3.1. Detection of RVs-D by PAGE and

3.1. Detection of RVs-D by PAGE and RT-PCR Of a total of 30 pools of fecal samples examined by PAGE, nine
(30%) were positive, displaying typical avian migration patterns (5:2:2:2). These results were consistent with those related to RVs-D (Fig. 1a). The same 30 pools were subjected subsequently to RT-PCR assay to VP6 gene showing that 16 samples (53%) were positive for RVs-D, each generating a fragment of 742 bp as shown in Fig. 1b. The primers used did not yield positive results in nine (control) samples known to be RVs-D negative, although positive for other enteric viruses, such as rotavirus group A (one sample), picobirnavirus (two
samples), reovirus (two samples), rotavirus group A and picobirnavirus (one sample), reovirus and picobirnavirus (three samples). The sensitivity of the method was demonstrated by amplification following serial 10-fold dilutions up to 10−5 with a limit of detection which was equivalent to 5 × 10−4 ng/L (0.5 pg/L) (Fig. 2). The comparison of the results obtained by PAGE (9/30) and RT-PCR (16/30) suggested good reproducibility (kappa = 0.5, p = 0.0004) and in comparing the two techniques, the screening test had a sensitivity of 100% for RT-PCR and the sensitivity of the PAGE was of 56.3%.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.1. การตรวจสอบของ RVs-D โดยหน้าและ RT-PCR ของยอดรวมสระ 30 ตัวอย่างอุจจาระตรวจหน้า เก้า(30%) ที่แสดงรูปแบบทั่วไปการย้ายนก (5:2:2:2) ดีมาก ผลลัพธ์เหล่านี้ได้สอดคล้องกับที่เกี่ยวข้องกับ RVs-D (รูปที่ 1a) สระว่ายน้ำ 30 เดียวถูกมา RT-PCR assay การยีน vp6 มันแสดงตัวอย่างที่ 16 (53%) ที่ดีสำหรับ D RVs สร้างแต่ละส่วนของ 742 มาก bp ดังแสดงในรูป 1b ไพรเมอร์ที่ใช้ทำให้ผลบวกในเก้า (ควบคุม) อย่างที่รู้จักกัน picobirnavirus ลบ ถึงแม้ว่าเป็นบวกสำหรับไวรัสลำไส้อื่น ๆ เช่นโรตาไวรัสกลุ่ม (หนึ่งในตัวอย่าง), RVs-D (สองตัวอย่าง), reovirus (สองตัว), โรตาไวรัสกลุ่ม A และ picobirnavirus (หนึ่งในตัวอย่าง), reovirus และ picobirnavirus (สามตัวอย่าง) ความไวของวิธีการก็แสดงให้เห็น โดยขยายต่ออนุกรม 10-fold เจือจางได้ถึง 10−5 ด้วยข้อจำกัดของการตรวจสอบเทียบเท่ากับ 5 × 10−4 ng / L (0.5 pg / L) (2 รูป) เปรียบเทียบผลที่ได้รับจากหน้า (9/30) และ RT-PCR (16/30) แนะนำแสดงดี (kappa = 0.5, p = 0.0004) และเปรียบเทียบเทคนิคที่สอง การทดสอบการตรวจมีความไว 100% สำหรับ RT-PCR และความไวของหน้า 56.3%

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.1 การตรวจหา RVs-D ตามหน้าและ RT-PCR จากทั้งหมด 30 สระว่ายน้ำของตัวอย่างอุจจาระตรวจสอบตามหน้าของเก้า
(30%) เป็นบวกแสดงโดยทั่วไปรูปแบบการโยกย้ายนก (5: 2: 2: 2) ผลลัพธ์เหล่านี้มีความสอดคล้องกับผู้ที่เกี่ยวข้องกับ RVs-D (รูป. 1A) เช่นเดียวกับสระว่ายน้ำ 30 ถูกยัดเยียดต่อมา RT-PCR ทดสอบเพื่อ VP6 ยีนแสดงให้เห็นว่า 16 ตัวอย่าง (53%) เป็นบวกสำหรับ RVs-D แต่ละส่วนของการสร้าง 742 bp ดังแสดงในรูปที่ 1b ไพรเมอร์ที่ใช้ไม่ได้ผลผลในเชิงบวกในเก้า (Control) ตัวอย่างที่รู้จักกันเป็น RVs-D เชิงลบแม้ว่าในเชิงบวกสำหรับไวรัสลำไส้อื่น ๆ เช่นโรตาไวรัสกลุ่ม A (ตัวอย่างหนึ่ง) picobirnavirus (สอง
ตัวอย่าง) reovirus (สองตัวอย่าง) กลุ่มโรตาไวรัส A และ picobirnavirus (ตัวอย่างหนึ่ง) reovirus และ picobirnavirus (สามตัวอย่าง) ความไวของวิธีการที่ได้รับการแสดงให้เห็นถึงการขยายต่อไปอนุกรมเจือจาง 10 เท่าขึ้นไป 10-5 กับขีด จำกัด ของการตรวจสอบซึ่งเทียบเท่ากับ 5 × 10-4 ng /? L (0.5 PG /? L) (รูป. 2) . การเปรียบเทียบผลที่ได้ตามหน้า (9/30) และ RT-PCR (16/30) ปัญหาการทำสำเนาที่ดี (Kappa = 0.5, p = 0.0004) และเปรียบเทียบทั้งสองเทคนิคการตรวจคัดกรองมีความไว 100% สำหรับ RT-PCR และความไวของหน้าเป็น 56.3%