65 °C for 15 min in 0.1X SSC and 0.

65 °C for 15 min in 0.1X SSC and 0.1% SDS and then exposed
to Kodak XOMAT X-Ray film at −70 °C for 1 week.
2.5. Cloning of ERS1 promoter
Total DNA from young apple leaf was isolated according to
Dellaporta et al. (1983) and a genome walker library was
constructed using Universal genome walker kit (Clonetech). For
the isolation of ERS1 proximal promoter gene specific primers
from the 5′ region of ERS1 close to translational start site was
designed and used for PCR amplification using the genome
walker library as template. The amplified fragment was cloned
in plasmid pCR2.1-TOPO (Invitrogen, USA) and sequenced.
The search for conserved regulatory regions with other known
sequences was carried using http://www.dna.affrc.go.jp/htdocs/
PLACE/ a database of motifs found in cis-acting regulatory
DNA elements of vascular plants (Higo et al., 1999).
2.6. Statistical analysis
Each experiment was carried out under completely randomized
design with three replications repeated at least thrice. The
data were analyzed by student's unpaired t-test, and the
treatment mean values were compared at P≤0.05–0.001.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

65 ° C สำหรับ 15 นาทีใน 0.1 X SSC และ 0.1% SDS และสัมผัสแล้วให้ฟิล์มเอ็กซ์เรย์ XOMAT โกดักที่ −70 ° C สำหรับ 1 สัปดาห์2.5 การโคลนของโปรโมเตอร์ ERS1ดีเอ็นเอทั้งหมดจากใบแอปเปิ้ลหนุ่มถูกแยกตามDellaporta et al. (1983) และรีวอล์คเกอร์จีโนมสร้างโดยใช้กลุ่มสากลชุดวอล์คเกอร์ (Clonetech) สำหรับแยกของไพรเมอร์เฉพาะยีนโปรโมเตอร์ proximal ERS1จากภาค 5′ ของ ERS1 ใกล้กับ translational เริ่มต้น เว็บไซต์ได้ออกแบบ และการใช้ PCR ขยายโดยใช้กลุ่มวอล์คเกอร์ที่ไลบรารีเป็นต้น ส่วนเอาต์เป็นโคลนใน plasmid pCR2.1-เดิน (Invitrogen สหรัฐอเมริกา) และตามลำดับการค้นหาสำหรับภูมิภาคนำข้อบังคับที่มีรู้จักอื่น ๆลำดับที่ดำเนินการโดยใช้ http://www.dna.affrc.go.jp/htdocs/สถานที่ / ฐานข้อมูลลงพบใน cis ทำหน้าที่กำกับดูแลองค์ประกอบของดีเอ็นเอของพืชสคิว (Higo et al., 1999)2.6. สถิติวิเคราะห์แต่ละการทดลองถูกดำเนินการภายใต้สมบูรณ์ randomizedออกแบบ ด้วยระยะที่สามซ้ำน้อยเลย ที่มีวิเคราะห์ข้อมูล โดยนักเรียน unpaired t ทดสอบ และมีการเปรียบเทียบค่ารักษาเฉลี่ยที่ P≤0.05 – 0.001

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

65 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาทีใน SSC 0.1X และ 0.1% SDS และสัมผัสแล้ว
จะ Kodak XOMAT ฟิล์ม X-Ray ที่ -70 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 สัปดาห์.
2.5 การโคลนโปรโมเตอร์ ERS1
ดีเอ็นเอทั้งหมดจากแอปเปิ้ลใบหนุ่มที่แยกได้ตาม
Dellaporta et al, (1983) และห้องสมุดวอล์คเกอร์จีโนมที่ถูก
สร้างขึ้นโดยใช้ชุดวอล์คเกอร์จีโนมสากล (Clonetech) สำหรับ
การแยก ERS1 ใกล้เคียงยีนก่อการไพรเมอร์โดยเฉพาะ
จากภาค 5 'ของ ERS1 ใกล้กับจุดเริ่มต้นของการแปลที่ถูก
ออกแบบและใช้สำหรับการขยาย PCR โดยใช้จีโนม
ห้องสมุดวอล์คเกอร์เป็นแม่แบบ ส่วนขยายเป็นโคลน
ในพลาสมิด pCR2.1-TOPO (Invitrogen, ประเทศสหรัฐอเมริกา) และติดใจ.
ค้นหาสำหรับภูมิภาคกำกับดูแลป่าสงวนที่รู้จักกับคนอื่น ๆ
ลำดับได้ดำเนินการโดยใช้ http://www.dna.affrc.go.jp/htdocs/
PLACE / ฐานข้อมูลของลวดลายที่พบใน CIS ทำหน้าที่กำกับดูแล
องค์ประกอบดีเอ็นเอของพืชหลอดเลือด (Higo et al., 1999).
2.6 การวิเคราะห์ทางสถิติ
แต่ละการทดลองดำเนินการภายใต้การสุ่มสมบูรณ์
การออกแบบที่มีสามซ้ำซ้ำแล้วซ้ำอีกอย่างน้อยสามครั้ง
วิเคราะห์ข้อมูลโดย unpaired นักเรียน t-test และ
การรักษาค่าเฉลี่ยมาเปรียบเทียบที่P≤0.05-0.001

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

65 ° C เป็นเวลา 15 นาที ใน 0.1x SSC และ 0.1% SDS และสัมผัส
กับ Kodak xomat ฟิล์มเอกซเรย์ที่− 70 ° C เป็นเวลา 1 สัปดาห์
2.5 การโคลน ers1 โปรโมเตอร์
รวมดีเอ็นเอจากใบแอปเปิ้ลยังแยกตาม
dellaporta et al . ( 1983 ) และจีโนมวอล์คเกอร์ห้องสมุด
สร้างโดยใช้ชุดวอล์คเกอร์จีโนมสากล ( clonetech ) สำหรับการแยก ers1

ใกล้ยีนส่งเสริมเฉพาะไพรเมอร์จาก 5 ภูมิภาคของ MBC ers1 ปิดเว็บไซต์เริ่มแปลถูก
ออกแบบ และใช้ขยาย PCR โดยใช้จีโนม
วอล์คเกอร์ห้องสมุดเป็นแม่แบบ ส่วน amplified fragment คือโคลน
ในพลาสมิด pcr2.1-topo ( Invitrogen , USA ) และลำดับเบส
ค้นหารักษากฎระเบียบภูมิภาคอื่น ๆ ที่รู้จักการใช้ http://www.dna.affrc.go.jp/htdocs/

ลำดับสถานที่ / ฐานข้อมูลของลวดลายที่พบใน CIS ทำกฎระเบียบ
ดีเอ็นเอองค์ประกอบของพรรณพืช ( ฮิโงะ et al . , 1999 ) .
2.6 การวิเคราะห์ทางสถิติ
แต่ละการทดลองแบบสุ่มสมบูรณ์ด้วยการออกแบบภายใต้
3 ซ้ำซ้ำอย่างน้อยสามครั้ง
วิเคราะห์ข้อมูลโดยสถิติ Unpaired นักเรียน และหมายถึงการเปรียบเทียบที่ค่า
≤ 0.05 ( p = .