Biochemical characterization of P.

Biochemical characterization of P. ostreatus laccase enzymes. P. ostreatus laccase enzymes were produced using optimized culture conditions (15oC, and 1% methanol fed at 12-hr intervals) in P. pastoris. Lacc6, Lacc8, and Lacc12 were observed as major protein bands, whereas Lacc2, Lacc5, and Lacc11 were not detected or detected as smaller and minor protein bands (Fig. 4A). Notably, Lacc2 and Lacc11 encode defective proteins that lack HXHG and contain incomplete HCH signatures, respectively (Fig. 2A). Laccase activity was assessed by decolorization of malachite green, as described in our previous report [4]. As shown in Fig. 4B, Lacc6 and Lacc12 induced complete decolorization of malachite green, as indicated by the disappearance of the maximum absorbance peak at 622 nm, in a timedependent manner (Fig. 4C). Lacc2, Lacc5, Lacc8, and Lacc11 did not decolorize malachite green (Fig. 4B). Despite its high concentration, Lacc8 was non-functional (Fig. 4B). Additionally, the Lacc8 gene was not expressed during any stage of mushroom development (Fig. 2C), suggesting that Lacc8, which is closely related to Lacc6 (Fig. 1), appears to be in the degenerate state at the level of both transcription and translation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

คุณสมบัติชีวเคมีของเอนไซม์ laccase P. ostreatus P. ostreatus laccase เอนไซม์ที่ผลิตโดยใช้เงื่อนไขเพิ่มประสิทธิภาพวัฒนธรรม (15oC และเมทานอล 1% ที่เลี้ยงในช่วงเวลา 12 ชั่วโมง) ใน P. pastoris Lacc6, Lacc8 และ Lacc12 สุภัคเป็นแถบโปรตีนสำคัญ ในขณะที่ Lacc2, Lacc5 และ Lacc11 ไม่พบ หรือตรวจพบเป็นวงเล็ก และย่อยโปรตีน (Fig. 4A) ยวด Lacc2 และ Lacc11 เข้ารหัสโปรตีนบกพร่องที่ขาด HXHG และประกอบด้วยลายเซ็น HCH สมบูรณ์ ตามลำดับ (Fig. 2A) กิจกรรม Laccase ถูกประเมิน โดยบำบัดสีเขียวมาลาไคต์ ในรายงานก่อนหน้านี้ [4] แสดงใน Fig. 4B, Lacc6 และ Lacc12 เกิดสมบูรณ์บำบัดของมาลาไคต์กรีน ตามที่ระบุ โดยการสูญหายของพีคสูงสุด absorbance ที่ 622 nm ในรูปของ timedependent (Fig. 4C) Lacc2, Lacc5, Lacc8 และ Lacc11 ได้ decolorize มาลาไคต์กรี (Fig. 4B) แม้ มีความเข้มข้นสูง Lacc8 ไม่ทำงาน (Fig. 4B) นอกจากนี้ ยีน Lacc8 ไม่แสดงในขั้นตอนใด ๆ ของเห็ด (Fig. 2C), แนะนำที่ Lacc8 ที่สัมพันธ์ใกล้ชิดกับ Lacc6 (Fig. 1), ปรากฏอยู่ในรัฐ degenerate ระดับ transcription และแปล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ลักษณะทางชีวเคมีของเอนไซม์แลคเคสพีนางรม P. ostreatus เอนไซม์แลคเคสถูกผลิตโดยใช้เงื่อนไขที่ดีที่สุดวัฒนธรรม (15oC และเมทานอล 1% ที่เลี้ยงในช่วงเวลา 12 ชั่วโมง) ในพี pastoris Lacc6, Lacc8 และ Lacc12 ถูกตั้งข้อสังเกตว่าเป็นวงดนตรีที่มีโปรตีนที่สำคัญในขณะที่ Lacc2, Lacc5 และ Lacc11 ไม่พบหรือตรวจพบว่าเป็นวงดนตรีที่มีโปรตีนที่มีขนาดเล็กและรายย่อย (รูป. 4A) ยวด Lacc2 และ Lacc11 เข้ารหัสโปรตีนที่มีข้อบกพร่องที่ขาด HXHG และมีลายเซ็น HCH ไม่สมบูรณ์ตามลำดับ (รูป. 2A) กิจกรรมแลคเคสได้รับการประเมินโดยการลดสีเขียวมรกตที่อธิบายไว้ในรายงานก่อนหน้านี้ [4] ดังแสดงในรูป 4B, Lacc6 และเหนี่ยวนำให้เกิด Lacc12 ลดสีที่สมบูรณ์แบบของสีเขียวมรกตตามที่ระบุโดยการหายตัวไปของยอดเขาที่สูงสุดในการดูดกลืนแสงที่ 622 นาโนเมตรในลักษณะ timedependent (รูป. 4C) Lacc2, Lacc5, Lacc8 และ Lacc11 ไม่ทำให้สีตกสีเขียวมรกต (รูป. 4B) แม้จะมีความเข้มข้นสูง Lacc8 ก็ไม่ทำงาน (รูป. 4B) นอกจากนี้ยีน Lacc8 ไม่ได้แสดงในระหว่างขั้นตอนของการพัฒนาเห็ดใด ๆ (รูป. 2C) บอกว่า Lacc8 ซึ่งเป็นเรื่องที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับ Lacc6 (รูปที่ 1). ดูเหมือนจะอยู่ในสถานะที่เลวในระดับของทั้งสองถอดความและ การแปล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ลักษณะสมบัติทางชีวเคมีของเอนไซม์แลคเคสหน้าปากมดลูก . หน้าปากมดลูก - เอนไซม์ที่ผลิตโดยใช้เงื่อนไขวัฒนธรรมเหมาะ ( 15oc และ 1 % เมทานอลป้อนในช่วงเวลา 12 ชั่วโมง ) ในหน้า pastoris . lacc6 lacc8 , และ lacc12 พบเป็นแถบโปรตีนหลักในขณะที่ lacc2 lacc5 , และ lacc11 ไม่พบหรือพบแถบโปรตีนเป็นขนาดเล็กและเล็กน้อย ( รูปที่ 4 ) โดยเฉพาะและ lacc2 lacc11 เข้ารหัสโปรตีนบกพร่องที่ hxhg ขาดและมีไม่ครบ HCH ลายเซ็น ตามลำดับ ( รูปที่ 2A ) กิจกรรม - ประเมินโดยการกำจัดสีเขียวมรกต , ตามที่อธิบายไว้ในก่อนหน้านี้รายงาน [ 1 ] ดังแสดงในรูปที่ 4B และชักนำการ lacc6 , lacc12 สมบูรณ์ของสีเขียวมรกต , ตามที่ระบุโดยการหายตัวไปของยอดค่าการดูดกลืนแสงสูงสุดที่ 5 นาโนเมตรใน timedependent ลักษณะ ( รูปที่ 4C ) lacc2 lacc5 lacc8 , , , และ lacc11 ไม่ได้ขจัดสีออกไปมรกตเขียว ( ภาพ 4B ) แม้จะมีความเข้มข้นสูงของ lacc8 คือไม่ทำงาน ( รูปที่ 4B ) นอกจากนี้ lacc8 ยีนไม่แสดงออกในระหว่างขั้นตอนใดของการพัฒนาเห็ด ( รูปที่ 2 ) แนะนำว่า lacc8 ซึ่งเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับ lacc6 ( รูปที่ 1 )ดูเหมือนจะอยู่ในสถานะการในระดับของการถอดความและแปล