเซอร์ . การเพาะเลี้ยงเชื้อใน BHI เจือจางใช้ BHI สื่อประมาณ 1 × 107 CFU / ml แบคทีเรีย ( 1 × 107 CFU / ml ) ได้รับการรักษาที่มีความเข้มข้นสูง ( 8 - 64  มก. / มล. ) ของ princeps สกัดที่อุณหภูมิ 37 องศา C ภายใต้สภาวะแอโรบิก . หลังจาก 30 นาทีของ ระยะเวลาแบคทีเรียถูกล้างด้วย pbs และเปื้อนด้วยชีวิต / ตาย baclight แบคทีเรียชุด 1 ( โมเลกุลโพรบ ยูจีน หรือ สหรัฐอเมริกา ) ที่เตรียมไว้ ตามคำแนะนำของผู้ผลิตสำหรับ 15 นาที คราบแบคทีเรียที่พบด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบสแกนเลเซอร์ ( LSM 510 , Zeiss , เยอรมัน ) วิธีการนี้จะขึ้นอยู่กับสองคราบกรดนิวคลีอิก :เรืองแสงสีเขียว syto 9 คราบสีแดงเรืองแสง propidium ไอโอไดด์คราบที่แตกต่างกันในความสามารถของพวกเขาที่จะเจาะเซลล์แบคทีเรียที่มีสุขภาพดี syto 9 คราบป้ายสด แบคทีเรีย ในทางตรงกันข้าม propidium ไอโอไดด์แทรกซึมเฉพาะแบคทีเรียกับความเสียหายเยื่อ