The GSH and Cys contents of extract

The GSH and Cys contents of extracts were measured by the
chromatographic method developed by Winters, Zukowski, Ercal,Matthews, and Spitz (1995) to analyse c-glutamyl cycle intermediates
and modified by Demirkol et al. (2004).The supernatants prepared
for the thiol contents (250 ll for ginger, 50 ll for tomato)
were derivatised with NPM. This compound reacts with free sulfhydryl
groups to form fluorescent derivatives. Each sample was
first diluted with distilled water to make the volume up to
250 ll, and then 750 ll of NPM (1 mM in acetonitrile) were added.
The resulting solution was mixed and incubated at room temperature
for 5 min. 10 ll of 2 N HCl were added to stop the reaction.
After filtration through a 0.2 lm acrodisc, the derivatised samples
were injected onto a 5 lmC18 column in a reverse phase HPLC system.
GSH and Cys were determined concurrently since all known
monothiols form fluorescent derivatives with NPM. All determinations
were performed in triplicate (n = 3).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

GSH และ Cys เนื้อหาของสารสกัดถูกวัดโดยการวิธีพัฒนา โดยหนาว Zukowski, Ercal แมธธิวส์ ชปิทซ์ (1995) การวิเคราะห์ความต้องการตัวกลางรอบ c-กลูตามิ chromatographicและปรับเปลี่ยนโดย Demirkol et al. (2004)Supernatants ที่เตรียมไว้สำหรับ thiol (250 จะสำหรับขิง 50 จะสำหรับมะเขือเทศ)derivatised กับ NPM ได้ สารประกอบที่ทำปฏิกิริยากับ sulfhydryl ฟรีกลุ่มแบบอนุพันธ์เรืองแสง แต่ละตัวอย่างถูกก่อน ผสมกับน้ำกลั่นเพื่อทำให้ไดรฟ์ถึง250 จะ และ 750 จะของ NPM (1 mM ใน acetonitrile) เพิ่มขึ้นการแก้ปัญหาได้ถูกผสม และ incubated ที่อุณหภูมิห้องสำหรับจะคืน 10 ของ 2 N HCl ได้เพิ่มการหยุดปฏิกิริยาหลังจากกรองผ่านเป็น 0.2 lm acrodisc ตัวอย่าง derivatisedถูกฉีดลงในคอลัมน์ lmC18 5 ในระยะย้อนกลับระบบ HPLCGSH และ Cys ถูกกำหนดตั้งแต่ทั้งหมดพร้อมเรียกmonothiols เป็นอนุพันธ์เรืองแสงกับ NPM Determinations ทั้งหมดได้ดำเนินการใน triplicate (n = 3)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เนื้อหา GSH และ Cys ของสารสกัดถูกวัดโดย
วิธีโครมาพัฒนาโดยฤดูหนาว Zukowski, Ercal แมตทิวส์และ Spitz (1995) การวิเคราะห์ตัวกลางวงจร C-glutamyl
และแก้ไขโดย Demirkol และคณะ (2004) ได้โดยง่าย supernatants เตรียม
สำหรับเนื้อหา thiol (250 LL สำหรับขิง 50 LL มะเขือเทศ)
ถูก derivatised กับ NPM สารนี้ทำปฏิกิริยากับ sulfhydryl ฟรี
กลุ่มในรูปแบบอนุพันธ์เรืองแสง ตัวอย่างแต่ละคนได้
ปรับลดครั้งแรกกับน้ำกลั่นที่จะทำให้ปริมาณถึง
250 LL แล้ว 750 LL ของ NPM (1 มิลลิใน acetonitrile) ถูกเพิ่ม.
การแก้ปัญหาที่เกิดขึ้นคือการผสมและบ่มที่อุณหภูมิห้อง
เป็นเวลา 5 นาที 10 LL 2 N HCl ถูกเพิ่มเพื่อหยุดปฏิกิริยา.
หลังจากที่ผ่านการกรอง acrodisc LM 0.2 ตัวอย่าง derivatised
ถูกฉีดลงบน 5 คอลัมน์ lmC18 ในระบบขั้นตอนการกลับ HPLC.
GSH และ Cys ได้รับการพิจารณาควบคู่กันไปตั้งแต่ที่รู้จักกันทั้งหมด
monothiols รูปแบบเรืองแสง สัญญาซื้อขายล่วงหน้าที่มี NPM การตรวจวัดทั้งหมด
ได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า (n = 3)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

และสารสกัดจากเนื้อหาของ GSH ในภาวะถูกวัดโดยวิธีทางโครมาโตกราฟี
พัฒนาโดยฤดูหนาว zukowski ercal , แมทธิวส์ , และ สปิตซ์ ( 1995 ) เพื่อวิเคราะห์ c-glutamyl วัฏจักรตัวกลาง
และแก้ไขโดย demirkol et al . ( 2004 ) . supernatants เตรียม
สำหรับเนื้อหา thiol ( 250 จะให้ขิง , 50 จะมะเขือเทศ )
) derivatised กับแนว . สารนี้ทำปฏิกิริยากับ
sulfhydryl ฟรีกลุ่มรูปแบบอนุพันธ์เรืองแสง แต่ละตัวอย่างถูกเจือจางด้วยน้ำกลั่นก่อน

เพื่อให้ปริมาณถึง 250 จะแล้ว 750 จะของ NPM 1 mm ไน ) มีการเพิ่ม ส่งผลให้โซลูชั่น
ผสมบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 นาที 10
2 N HCl จะถูกเพิ่มเพื่อหยุดปฏิกิริยา
หลังจาก การกรองผ่าน acrodisc 0.2 LM , derivatised ตัวอย่าง
ฉีดไป 5 lmc18 กลับเฟส HPLC คอลัมน์ในระบบ และวิเคราะห์ภาวะ
GSH ควบคู่กันไปตั้งแต่ทั้งหมดที่รู้จักกัน
monothiols รูปแบบอนุพันธ์เรืองแสงด้วยแนว . ทั้งหมดข้างต้น
มีการปฏิบัติทั้งสามใบ ( n = 3 )