Journal of Plant Biology, June 2004

Journal of Plant Biology, June 2004, 47(2) : 163-165
REPORT
UV Absorbent, Marmesin, from the Bark of Thanakha,
Hesperethusa crenulata L.
Se-Hwan Joo, Sang-Cheol Lee, and Seong-Ki Kim *
Department of Life Science, Chung-Ang University, Seou1156-756, Korea
We used solvent extractions, SiO2 column chromatographies, and HPLC to isolate from the bark of Thanakha (Hes-
perethusa crenulata L.) an active crystalline compound for absorbing UV-A radiation (320 to 380 nm). Analyses of low-
and high-resolution FAB-MS revealed a compound, named marmesin, with a formula of C14H1404and a molecular
mass of 246. To determine its chemical structure, we conducted 300 MMz NMR analyses using various probes, 1H,
13C, and DEPT 13C. Our NMR data showed a structure of 2,3-dihydro-2(1 -hydroxy.1 -methylethyl)-furanocoumarin. This
active compound contains UV-absorbing chromophores, an aromatic ring, a double bond at C3-C4, and a carbonyl at
C2. Its ~m~ is 335 rim, indicating that marmesin could be commercially useful as a natural UV-A-filtering product.
Keywords: marmesin, Thanakha(Hesperethusa crenulata L.), UV-A-absorbent
Natural daylight comprises vanous wavelengths of
radiation, including UV (ultraviolet) with its ran~ of
200 to 380 nm. UV light can be further subdivided
into UV-C (200 to 280 nm), UWB (280 to 320 nm),
and UV-A (320 to 380 nm) (Cockell, 1998). In gen-
eral, UV-C is absorbed by the atmospheric ozone
layer, whereas UV-B and UV-A can penetrate that
ozone layer and reach the earth. Excessive exposure
to UV-B and UV-A radiation can have deleterious
effects on human beings, including sunburn, sun-
damaged skin, cataracts, snow blindness, skin cancer,
and immune system deficiencies (van der Leun,
1996; Duthie et al., 1999; Hawk, 1999; Hockwin et
al., 1999). To provide protection from UV-B damage,
numerous products have been developed by isolating
active compounds from natural sources as well as
through chemical synthesis. These are now used
commercially as protectants or filters in many indus-
tries. However, only a limited number of compounds
have been developed to guard against UV-A radia-
tion. Therefore, the objective of our study was to
identify potential UV A-filtering compound(s) from
the bark of Thanakha (H. crenulata L.). Although pow-
der obtained from this species has been traditionally
used in UV-filtering cosmetics in Myanmar, its active
ingredients have not been examined extensively.
We extracted bark tissue (600 g) with a mixture of
methanol and chloroform (1:1, 5 Lx3). After evapora-
*Correspondingauthor;fax + 82-2-820-5210
e-mail [e-mail]
163
tion, 14 g of the extract was purified by silica gel
chromatography eluted stepwise with chloroform
containing 0, 1, 2, 3, 4, 5, 10, and 100% methanol.
In TLC (Merck F254) developed with a 40:1 mixture
of chloroform and methanol, those fractions eluted
with 1% methanol showed strong fluorescent spots
under UV illumination at 365 nm. Thereafter, the 3.7
g fractions were combined and subjected to a sec-
ond silica gel chromatography, eluted with a 1:1 mix~
ture of hexane and ethyl acetate. Under the same
TLC analysis conditions, a spot at Rf 0.18 exhibited
the strongest fluorescence. Fractions containing the
active principle were re-combined and further puri-
fied via reversed-phase HPLC (Waters, ~Bondapak
C18, 20xl 50 mm) by eluting them with 30% acetoni-
trile at a flow rate of 5 mL min -~. The peak captured
at 13.3 min was then dried and crystallized in metha-
nol. From this, we were able to obtain needle-like
crystals of the active compound (8 mg) that could be
used in instrumental analyses to determine the struc-
ture of this compound.
Positive and negative low-resolution FAB-MS (JMS
AX505WA MS spectrometer, Electron voltage: 70 eV,
Matrix: meta-nitrobenzyl alcohol) revealed a promi-
nent ion for [M+H] § and [M-H] at m/z 247 and 245,
respectively. This indicated that the molecular weight
of the compound is 246. In positive high-resolution
FAB-MS, an ion for [M+H] § detected at m/z
247.0965 had a molecular formula of C14H1~O4 (cal-
culated molecular weight: 247.0971). Therefore, the
molecular formula of the active compound was

164
100-
90-
80 Z
70-
60-
~
5O
59
Joo et al.
J. Plant Biol. Vol. 47, No. 2, 2004
112.97, 125.33, 155.94, 161.73, and 163.50 repre-
sented non-protonated carbons. Thus, the extra for-
mula of HO4 is thought to be a hydroxyl and three
single oxygen groups, including ester(s) and/or carbo-
nyl(s). Absorption at 8 71.77 indicated that the
hydroxyl is attached to a non-protonated carbon. Two
methyl signals from 300 MHz 1H NMR were detected
as singlets at 5 1.146 and 1.279, both of which are
down-shifted by the hydroxyl. By this we were able
to confirm that a hydroxy-methylethyl (i.e., a tertiary
alcohol) group is present in the structure. Signals at 8
112.97 and 125.33 in 13C NMR were assignable for
two methines in an aromatic ring. Those shown at
6.632 and 7.129 were singlets in 1H NMR, indicating
that four carbons in the aromatic ring are substituted
and the two methines are separated.
The presence of olefinic carbons due to absorptions
at 5 115.94 and 161.73 in ~3C NMR was detected as
doublets (J=9.3 Hz) at 6 6.109 and 7.501 in ~H NMR.
Furthermore, chemical shifts of the olefin in both ~3C
and ~H NMR were identical to those derived from cou-
marin, a compound that has a lactone with a vicinal
double bond in the ring structure (Charles and Jacqlynn,
1993). Because of the presence of an aromatic ring, we
believe this compound is a coumarin derivative. The
signal for a methylene at $ 3.125 (2H, dd, J=8.7, 7.2
Hz) in 1H NMR was coupled with that for a methine at
8 4.651 (H, dd, J=8.7, 8.4 Hz), indicating that an addi-
tional CH2-CH- structure is involved in the compound.
[M] +
246
~ 4o
30-
20
10
131
159
I
160
213
.I,I II.i, J,
60
80
100
120
140
160
180
200
Mass Charge
,, 7
220
240
260
(m/z)
Figure 1. MS spectrum (JWS AX505 mass spectrometer,
direct inlet, El, 70 eV) of marmesin, a UV-A-absorbing com-
pound from Thanakha bark.
determined to be C14H1404.
In direct El MS (70 eV), a molecular ion was also
detected at m/z 246 (Fig. 1). Prominent ions due to fis-
sions of hydroxyl and methyls at m/z 228[M-H20] +,
213[M-H20-CH~] § and 187[M-H-H20-2CH3] + were
also shown, suggesting that the structure contains a ter-
tiary alcohol moiety. Moreover, the presence of an ion
at m/z 77 indicated that an aromatic ring is present (Sil-
verstein et al., 1991 ).
300 MHz ~3C DEPT NMR revealed that signals at 8
24.38 and 26.13 were for methyls; at 29.55 for a
methylene; and at 91.32, 98.09, 112.45, 123.63,
and 143.94 for methines (Table 1). Signals at ~ 71.77,
Table 1. ~3Cand ~H NMR (Varian Gemini 2000 spectrometer
300 MHz) data (CDCI~, & ppm from trimethylsilane) for
marmesin.
13C~H
Ring structure
C-2
C-3
C-4
C-4a
C-5
C-6
C-7
C-8
C-8a
C-2
C-3
Side chain
C-1
C-2
or C-3
161.73
112.45
143.94
112.97
123.63
125.33
163.50
98.09
155.94
91.32
29.55
71.77
24.38
or 26.13
7.501 d
(J=9.3)
6.109 s
(J=9.3)
6.632 s
2"
HO
"1 I
5
~,
~
2
8
'O o -o
Figure 2. Structure of marmesin.
3k
2
'~
7.129 s
4.651 dd
(/=8.7, 8.4 )
3.125 dd
(J=8.7, 7.2 )
200
220
240
~.maxi335 nm
i
260
i
280
i
300
i
320
i
340
i
360
Wave length (nm)
1.146 s
or 1.279 s
Figure 3. UV absorption spectrum (Beckman DU 650, in
ethanol) of marmesin.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วารสารชีววิทยาของพืชมิถุนายน 2004, 47 (2):. 163-165

รายงานยูวีดูดซับ marmesin จากเปลือกของ thanakha
hesperethusa crenulata ลิตร
se-hwan Joo ร้องเพลง-cheol lee และ Seong-ki kim *
ภาควิชาวิทยาศาสตร์เพื่อชีวิตมหาวิทยาลัย Chung-อัง, seou1156-756, เกาหลี
เราใช้ในการสกัดสารตัวทำละลาย chromatographies คอลัมน์ SiO2 และ hplc ที่จะแยกจากเปลือก thanakha (HES-
perethusa crenulata ลิตร) สารผลึกใช้งานสำหรับการดูดซับรังสี UV-A (320-380 นาโนเมตร) วิเคราะห์ต่ำ
และความละเอียดสูง-ms Fab พบสารประกอบชื่อ marmesin ด้วยสูตรของ c14h1404and โมเลกุล
มวลจาก 246 เพื่อตรวจสอบโครงสร้างทางเคมีของเราดำเนินการ 300 MMZ nmr วิเคราะห์โดยใช้ยานสำรวจต่างๆ 1h
13c และ 13c ฝ่าย ข้อมูลของเราแสดงให้เห็นว่า nmr โครงสร้างของ 2,3-dihydro-2 (1-ไฮดรอกซี1-methylethyl) furanocoumarin นี้
สารประกอบที่ใช้งานยูวีมีการดูดซับ chromophores, แหวนหอมพันธะคู่ที่ c3-c4 และคาร์บอนิลที่
c2 ของ ~ ~ เมตรเป็น 335 ขอบแสดงให้เห็นว่า marmesin จะเป็นประโยชน์ในเชิงพาณิชย์เป็นผลิตภัณฑ์ยูวี-a-กรองธรรมชาติ
คำหลัก:. marmesin, thanakha (hesperethusa crenulata ลิตร.), ยูวี-a-
ดูดซับแสงธรรมชาติประกอบด้วยความยาวคลื่น vanous ของ
รังสีรวมทั้งยูวี (อัลตราไวโอเลต) ที่มีการวิ่งของ ~ ของ
200-380 นาโนเมตร แสงยูวีสามารถแบ่งออกเป็นยูวี
-C (200-280 นาโนเมตร) UWB (280-320 นาโนเมตร)
และ UV-(320-380 นาโนเมตร) (Cockell, 1998) ใน GEN-
eral, ยูวีซีจะถูกดูดซึมโดยบรรยากาศโอโซน
ชั้นในขณะที่ยูวี-b และ UV-สามารถเจาะที่
ชั้นโอโซนและเข้าถึงโลก การเปิดรับมากเกินไปที่จะ
UV-B ได้และรังสี UV-A สามารถมีอันตราย
ผลกระทบต่อมนุษย์รวมทั้งการถูกแดดเผาดวงอาทิตย์-
ผิวเสียหายต้อกระจกตาบอดหิมะโรคมะเร็งผิวหนัง
และข้อบกพร่องของระบบภูมิคุ้มกัน (แวนเดอร์ Leun,
1996; duthie et al, 1999;. เหยี่ยว, 1999; hockwin เอ
อัล ., 1999) เพื่อให้การป้องกันจากยูวี-b ความเสียหาย
สินค้าจำนวนมากได้รับการพัฒนาโดยการแยกสาร
จากแหล่งน้ำธรรมชาติเช่นเดียวกับที่ผ่าน
สังเคราะห์สารเคมี เหล่านี้จะใช้ตอนนี้
ในเชิงพาณิชย์ในขณะที่ปกป้องหรือตัวกรองในพยายามอินดั-
หลาย แต่เพียงจำนวน จำกัด ของสาร
ได้รับการพัฒนาเพื่อป้องกันยูวี-radia-
tion ดังนั้นวัตถุประสงค์ของการศึกษาของเราก็คือการระบุ
ยูวีที่มีศักยภาพการกรองสาร (s) จาก
เปลือกของ thanakha (H. crenulata ลิตร.) แม้ว่าธาร-
เดอร์ที่ได้รับจากสายพันธุ์นี้ได้รับประเพณี
ที่ใช้ในเครื่องสำอางค์ยูวีกรองในพม่า, ปราดเปรียว
ส่วนผสมของยังไม่ได้รับการตรวจสอบอย่างกว้างขวาง.
เราสกัดเนื้อเยื่อเปลือก (600 กรัม) ที่มีส่วนผสมของเมทานอล
และคลอโรฟอร์ม (1:1, 5 LX3) หลังจาก evapora-
* correspondingauthor; โทรสาร [e-mail] 82-2-820-5210
อีเมล

163 tion, 14 กรัมของสารสกัดบริสุทธิ์โดยซิลิกาเจล
โคชะแบบขั้นตอนด้วยคลอโรฟอร์มมี 0
, 1, 2,3, 4, 5, 10, และ 100% เมทานอล.
ใน tlc (merck f254) การพัฒนาที่มีส่วนผสม
40:1 ของคลอโรฟอร์มและเมทานอลเศษส่วนที่ชะ
1% เมทานอลแสดงให้เห็นว่าจุดเรืองแสงที่แข็งแกร่งภายใต้แสงสว่าง
ยูวีที่ 365 นาโนเมตร หลังจากนั้น
3.7 กรัมส่วนมารวมกันและภายใต้โคเจลวินาที-
OND ซิลิกาชะด้วย 1:1 ผสม ~
ture ของเฮกเซนและเอทิลอะซิเตท ภายใต้เดียวกัน
เงื่อนไขการวิเคราะห์ tlc จุดที่ RF 0.18 แสดง
เรืองแสงที่แข็งแกร่ง เศษส่วนที่มี
หลักการที่ใช้งานได้อีกต่อไปรวมกันและ Puri-
กระแสไฟผ่าน hplc เฟสตรงกันข้าม (น้ำ, ~ bondapak
c18, 20XL 50 มม. ) โดยเคลือบด้วย 30% acetoni-
trile ที่อัตราการไหลของ 5 ml นาที - ~ ยอดเขาที่ถูกจับ
ที่ 13.3 นาทีก็แห้งแล้วและเป็นก้อนใน metha-
Nol จากนี้เราสามารถที่จะได้รับผลึกเหมือนเข็ม
ของสารประกอบที่ใช้งาน (8 มิลลิกรัม) ที่สามารถนำมาใช้ใน
เครื่องมือวิเคราะห์เพื่อกำหนดโครงสร้าง-
ture ของสารนี้.
ความละเอียดต่ำที่ FAB-MS บวกและลบ (jms
ax505wa สเปกโตรมิเตอร์มิลลิวินาทีแรงดันไฟฟ้าอิเล็กตรอน: 70 EV
เมทริกซ์: เครื่องดื่มแอลกอฮอล์เมตา nitrobenzyl) เปิดเผย Promi-
nent ไอออนสำหรับ [MH] §และ [MH] ที่ ม. / ซี 247 และ 245 ตามลำดับ
นี้ชี้ให้เห็นว่าน้ำหนักโมเลกุลของสารประกอบ
เป็น 246 ในความละเอียดสูง
ที่ FAB-ms บวกไอออนสำหรับ [MH] §ตรวจพบในเมตร / ซี
247.0965 มีสูตรโมเลกุลของ c14h1 ~ O4 (ไขมัน-
culated น้ำหนักโมเลกุล: 247.0971) จึง
สูตรโมเลกุลของสารประกอบที่ใช้งานอยู่เป็น


164 100 -
90 -

80 ซี 70 -
60 -.
~
5o

59 Joo ตอัล
เจ Biol พืช ฉบับ 47, ไม่มี 2 2004
112.97, 125.33, 155.94, 161.73,และ 163.50 ตัวแทน-
ตัวนำเสนอก๊อบปี้ไม่โปรโตเนต จึง Mula สำหรับ
พิเศษ ho4 คิดว่าจะมักซ์พลังค์และสาม
ออกซิเจนกลุ่มเดียวรวมทั้งเอสเตอร์ (s) และ / หรือคาร์โบ-
nyl (s) การดูดซึมที่ 8 71.77 ชี้ให้เห็นว่า
มักซ์พลังค์ที่แนบมากับคาร์บอนไม่โปรโตเนต สอง
สัญญาณเมธิลจาก 300 MHz 1h nmr ถูกตรวจพบ
เป็น singlets ที่ 5 1.146 และ 1.279 ซึ่งทั้งสองมี
ขยับลงโดยมักซ์พลังค์ โดยเราสามารถที่
เพื่อยืนยันว่าไฮดรอกซี-methylethyl (เช่นเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ในระดับอุดมศึกษา
) กลุ่มที่มีอยู่ในโครงสร้าง สัญญาณที่ 8
112.97 และ 125.33 ใน 13c nmr ได้มอบหมายให้
สอง methines ในวงแหวนอะโรมาติก ที่แสดงที่
6.632 และ 7.129 เป็น singlets ใน nmr 1h แสดง
ที่สี่ก๊อบปี้ในแหวนหอมถูกเปลี่ยนตัว
และทั้งสองจะแยก methines.
การปรากฏตัวของก๊อบปี้ olefinic เนื่องจากการดูดกลืน
ที่ 5 115.94 และ 161.73 ใน ~ 3c nmr ถูกตรวจพบว่าเป็น
doublets (ญ = 9.3 Hz) ที่ 6 6.109 และ 7.501 ใน ~ ชั่วโมง nmr.
นอกจากนี้ กะเคมีของคีนทั้งใน 3c
~ และ ~ ชั่วโมง nmr เหมือนกับที่ได้มาจาก cou-
มารีนสารประกอบที่มี lactone ด้วย vicinal
พันธะคู่ในโครงสร้างแหวน (charles และ jacqlynn
1993) เพราะการปรากฏตัวของวงแหวนอะโรมาติกที่เรา
เชื่อว่าสารนี้เป็นที่มา coumarin
สัญญาณเมทิลีนที่ $ 3.125 (2h, วันที่, เจ = 8.7, 7.2
Hz) ใน nmr 1h ได้รับการควบคู่ไปกับการว่าสำหรับ methine ที่ 4.651
8 (h, วันที่, เจ = 8.7, 8.4 Hz) แสดงให้เห็น ที่ Addi-
tional CH2-CH-โครงสร้างมีส่วนร่วมในสารประกอบ.
[ม]
246
~
4o30 -.
20
10
131
159
i
160
213
i, i ii.i, เจ

60 80

100 120 140

160
180
200

ค่าใช้จ่ายมวล,, 7

220 240 260

(m / z)
รูปที่ 1 สเปกตรัมมิลลิวินาที (สเปกโตรมิเตอร์มวล JWS ax505
เข้าโดยตรงเอล 70 EV) ของ marmesin, UV-ดูดซับ com-
ปอนด์จากเปลือก thanakha.
มุ่งมั่นที่จะ c14h1404.
ในเอมิลลิวินาทีโดยตรง (EV 70) ไอออนโมเลกุลก็ยัง
ตรวจพบในเมตร / ซี 246 (รูปที่ 1) ไอโอนิกที่โดดเด่นเนื่องจากสถาบันการเงิน-
ที่ต้องการให้ของมักซ์พลังค์และ methyls ที่ ม. / ซี 228 [ม-H20], 213
[ม-H20-CH ~] §และ 187 [MH-H20-2ch3] ถูก
ยังแสดงให้เห็นว่าโครงสร้างมีตรี-
ครึ่งแอลกอฮอล์ tiary นอกจากนี้การปรากฏตัวของไอออนที่
เมตร / ซี 77 ชี้ให้เห็นว่าแหวนที่มีกลิ่นหอมเป็นปัจจุบัน (ไอแอล-
verstein et al,. 1991).
300 MHz ~ 3c ฝ่าย nmr เปิดเผยว่าสัญญาณที่ 8
24.38 และ 26.13 มีไว้สำหรับ methyls; ที่ 29.55 สำหรับ
เมทิลีนและที่ 91.32, 98.09, 112.45, 123.63, 143.94
และเพื่อ methines (ตารางที่ 1) สัญญาณที่ 71.77 ~
ตารางที่ 1 ~ ~ 3cand ชั่วโมง nmr (varian gemini 2000 สเปกโตรมิเตอร์
300 MHz) ข้อมูล (cdci ~ & ppm จาก trimethylsilane) เพื่อ marmesin
.
~ 13c ชั่วโมง
โครงสร้างแหวน
c-2
c-3
c-4
c- 4a
c-5
c-6
c-7
c-8
c-8a
c-2
c-3
โซ่ข้าง
c-1
c-2
หรือ C-3

161.73 112.45
143.94

112.97 123.63 125.33


163.50 155.94 98.09

91.32

29.5571.77

24.38 หรือ 26.13

ง 7.501 (ญ = 9.3)

6.109 s (ญ = 9.3)
6.632 s
2 "
โฮ
" 1
5
~
~
2
8
oo -o
รูปที่ 2 โครงสร้างของ marmesin. 3k

2
~

s 7.129 4.651 วัน
(/ = 8.7, 8.4)

3.125 วัน (ญ = 8.7, 7.2)

200 220 240

~. maxi335 นาโนเมตร
i
260
i
280
i
300
i
320
i
340
i
360
คลื่นระยะเวลา (nm)

s 1.146 หรือ 1.279 s
รูปที่ 3 ยูวีสเปกตรัมการดูดซึม (Beckman du 650 ใน
เอทานอล) ของ marmesin.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สมุดรายวันของโรงงานชีววิทยา 2547 มิถุนายน 47(2): 163-165
รายงาน
UV Absorbent, Marmesin จากเปลือก Thanakha,
Hesperethusa crenulata L.
Joo Se Hwan, Lee Sang Cheol และคิมยูคิ *
กรมวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยงอัง Seou1156-756 เกาหลี
เราใช้ตัวทำละลายสกัด SiO2 คอลัมน์ chromatographies และ HPLC จะแยกจากเปลือกของ Thanakha (เขา-
perethusa crenulata L.) สารประกอบผลึกใช้งานอยู่สำหรับดูดรังสี UV-A (320-380 nm) วิเคราะห์ต่ำ-
และ FAB MS ความเปิดเผยมีผสม ชื่อ marmesin ด้วยสูตรของ C14H1404and มีโมเลกุล
มวลของ 246 การกำหนดโครงสร้างของสารเคมี เราดำเนินวิเคราะห์ MMz NMR 300 ใช้ต่าง ๆ คลิปปากตะเข้ 1H,
13C และแผนก 13C. ข้อมูล NMR พบโครงสร้างของ 2,3-dihydro-2(1-hydroxy.1 - methylethyl) -furanocoumarin นี้
บริเวณงานประกอบด้วยดูด UV chromophores แหวนตัวหอม พันธะคู่ที่ C3-C4 และ carbonyl ที่
C2 ของ ~ m ~ เป็นริม 335, marmesin ที่อาจเป็นประโยชน์ในเชิงพาณิชย์เป็นการธรรมชาติกรอง UV-A-ข้อมูลผลิตภัณฑ์การแสดง
คำสำคัญ: marmesin, Thanakha (Hesperethusa crenulata L.), UV-A-absorbent
แสงธรรมชาติประกอบด้วยความยาวคลื่น vanous ของ
รังสี รวมทั้งรังสียูวี (อัลตราไวโอเลต) ด้วยการวิ่ง ~ ของ
200-380 nm แสง UV สามารถเป็นปฐมภูมิเพิ่มเติม
เป็น UV-C (200-280 nm), UWB (280-320 nm),
และ UV-A (320-380 nm) (Cockell, 1998) ใน gen-
eral, UV-C ถูกดูด ด้วยโอโซนบรรยากาศ
ชั้น โดย UV B และ UV A สามารถเจาะที่
ชั้นโอโซนและการเข้าถึงโลก เปิดรับแสงมากเกินไป
UV B และ UV A รังสีได้ร้าย
ผลมนุษย์ รวมทั้งโดน ซัน-
หายผิว ต้อกระจก ตาบอดหิมะ โรค มะเร็งผิวหนัง,
และยังระบบภูมิคุ้มกัน (van der Leun,
1996 Duthie et al., 1999 เหยี่ยว 1999 Hockwin ร้อยเอ็ด
al., 1999) เพื่อป้องกันความเสียหาย UV-B,
ผลิตภัณฑ์จำนวนมากได้รับการพัฒนา โดยแยก
สารใช้จากแหล่งน้ำธรรมชาติเป็น
ผ่านเคมีสังเคราะห์ เหล่านี้จะใช้
ในเชิงพาณิชย์เป็น protectants หรือกรองหลายเอยูรเว-
พยายาม อย่างไรก็ตาม เท่านั้นจำนวนจำกัดสาร
ได้ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อป้องกัน UV -มี radia-
สเตรชัน ดังนั้น วัตถุประสงค์ของเราคือการ
ระบุศักยภาพกรองรังสียูวีเอ compound(s) จาก
เปลือกของ Thanakha (H. crenulata L.) แม้ว่าธาร-
der รับจากนกชนิดนี้ได้รับการประเพณี
ใช้ในการกรอง UV เครื่องสำอางในประเทศพม่า การใช้งาน
ส่วนผสมมีไม่ถูกตรวจสอบอย่างกว้างขวาง.
เราแยกเนื้อเยื่อเปลือก (600 กรัม) ด้วย
เมทานอลและคลอโรฟอร์ม (1:1, 5 Lx3) หลังจาก evapora-
* Correspondingauthor โทรสาร 82-2-820-5210
[e-mail] อีเมล
163
สเตรชัน g 14 ของสารสกัดไม่บริสุทธิ์ โดยเจล
chromatography eluted stepwise ด้วยคลอโรฟอร์ม
ประกอบด้วย 0, 1, 2 3, 4, 5, 10 และ 100% เมทานอล
(เมอร์ค F254) ใน TLC พัฒนาสง 40:1
คลอโรฟอร์มและเมทานอล เศษเหล่านั้น eluted
1% เมทานอลพบว่าจุดแข็งเรืองแสง
ภายใต้รัศมี UV ที่ 365 nm หลัง 3.7
g ส่วนรวม และอยู่ภายใต้การวินาทีแบบ
ond chromatography ซิลิก้าเจล eluted กับผสม 1:1 ~
ture ของเฮกเซนเอทิล acetate ภายใต้เดียวกัน
การวิเคราะห์ TLC เงื่อนไข จุดที่ Rf 0.18 จัดแสดง
fluorescence แข็งแกร่ง เศษส่วนที่ประกอบด้วยการ
หลักใช้งานได้อีกรวม และเพิ่มเติมปู-
ฟองผ่าน HPLC ขั้นตอนย้อนกลับ (น้ำ, ~ Bondapak
C18, 20xl 50 มม.) โดย eluting ให้ด้วย 30% acetoni-
trile ที่อัตราการไหลของ 5 mL นาที- ~ พีคจับ
ที่ 13.3 นาทีถูก แล้วแห้งตกผลึกในเมธา-
nol จากนี้ เราเคยได้รับเข็มเหมือน
ผลึกของสารประกอบใช้งานอยู่ (8 มิลลิกรัม) ที่อาจ
ใช้ในวิเคราะห์บรรเลง struc-
ture ของสารประกอบนี้
บวก และลบ MS FAB แส (JMS
AX505WA MS สเปกโตรมิเตอร์ แรงดันไฟฟ้าอิเล็กตรอน: 70 eV,
เมทริกซ์: meta nitrobenzyl แอลกอฮอล์) เปิดเผย promi แบบ
ไอออน nent แท้ [M H] และ [M H] ที่ m/z 245 และ 247
ตามลำดับ ซึ่งระบุที่น้ำหนักโมเลกุล
บริเวณเป็น 246 ในความสูงบวก
FAB-MS ไอออนมีการแสดง [M H] ใน m/z
247.0965 มีสูตรโมเลกุลเป็น C14H1 ~ O4 (cal-
น้ำหนักโมเลกุล culated: 247.0971) ดังนั้น การ
สูตรโมเลกุลของสารประกอบใช้งานอยู่

164
100-
90-
80 Z
70-
60-
~
5O
59
Joo et al.
J. พืช Biol. ปี 47 หมายเลข 2, 2004
112.97, 125.33, 155.94, 161.73 และ 163.50 repre-
carbons sented ไม่ใช่-protonated ดังนั้น เพิ่มสำหรับ-
mula HO4 เป็นความคิดที่เป็นไฮดรอกซิลและสาม
เดี่ยวออกซิเจนกลุ่ม รวมถึง ester(s) / carbo-
nyl(s) ดูดซึมที่ 8 71.77 ระบุที่
ไฮดรอกซิลกับคาร์บอน protonated ไม่ สอง
methyl สัญญาณจาก 300 MHz 1H NMR พบ
เป็น singlets ที่ 5 1.146 1.279 ซึ่งทั้งสองมี
ลงเปลี่ยน โดยไฮดรอกซิล ตามนี้ เราก็สามารถ
เพื่อยืนยันว่า เป็น hydroxy-methylethyl (เช่น ตติย
แอลกอฮอล์) กลุ่มอยู่ในโครงสร้าง สัญญาณ 8
112.97 และ NMR 125.33 ใน 13C สามารถกำหนดได้สำหรับ
methines สองในแหวนหอม แสดงที่
6.632 และ 7.129 ได้ singlets ใน 1 H NMR แสดง
carbons สี่ในแหวนหอมจะแทน
และ methines ทั้งสองจะแยกออก
ของ carbons olefinic จาก absorptions
5 115.94 และ 161.73 ใน ~ 3C NMR พบเป็น
doublets (J = 9.3 Hz) 6 6.109 และ 7.501 ใน ~ H NMR นั้น
Furthermore กะเคมีของ olefin ในทั้ง 3C ~
และ ~ H NMR ได้เหมือนกับผู้ที่มาจากลาสเว-
มารีโน สารประกอบที่มี lactone ด้วย vicinal
พันธะคู่ในโครงสร้างวงแหวน (ชาร์ลส์และ Jacqlynn,
1993) เนื่องจากสถานะของแหวนหอม เรา
เชื่อว่า บริเวณนี้เป็นอนุพันธ์ coumarin ใน
สัญญาณสำหรับเมทิลีนไดที่ $ 3125 (2H, dd, J = 8.7, 7.2
Hz) ควบใน 1 H NMR ที่คู่กับการ methine ที่
8 4.651 (H, dd, J = 8.7, 8.4 Hz), บ่งบอกที่ addi มี-
tional CH2 CH โครงสร้างเกี่ยวข้องกับในสารประกอบ
[M]
246
~ 4o
30-
20
10
131
159
ฉัน
160
213
ฉัน ฉัน II.i, J,
60
80
100
120
140
160
180
200
มวลค่า
,, 7
220
240
260
(m/z)
1 รูป สเปกตรัม MS (JWS AX505 โดยรวมสเปกโตรมิเตอร์,
ทางเข้าของโดยตรง เอล การ 70 eV) ของ marmesin, UV-A-ดูด com แบบ
ปอนด์จากเปลือก Thanakha.
กำหนด C14H1404.
ใน MS เอลโดยตรง (70 eV), ไอออนโมเลกุลยังมี
ใน z m 246 (Fig. 1) ประจุโดดเด่นเนื่องจาก fis-
sions ไฮดรอกซิลและ methyls ที่ m/z 228 เอท [M-20],
213 [M-เอท 20-CH ~] แท้และ 187 [M-H-เอท 20-2CH3]
แสดง แนะนำที่ ประกอบด้วยโครงสร้างที่เธอเป็น-
moiety แอลกอฮอล์ tiary นอกจากนี้ ของไอออน
ที่ m/z 77 ระบุว่า แหวนตัวหอมอยู่ (ภาษาศาสตร์-
verstein et al., 1991) .
300 MHz ~ 3C NMR อร่อย ๆ เปิดเผยที่สัญญาณ 8
24.38 และ 26.13 ถูกสำหรับ methyls ที่ 29.55 สำหรับการ
เมทิลีนได และที่ 91.32, 98.09, 112.45, 123.63,
และ 143.94 สำหรับ methines (ตารางที่ 1) สัญญาณที่ ~ 71.77,
1 ตาราง ~ 3Cand ~ H NMR (สเปกโตรมิเตอร์เมถุนแล้วแต่กำหนด 2000
300 MHz) ข้อมูล (CDCI ~, & ppm จาก trimethylsilane) สำหรับ
marmesin.
13C ~ H
แหวนโซ่ structure
C-2
C-3
C-4
C-4a
C-5
C-6
C-7
C-8
C-8a
C-2
C-3
Side
C 1
C 2
หรือ C-3
161.73
112.45
143.94
112.97
123.63
125.33
163.50
98.09
155.94
91.32
29.55
71.77
24.38
หรือ 26.13
7.501 d
(J = 9.3)
6.109 s
(J = 9.3)
6.632 s
2 "
โฮจิมินห์
" ฉัน 1
5
~,
~
2
8
'O o -o
2 รูป โครงสร้างของ marmesin
3k
2
'~
7.129 s
4.651 dd
(/ = 8.7, 8.4)
3.125 dd
(J = 8.7, 7.2)
200
220
240
~ .maxi335 nm
ฉัน
260
ฉัน
280
ฉัน
300
ฉัน
320
ฉัน
340
ฉัน
360
คลื่นยาว (nm)
1.146 s
หรือ 1.279 s
3 รูป สเปกตรัมดูดซึม UV (Beckman ดู 650 ใน
เอทานอล) ของ marmesin.

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

Journal of the โรงงานชีววิทยา,มิถุนายน 2004 , 47 ( 2 ): 163-165

รายงานดูดซับรังสี UV , marmesin ,จากเปลือกของ thanakha ,

hesperethusa crenulata แอล se-hwan และ Joo , sang-cheol Lee ,และ seong-ki Kim *
กรมวิทยาศาสตร์ของชีวิต, chung-ang University , seou 1156 - 756 ,เกาหลีใต้
ซึ่งจะช่วยเราใช้ตัวทำละลาย(, SIO 2 คอลัมน์ chromatographies ,และ hplc เพื่อตรวจหาสาเหตุจากเปลือกของ thanakha (โน -
perethusa crenulata L .)ผสมคริสตัลสใช้ทำงานได้สำหรับการดูดซับแรงกระแทกรังสี UV - A ( 320 ถึง 380 nm ) การวิเคราะห์ต่ำ -
และความละเอียดสูง Mine Market Users ประเทศอินโดนีเซียเยี่ยมชม - MS เปิดเผยผสมที่มีชื่อว่า marmesin ด้วยสูตรของ C 14 ชั่วโมง 1404 และระดับโมเลกุล
มวลชนที่ 246 ในการกำหนดโครงสร้างทางเคมีของเราจัดให้บริการ 300 mmz nmr วิเคราะห์โดยใช้การตรวจสอบต่างๆ 1 ชั่วโมง
13 c และ 13 c .แผนก ข้อมูล nmr ของเราแสดงให้เห็นโครงสร้างของ 2,3 - dihydro 2 ( 1 - hydroxy1 - methylethyl ) - furanocoumarin . เหตุการณ์ผสมใช้งานนี้
ประกอบด้วย chromophores UV - การดูดซับแรงกระแทกเรียกเข้าหอมที่พันธบัตรดับเบิลคลิกที่ C 3 - C 4 และ carbonyl ที่
C 2 (~~~คือม. 335 RIM เพื่อแสดงว่า marmesin สามารถจำหน่ายเป็น ผลิตภัณฑ์ จากธรรมชาติมีประโยชน์ UV - a - การกรองที่.
คีย์เวิร์ด marmesin thanakha ( hesperethusa crenulata แอล) UV - a - ดูดซับแสงกลางวัน
ตามมาตรฐานทางธรรมชาติประกอบด้วยความยาวคลื่นที่ใช้ vanous ของ
รังสีรวมถึง UV (แสงอัลตร้าไวโอเล็ต)พร้อมด้วยที่วิ่ง~ของ
200 ถึง 380 นิวตันเมตร สัญญาณไฟแสดง UV ยังสามารถถูกแบ่งย่อย
ใน UV - C ( 200 ถึง 280 นาโนเมตร) UWB ( 280 ถึง 320 นาโนเมตร)
และ UV - A ( 320 ถึง 380 nm )( cockell 1998 ) ใน eral Gen -
UV - C จะดูดซึมบรรยากาศโอโซน
ชั้นในขณะที่ UV - B และ UV - A จะสามารถเจาะเข้าสู่ที่
ชั้นโอโซนและการเข้าถึงโลก ความเสี่ยงมากเกินไป
การแผ่รังสี UV - B และ UV - A สามารถมีพวง
ส่งผลต่อมนุษย์รวมถึงผิวไหม้จากแสงแดดและแสงแดด -
เกิดความชำรุดเสียหายผิว, cataracts ,หิมะตาบอด,ผิวเป็นมะเร็ง,
และระบบ ภูมิคุ้มกัน ของร่างกายขาด(เดอร์ leun ,
1996 ; duthie et al ., 1999 ;เหยี่ยว, 1999 ; hockwin เอ็ด
AL , 1999 ) การให้ความคุ้มครองจากความเสียหาย UV - b
สินค้าจำนวนมากได้รับการพัฒนาโดยการแยกสารประกอบ
ซึ่งจะช่วยเปิดใช้งานจากแหล่งธรรมชาติและ
ผ่านการสังเคราะห์ทางเคมี เหล่านี้จะใช้ในขณะนี้
ตามมาตรฐานและจำหน่ายแผ่นกรองหรือ protectants ในจะพยายามสินธุ -
จำนวนมาก. แต่ถึงอย่างไรก็ตามมีเพียงจำนวนจำกัด(มหาชน)ของสารประกอบ
ได้รับการพัฒนาขึ้นมาเพื่อป้องกันการ UV - a radia -
ดังนั้นเป้าหมายของการศึกษาของเราคือการ
ระบุมี ศักยภาพ UV ที่กรองผสม( S )จากเปลือก
ของ thanakha ( H . crenulata L .) แม้ว่าเชลยศึก -
เดอร์ได้รับจากสายพันธุ์นี้ได้รับการตอบแทน
ตามแบบดั้งเดิมใช้ในเครื่องสำอาง UV - การกรองใน สหภาพ พม่าใช้งาน
ส่วนผสมของบริษัทไม่ได้รับการพิจารณาอย่างกว้างขวาง.
เราถูกแยกออกมาเนื้อเยื่อเปลือกไม้( 600 กรัม)พร้อมด้วยการผสมผสานของ
โรงงานเมธานอลและยุคต้นๆ( 1 : 15 LX 3 ) หลังจาก evapora-
* correspondingauthor ;โทรสาร: 82-2-820-5210
e - mail 163 [e-mail]

การ, 14 G ของที่กรองแล้วโดยแยกเป็นซิลิกาเจล
chromatography eluted stepwise ยุคต้นๆด้วย
ประกอบด้วย 0 , 1 , 23 , 4 , 5 , 10 และ 100% โรงงานเมธานอล.
ใน tlc ( merck F 254 )พัฒนาขึ้นมาโดยที่ 40 : 1 ส่วนผสม
ในยุคต้นๆและโรงงานเมธานอล,ผู้ที่เพียงเศษเสี้ยววินาที eluted
พร้อมด้วย 1% โรงงานเมธานอลแสดงให้เห็นแรงฟลูออเรสเซนต์จุด
อยู่ ภายใต้ แสง UV ที่ 365 นิวตันเมตร หลังจากนั้นเพียงเศษเสี้ยววินาที 3.7
G ที่มีรวมกันและต้องตกอยู่ในก.ล.ต. chromatography -
ond ซิลิกาเจลที่ eluted พร้อมด้วย 1 : 1 , a ~~ผสมให้เข้ากันจะมองที่ของสารอะซีเตท solvent production unit และเอทิล ตามที่เดียวกัน
ตามมาตรฐานเงื่อนไขการวิเคราะห์ tlc จุดให้บริการคลื่นความถี่วิทยุ( RF )ที่ 0.18 แสดงคุณสมบัติฟลูเรซ - เซ็นซ
ซึ่งจะช่วยได้มากที่สุด เพียงเศษเสี้ยววินาทีที่ใช้งานหลักการ
ซึ่งจะช่วยได้อีกครั้งรวมกันและเพิ่มเติม Puri -
fied ผ่านสลับเฟส hplc (น้ำ,~ bondapak
C 18 , 20 ขนาด XL 50 มม.)โดย eluting ด้วย 30% acetoni -
trile ที่อัตราการไหลของ 5 มล.นาที - ~. สูงสุดที่จับ
ที่ 13.3 นาทีก็แห้งและรูปธรรมใน NOL หรือเอฟทีเอ -
แล้ว จากโรงแรมแห่งนี้เราสามารถที่จะได้รับเข็ม - เหมือนกับคริสตัล
ซึ่งจะช่วยให้การใช้งานวัสดุ( 8 มก.)ที่จะเป็น
ซึ่งจะช่วยนำไปใช้ในอินสทรูเมนทัลวิเคราะห์เพื่อกำหนด struc -
จะมองของนี้ผสม.
ในทางบวกและทางลบความละเอียดต่ำ Mine Market Users ประเทศอินโดนีเซียเยี่ยมชม - มิลลิวินาที( JMS ไม่ทำงาน
AX 505 หว้า MS ควอดรูเปิลแมสสเปคโต,อิเลคตรอนแรงดันไฟฟ้า: 70 EV ,
Matrix Storage :เมตา - nitrobenzyl แอลกอฮอล์)เปิดเผยที่ promi -
nent ไอออนสำหรับ[ชั่วโมง]§และ[ม. - ชม.]ที่ม./ z 247 และ 245 ,
ตามลำดับ.โรงแรมแห่งนี้แสดงว่าน้ำหนักระดับโมเลกุลของสาร
ซึ่งจะช่วยได้คือ 246 ในเชิงบวกความละเอียดสูง
Mine Market Users ประเทศอินโดนีเซียเยี่ยมชม - MS ไอออนสำหรับ[ชั่วโมง]§ตรวจพบที่ม./ z
247.0965 มีสูตรระดับโมเลกุลของ C 14 H 1 ~ o 4 (น้ำหนักโมเลกุล CAL -
culated 247.0971 ) ดังนั้นสูตรระดับโมเลกุลของ
ซึ่งจะช่วยผสมใช้งานที่เป็น


164100 -
90 -

80 Z 70 -
60 -
~

o 559
และ Joo et al .
j . โรงงานผลิต biol . vol . 47 ฉบับที่ 2 ปี 2004
112.97 125.33 155.94 161.73และ 163.50 repre -
sented ไม่ใช่ - protonated carbons ดังนั้นสำหรับ -
mula ของ HO 4 นั้นคิดว่าเป็น hydroxyl และสาม
กลุ่มออกซิเจนเดียวรวมถึง Ester ( s )และ/หรือ carbo -
nyl ( S ) ระบบดูดซับแรงสั่นสะเทือนที่ 8 71.77 ระบุว่า
hydroxyl ที่ติดอยู่กับผงถ่านกัมมันต์แบบไม่ protonated ที่ ทั้งสองสัญญาณ
Methyl จาก nmr 300 MHz 1 ชั่วโมงจะถูกตรวจจับ
เป็นเสื้อกีฬาที่ 5 1.146 และ 1.279 ซึ่งทั้งคู่ได้ถูก
ลง - หันมาโดย hydroxyl ได้. จากนี้เราก็สามารถ
ซึ่งจะช่วยในการยืนยันว่ามีกลุ่ม hydroxy - methylethyl (เช่นขั้น
แอลกอฮอล์)ที่มีอยู่ในโครงสร้าง สัญญาณที่ 8
112.97 125.33 และใน 13 c nmr ก็สามารถกำหนดได้สำหรับ
สอง methines ในเสียงเรียกเข้ากลิ่นหอม ผู้ที่แสดงที่
6.632 และ 7.129 เป็นเสื้อกีฬาใน 1 ชั่วโมง nmr แสดง
ที่สี่ carbons ในกลิ่นหอมที่เรียกเข้ามาแทนได้มี
และที่สอง methines เป็นแบบแยกออกจากกัน.
ที่มีอยู่ของ olefinic carbons เนื่องจาก absorptions
ที่ 5 115.94 และ 161.73 ใน~ 3 C nmr ตรวจพบว่าเป็น
ทวีคูณ( J = 9.3 Hz )ที่ 6 6.109 และ 7.501 ใน~ H nmr .
ยิ่งไปกว่านั้น,เคมีกะของบมจ.ไทยโอเลฟินส์ในทั้งสอง~ 3 C
และ~ H nmr เป็นเหมือนกับผู้ที่ได้รับจาก COU -
Marin ,ที่ผสมที่มี lactone ด้วย vicinal
พันธบัตรแบบเตียงนอนเดี่ยวขนาดใหญ่หนึ่งเตียงในโครงสร้างเรียกเข้า( Charles และ jacqlynn
1993 ) เนื่องจากการเรียกเข้ากลิ่นหอมเรา
เชื่อว่าผสมนี้เป็น coumarin หรืองานที่ดัดแปลงจาก
ซึ่งจะช่วยให้สัญญาณสำหรับบิสพีนอที่$ 3.125 ( 2 ชั่วโมง, DD , J = 8.7 , 7.2
Hz )ใน 1 ชั่วโมง nmr ก็ประกอบด้วยว่าสำหรับที่ methine ที่
8 4.651 (สูง, DD , J = 8.7 , 8.4 Hz ),ระบุว่าที่ addi -
tional CH 2 - CH - โครงสร้างมีส่วนร่วมในที่ผสม.

][ม. 246 (~~ 4 o
30 - 20

10

159131 I


213
160 ..ฉัน,ฉัน II , J , N 60 N 80

120100140


180160200


ซึ่งจะช่วยชาร์จขนาดใหญ่" 7
220

240260
(ม./ z )
รูปที่ 1 . มิลลิวินาที spectrum ( jws AX 505 ควอดรูเปิลแมสสเปคโต,
โดยตรงทางลมเข้า, El , 70 EV )ของ marmesin , UV - a - การดูดซับแรงกระแทก COM -
ปอนด์จาก thanakha เปลือก.
ว่าเป็น C 14 h1404 .
ในตรง El มิลลิวินาที( 70 EV ),ที่ระดับโมเลกุลไอออนและยังเป็น
ตรวจพบที่ม./ z 246 (รูปที่ 1 ) เพิ่มพลังไอออนอย่างชัดเจนเนื่องจาก FIS -
sions ของ methyls และ hydroxyl ที่ม./ z 228 [ม. - H 20 ]
213 [ม. - H 20 - ch , a ~]§และ 187 [ม. - H - H 20-2 CH 3 ]ได้แสดงไว้แนะนำว่าโครงสร้างที่มีแอลกอฮอล์เจ้าหญิงคงไม่มาร่วมชมศิลปวัตถุ -

ซึ่งจะช่วย tiary ยัง ยิ่งไปกว่านั้นการที่มีไอออน
ที่ม./ z 77 ระบุว่าที่มีกลิ่นหอมเรียกเข้า(ลักษณะสีเขียวมรกต -
verstein et al ., 1991 )..
300 MHz ~ 3 C แผนก nmr เปิดเผยว่าสัญญาณที่ 8
24.38 และ 26.13 เป็น methyls ;ที่ 29.55 สำหรับ
บิสพีนอและที่ 91.32 98.09 112.45 123.63 n และ 143.94 สำหรับ methines (ตารางที่ 1 ) สัญญาณที่~ 71.77
ตารางที่ 1 . (~~~ 3 เทียบ H nmr ( varian Gemini 2000 ควอดรูเปิลแมสสเปคโต
300 MHz )ข้อมูล( cdci ~,& ppm จาก trimethylsilane )สำหรับ
marmesin .
13 c ~ H

เรียกเข้าโครงสร้าง C 2

C - 3 C - 4

c - 4 C 5 c - 6

c - 7 C 8

c 8

C 2 C - 3
ทางด้านสาย

C 1 C 2
หรือ C - 3

112.45 161.73 143.94


112.97 123.63 125.33


163.50 155.94 98.09


29.55 91.32


71.77 24.38 หรือ 26.13 D

7.501 ( J = 9.3 )

6.109% s ( J = 9.3 )

6.632% s 2 "

ซึ่งจะช่วย Ho " 1 i

(~~ 5 ,~~~ 2

o 8 o - O
รูปที่ 2 . โครงสร้างของ marmesin .

3 K 2
'~
7.129% s

4.651 DD (/= 8.7 , 8.4 )

ซึ่งจะช่วย 3.125 DD ( J = 8.7 , 7.2 )

220 ~ 200240 ~~. Maxi Safari รายการ 335 nm

ซึ่งจะช่วยผม 260

280
ฉันฉัน

300 I
320

340
ผมผม

ความยาวคลื่น: 360 (,)

1.146% s หรือ S 1.279
รูปที่ 3 . UV ดูดซับ spectrum ( Beckman du 650 ใน
เอทานอล)ของ marmesin .