In order to validate the pathogen f

In order to validate the pathogen free status in shrimp, six individuals
were sampled and examined for bacterial and viral
infection. For bacteria isolation, the surface of shrimp was sterilized
with 70% alcohol. Shrimp hemolymph was withdrawn with sterilized
syringe and streaked onto tryptic soy agar (ST) supplementedwith 2% NaCl and thiosulphate-citrate-bile salt-sucrose agar (TCBS).
The shrimp was then cut aseptically. The tissues from hepatopancreas
and heart were collected with a sterilized loop and streaked
onto ST and TCBS plates. All samples were incubated at 28 C for
24e48 h and bacterial colonies were examined. For viral infection
diagnosis,WSSV was checked by universal PCR using primers listed
in Table 1 [30]. DNA extraction from whole body tissues was performed
as described by Jang et al. (2009) and PCR amplificationwas
conducted as follows: 95 C for 3 min; 35 cycles of 95 C for 30 s,
57 C for 45 s, and 72 C for 1 min; followed by 72 C for 10 min. The
PCR products were checked by electrophoresis on a 1.5% agarose
gel.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เพื่อตรวจสอบสถานะการศึกษาฟรีในกุ้ง บุคคล 6ตัวอย่าง และกล่าวถึงสำหรับแบคทีเรีย และไวรัสติดเชื้อ การแยกแบคทีเรีย พื้นผิวของกุ้ง sterilizedด้วยแอลกอฮอล์ 70% กุ้ง hemolymph ถูกถอนกับ sterilizedเข็ม และลายบน supplementedwith agar (เซนต์) ถั่วเหลือง tryptic % NaCl และ agar ซูโครสเกลือน้ำดี thiosulphate ซิเตรต (TCBS) 2กุ้งถูกตัดแล้ว aseptically เนื้อเยื่อจาก hepatopancreasและรวบรวมคล้อง sterilized และลายหัวใจบนแผ่นเซนต์และ TCBS ตัวอย่างทั้งหมดถูก incubated ที่ C 28 สำหรับ24e48 h และแบคทีเรียอาณานิคมถูกตรวจสอบ การติดเชื้อไวรัสมีการตรวจสอบการวินิจฉัย การตรวจ โดย PCR ที่ใช้ไพรเมอร์ที่อยู่สากลในตาราง 1 [30] ทำการสกัดดีเอ็นเอจากเนื้อเยื่อของร่างกายทั้งหมดเป็นอธิบาย โดยแจง et al. (2009) และ PCR amplificationwasดำเนินการดังนี้: C 95 ใน 3 นาที รอบ 35 ของ 95 C สำหรับ 30 s57 C 45 s และ 72 C สำหรับ 1 นาที ตาม ด้วย C 72 สำหรับ 10 นาทีมีการตรวจสอบผลิตภัณฑ์ PCR โดย electrophoresis ใน agarose 1.5%เจ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อที่จะตรวจสอบสถานะเชื้อโรคฟรีกุ้งหกคนถูกเก็บตัวอย่างและตรวจสอบสำหรับแบคทีเรียและไวรัสติดเชื้อ การแยกเชื้อแบคทีเรียที่พื้นผิวของกุ้งได้รับการฆ่าเชื้อด้วยแอลกอฮอล์ 70% เลือดกุ้งถูกถอนผ่านการฆ่าเชื้อด้วยเข็มฉีดยาและลายลงบนถั่วเหลือง tryptic วุ้น (ST) supplementedwith 2% โซเดียมคลอไรด์และไซโอ-citrate-วุ้นน้ำดีเกลือน้ำตาลซูโครส (TCBS). กุ้งจากนั้นก็ตัดปลอดเชื้อ เนื้อเยื่อจากตับและหัวใจที่ถูกเก็บรวบรวมพร้อมห่วงฆ่าเชื้อและลายลงบนST และแผ่น TCBS ตัวอย่างทั้งหมดได้รับการบ่มที่ 28 องศาเซลเซียสสำหรับ24e48 ชั่วโมงและแบคทีเรียที่มีการตรวจสอบ สำหรับการติดเชื้อไวรัสโรคตัวแดงดวงขาวได้รับการตรวจสอบโดยวิธี PCR สากลโดยใช้ไพรเมอร์ที่ระบุไว้ในตารางที่ 1 [30] การสกัดดีเอ็นเอจากเนื้อเยื่อร่างกายได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดยจาง et al, (2009) และ PCR amplificationwas ดำเนินการดังต่อไปนี้: 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 นาที; 35 รอบจาก 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที? 57 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 45 วินาทีและ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาที?; ตามด้วย 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ได้รับการตรวจสอบโดย electrophoresis บน 1.5% agarose เจล