Alamar Blue monitors the reducing e

Alamar Blue monitors the reducing environment of the living cell. The active ingredient is resazurin (IUPAC name: 7-hydroxy-10-oxidophenoxazin-10-ium-3-one), also known as diazo-resorcinol, azoresorcin, resazoin, resazurine, which is water-soluble, stable in culture medium, is non-toxic and permeable through cell membranes. Continuous monitoring of cells in culture is therefore permitted.Resazurin was first used to assess bacterial or yeast contamination in milk by Pesch and Simmert in 1929. It is a blue non-fluorescent dye that is reduced to the pink-colored, highly fluorescent resorufin. Resazurin solution is highly dichromatic based on Kreft’s dichromaticity index (DI) [29].The dye acts as an intermediate electron acceptor in the electron transport chain without interference of the normal transfer of electrons [9]. The oxidation-reduction potential of Alamar Blue is +380 mV at pH 7.0, 25 °C. Alamar Blue, therefore, can be reduced by NADPH (Eo = 320 mV), FADH (Eo = 220 mV), FMNH (Eo = 210 mV), NADH (Eo = 320 mV), as well as the cytochromes (Eo = 290 mV to +80 mV). As the indicator dye accepts electrons, it changes from the oxidized, non-fluorescent, blue state to the reduced, fluorescent, pink state [9]. In addition to mitochondrial reductases, other enzymes (such as the diaphorases (EC 1.8.1.4, dihydrolipoamine dehydrogenase [30]), NAD(P)H:quinone oxidoreductase (EC 1.6.99.2) [31] and flavin reductase (EC 1.6.99.1) [32] located in the cytoplasm and the mitochondria may be able to reduce Alamar Blue. Hence, Alamar Blue reduction may signify an impairment of cellular metabolism and is not necessarily specific to interruption of electron transport and mitochondrial dysfunction [33]. This change from oxidized to reduced state allows flexibility of detection where measurements can be quantitative as colorimetric and/or fluorometric readings (the latter being more sensitive) or qualitative as a visible change in color indicating presence or absence of viable cells. Spectrophotometric absorbance is taken at two wavelengths (570 and 600 nm or 540 and 630 nm, although other filters can be used with a correction factor to be incorporated in calculations).Absorbance values will vary according to microtiter plate (flat-bottomed or rounded and manufacturer).Fluorescence signals are measured at an excitation wavelength at 530–560 nm and an emission wavelength at 590 nm.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สีฟ้า Alamar ตรวจสอบสภาพแวดล้อมการลดลงของเซลล์ชีวิต ฤทธิ์เป็น resazurin (ชื่อยิ่ง ๆ: 7-hydroxy-10-oxidophenoxazin-10-ium-3-one), ยังรู้จัก diazo resorcinol, azoresorcin, resazoin, resazurine ซึ่งเป็นมั่นคงในวัฒนธรรม ละลายน้ำ เป็นพิษ และได้ผ่านเยื่อหุ้มเซลล์ จึงได้ตรวจสอบอย่างต่อเนื่องของเซลล์ในวัฒนธรรม Resazurin ครั้งแรกนี้ใช้ในการประเมินการปนเปื้อนแบคทีเรียหรือยีสต์ในนม Pesch และ Simmert ในปีพ.ศ. 2472 ย้อมไม่เรืองแสงสีน้ำเงินที่จะ resorufin สี หลอดฟลูออเรสเซนต์สูง ได้ โซลูชัน Resazurin เป็นต้นไม้สูงอิงดัชนี dichromaticity ของ Kreft (DI) [29] สีย้อมที่ทำหน้าที่เป็นตัวให้เป็นผู้รับระดับกลางอิเล็กตรอนในลูกโซ่ขนส่งอิเล็กตรอนโดยไม่รบกวนการโอนปกติอิเล็กตรอน [9] มีศักยภาพ oxidation-reduction Alamar น้ำเงิน + 380 mV ที่ pH 7.0, 25 องศาเซลเซียส Alamar น้ำเงิน ดังนั้น สามารถลด โดย NADPH (Eo = 320 mV), FADH (Eo = 220 mV), FMNH (Eo = 210 mV), NADH (Eo = 320 mV), ตลอดจนการ cytochromes (Eo = 290 mV ถึง + 80 mV) เป็นสีย้อมไฟรับอิเล็กตรอน มันเปลี่ยนแปลงจากสถานะออกซิไดซ์ ไม่ใช่เรืองแสง สีฟ้าสถานะลด เรืองแสง สีชมพู [9] Reductases นอกจากนี้การยล เอนไซม์อื่น ๆ (เช่น diaphorases (EC 1.8.1.4, dihydrolipoamine dehydrogenase [30]), NAD (P) H:quinone oxidoreductase (EC 1.6.99.2) [31] และ flavin reductase (EC 1.6.99.1) [32] ในพลาสซึม และไมโตคอนเดียอาจสามารถลดสีน้ำเงิน Alamar ดังนั้น น้ำเงิน Alamar ลดอาจแสดงการด้อยค่าของการเผาผลาญเซลลูลาร์ และไม่จำเป็นต้องระบุการหยุดชะงักของการขนส่งอิเล็กตรอนและความผิดปกติยล [33] เปลี่ยนแปลงจากนี้ออกซิไดซ์เพื่อลดสถานะช่วยเพิ่มความยืดหยุ่นในการตรวจจับซึ่งวัดได้เชิงปริมาณเป็นการอ่านค่าสี หรือ fluorometric (หลังที่บอบบาง) หรือเชิงคุณภาพเป็นการเปลี่ยนแปลงที่มองเห็นสีที่ระบุว่า มีหรือไม่มีเซลล์ทำงานได้ ถ่าย spectrophotometric absorbance ที่ความยาวคลื่นที่สอง (570 และ 600 nm หรือ 540 และ 630 nm แม้ว่าตัวอื่น ๆ สามารถใช้ได้กับปัจจัยแก้ไขเพื่อรวมไว้ในการคำนวณ) ค่า absorbance จะแตกต่างกันตามแผ่น microtiter (ชีวิต หรือมน และผู้ผลิต) วัดสัญญาณของสารเรืองแสงที่มีคลื่นไฟฟ้าที่ 530-560 nm และความยาวคลื่นปล่อยที่ 590 nm

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Alamar สีน้ำเงินตรวจสอบสภาพแวดล้อมการลดของเซลล์ที่มีชีวิต สารออกฤทธิ์เป็น resazurin (ชื่อ IUPAC: 7 ไฮดรอกซี-10-oxidophenoxazin-10-ium-3-หนึ่ง) ยังเป็นที่รู้จักกันในนาม Diazo-resorcinol, azoresorcin, resazoin, resazurine ซึ่งเป็นที่ละลายน้ำที่มีความเสถียรในสื่อวัฒนธรรม ไม่เป็นพิษและดูดซึมผ่านเยื่อหุ้มเซลล์ การตรวจสอบอย่างต่อเนื่องของเซลล์ในวัฒนธรรมจึง permitted.Resazurin ถูกใช้ครั้งแรกในการประเมินแบคทีเรียยีสต์หรือการปนเปื้อนในนมด้วย Pesch และ Simmert ในปี 1929 มันเป็นสีย้อมที่ไม่ใช่เรืองแสงสีน้ำเงินที่จะลดลงไปสีชมพูสี resorufin เรืองแสงสูง วิธีการแก้ปัญหาคือ Resazurin dichromatic มากขึ้นอยู่กับดัชนี dichromaticity Kreft ของ (DI) [29] ได้โดยง่ายย้อมทำหน้าที่เป็นสื่อกลางรับอิเล็กตรอนในห่วงโซ่การขนส่งอิเล็กตรอนโดยปราศจากการแทรกแซงของการถ่ายโอนปกติของอิเล็กตรอน [9] ที่มีศักยภาพออกซิเดชันลดลงของ Alamar สีฟ้าเป็น 380 mV ที่ pH 7.0, 25 ° C Alamar ฟ้าจึงจะลดลงโดย NADPH (Eo = 320 mV) FADH (Eo = 220 mV) FMNH (Eo = 210 mV) NADH (Eo = 320 mV) เช่นเดียวกับไซโตโครม (ที่ Eo = 290 mV ถึง +80 mV) เป็นสีย้อมตัวบ่งชี้ที่ยอมรับอิเล็กตรอนจะเปลี่ยนจากการออกซิไดซ์, ไม่ใช่เรืองแสงสีฟ้ารัฐจะลดลง, Fluorescent, รัฐสีชมพู [9] นอกจากนี้ในการดักยลเอนไซม์อื่น ๆ (เช่น diaphorases นี้ (EC 1.8.1.4, dihydrolipoamine dehydrogenase [30]) NAD (P) H: quinone oxidoreductase (EC 1.6.99.2) [31] และ reductase Flavin (EC 1.6 99.1) [32] ตั้งอยู่ในพลาสซึมและ mitochondria อาจจะไม่สามารถที่จะลด Alamar ฟ้า. ดังนั้นการลด Alamar ฟ้าอาจมีความหมายจากการด้อยค่าของการเผาผลาญของเซลล์และไม่จำเป็นต้องเฉพาะเจาะจงในการหยุดชะงักของการขนส่งอิเล็กตรอนและยลความผิดปกติ [3​​3]. นี้ เปลี่ยนจากการออกซิไดซ์ไปยังรัฐที่ลดลงช่วยให้ความยืดหยุ่นของการตรวจสอบที่วัดสามารถเชิงปริมาณการอ่านสีและ / หรือฟลูออโร (หลังเป็นความสำคัญมากขึ้น) หรือเชิงคุณภาพเป็นการเปลี่ยนแปลงที่มองเห็นสีบ่งบอกถึงการมีหรือไม่มีเซลล์ที่มีชีวิต. การดูดกลืนแสงสเปกถูกนำมาที่ สองความยาวคลื่น (570 และ 600 นาโนเมตรหรือ 540 และ 630 นาโนเมตรถึงแม้ว่าตัวกรองอื่น ๆ สามารถนำมาใช้กับปัจจัยการแก้ไขจะรวมอยู่ในการคำนวณ) ค่า .Absorbance จะแตกต่างกันไปตามแผ่นไมโคร (ที่ราบต่ำหรือโค้งมนและผู้ผลิต) สัญญาณ .Fluorescence วัดความยาวคลื่นกระตุ้นที่ 530-560 นาโนเมตรและความยาวคลื่นปล่อยก๊าซเรือนกระจกที่ 590 นาโนเมตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

Alamar สีฟ้าตรวจสอบลดสภาพแวดล้อมของสิ่งมีชีวิตเซลล์ ส่วนผสมที่ใช้งานเป็นรีซาซูริน ( ชื่อสากล : 7-hydroxy-10-oxidophenoxazin-10-ium-3-one ) หรือที่เรียกว่า ได โซรี azoresorcin resazoin , , , resazurine ซึ่งละลายน้ำที่มั่นคงในอาหารเพาะเลี้ยง คือไม่เป็นพิษและซึมผ่านเยื่อหุ้มเซลล์ การตรวจสอบอย่างต่อเนื่องของเซลล์ในวัฒนธรรมจึงอนุญาต รีซาซูรินแรกใช้เพื่อประเมินการปนเปื้อนแบคทีเรียหรือยีสต์ในนมด้วย และ simmert เพชใน 1929 มันไม่เรืองแสงสีฟ้าที่ลดลงเหลือสีชมพูสีสูง , หลอด resorufin . รีซาซูริน โซลูชั่น ขอ dichromatic บนพื้นฐานของ kreft dichromaticity Index ( DI ) [ 29 ] ย้อมทำหน้าที่เป็นตัวกลางอิเล็กตรอนพระนาสิกในห่วงโซ่การขนส่งอิเล็กตรอนโดยปราศจากการแทรกแซงของโอนปกติของอิเล็กตรอน [ 9 ] การออกซิเดชัน - รีดักชันศักยภาพ Alamar สีฟ้า + 380 MV ที่ pH 7.0 , 25 ° C Alamar สีฟ้าจึงจะลดลง nadph ( Eo = 320 MV ) ทั้งสอง ( Eo = 220 ( MV ) , fmnh EO = 210 MV ) แอมโมเนีย ( Eo = 320 MV ) เช่นเดียวกับไซโตโครม ( EO = 290 MV + 80 เพลง ) เป็นตัวย้อมรับอิเล็กตรอนก็จะเปลี่ยนแปลงจากการออกซิไดซ์ไม่เรืองแสงสีฟ้าสภาพการลดลง , เรืองแสง , สีชมพูสภาพ [ 9 ] นอกจากการ reductases เอนไซม์อื่น ๆ ( เช่น diaphorases ( EC 1.8.1.4 dihydrolipoamine , เนส [ 30 ] ) , NAD ( P ) H : ควิโนนอ ซิโดรีดักเทส ( EC 1.6.99.2 ) [ 31 ] และ เฟลวินเทส ( EC 1.6.99.1 ) [ 32 ] อยู่ใน cytoplasm และ mitochondria อาจลด Alamar สีฟ้า ดังนั้น , Alamar สีฟ้าจะลดลงบ่งบอกสำคัญที่แสดงในเซลล์ และไม่ใช่เฉพาะหยุดชะงักการขนส่งอิเล็กตรอนและ mitochondrial dysfunction [ 33 ] เปลี่ยนจากจากรัฐช่วยให้ความยืดหยุ่นของการลดลงที่วัดได้เชิงปริมาณ 7.4 และ / หรือ fluorometric อ่าน ( หลังถูกกระตุ้นมากขึ้น ) หรือ เชิงคุณภาพ เป็นการเปลี่ยนแปลงที่มองเห็นสี แสดงตน หรือขาดการวางเซลล์ ค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น ) ตัวสอง ( 570 600 nm หรือและ 630 นาโนเมตร ถึงแม้ว่าตัวกรองอื่น ๆสามารถใช้กับการแก้ไของค์ประกอบที่จะถูกรวมในการคำนวณ ) . ค่า ค่าจะแตกต่างกันตามไมโครเพลท ( แบน bottomed หรือมนและผู้ผลิต ) สัญญาณการเป็นวัดที่ความยาวคลื่น 530 - 560 ที่กระตุ้น nm และปล่อยความยาวคลื่นที่ 590 นาโนเมตร