Total RNA was prepared from the tom

Total RNA was prepared from the tomato tissues using
TRIzol reagent (Invitrogen, Life Technologies, California,
US) following the manufacturer’s instructions.
First-strand cDNA was synthesised from 5 μg of total
RNA using Moloney Murine Leukemia Virus reverse
transcriptase (Promega Biotech Ibérica, Madrid, Spain)
and an oligo(dT)18 primer. The reverse transcriptase
reaction mix (5 μL) was subject to PCR using a
Perkin-Elmer (Madrid, Spain) thermocycler: 94 °C denaturation
for 30 s, followed by 25 (for RPL2) or 30 cycles
of 94 °C for 30 s, 50 °C for 1 min, 72 °C for 1 min,
and a final extension of 72 °C for 15 min. The primer
sequences used for tomato for amplification of PR1
were 5´-CACTAAACCTAAAGAAAAATGG-3´ (forward
primer) and 5´-GTGGAATTATTCATATTAGC-
3´ (reverse primer) (Tornero et al. 1997). The primer

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

จัดทำรวม RNA จากเนื้อเยื่อของมะเขือเทศที่ใช้TRIzol เอเจนต์ (Invitrogen เทคโนโลยีชีวิต แคลิฟอร์เนียสหรัฐ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิตสแตรนด์แรก cDNA ถูก synthesised จาก 5 μรวมใช้ย้อนกลับ Moloney Murine มะเร็งเม็ดเลือดขาวไวรัส RNAtranscriptase (Promega เทคโนโลยีชีวภาพ Ibérica มาดริด สเปน)และการรองพื้น 18 โอลิ (dT) การปเทสผสมปฏิกิริยา (5 μL) ก็อาจใช้ PCRเพอร์กินเอลเมอ (มาดริด สเปน) thermocycler: แปรสภาพ 94 ° C30 s ตาม ด้วยรอบที่ 30 หรือ 25 คน (RPL2)94 ° c สำหรับ 30 วินาที 1 นาที 1 นาที 72 ° C 50 ° Cและนามสกุลเป็น 72 ° C เป็นเวลา 15 นาทีสุดท้าย การรองพื้นลำดับที่ใช้สำหรับมะเขือเทศสำหรับการขยายของ PR1ได้ 5´-CACTAAACCTAAAGAAAAATGG-3´ (ไปข้างหน้าสีรองพื้น) และ 5´-GTGGAATTATTCATATTAGC -3´ (ย้อนหลังรองพื้น) (Tornero et al. 1997) การรองพื้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกจัดทำขึ้นจากเนื้อเยื่อมะเขือเทศโดยใช้
Trizol น้ำยา (Invitrogen เทคโนโลยีชีวิตแคลิฟอร์เนีย
สหรัฐ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต.
cDNA First-Strand ถูกสังเคราะห์จาก 5 ไมโครกรัมจากทั้งหมด
RNA ใช้ Moloney หนูไวรัสมะเร็งเม็ดเลือดขาว reverse
transcriptase (Promega ไบโอเทคIbérica, มาดริด, สเปน)
และ Oligo (dT) 18 ไพรเมอร์ เอนไซม์
ปฏิกิริยาผสม (5 ไมโครลิตร) เป็นเรื่องที่ PCR โดยใช้
เพอร์กินเอลเมอ (มาดริด, สเปน) thermocycler: 94 ° C denaturation
เป็นเวลา 30 วินาทีตามด้วย 25 (RPL2) หรือ 30 รอบ
จาก 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาที 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาที
และส่วนขยายสุดท้ายของ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาที ไพรเมอร์
ลำดับที่ใช้สำหรับมะเขือเทศสำหรับการขยายของ PR1
เป็น 5'-CACTAAACCTAAAGAAAAATGG-3- (Forward
ไพรเมอร์) และ 5'-GTGGAATTATTCATATTAGC-
3'(ไพรเมอร์กลับ) (Tornero et al. 1997) ไพรเมอร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกเตรียมจากมะเขือเทศเนื้อเยื่อใช้trizol Reagent ( Invitrogen , ชีวิตเทคโนโลยี แคลิฟอร์เนียเราทำตามคำแนะนำของผู้ผลิตวิธีแรกคือสาระที่สังเคราะห์ได้จาก 5 μกรัม รวมRNA ไวรัสกลับใช้เมอโลนีย์ ~ .อาการ ( promega เทคโนโลยีชีวภาพ IB จากคอสตาริกา , มาดริด , สเปน )และเป็นโอลิโกเมอร์ ( DT ) 18 . ตรงกันข้าม transcriptaseผสมปฏิกิริยา ( 5 μ L ) คือเรื่อง PCR โดยใช้เพอร์กินเอลเมอร์ ( มาดริด , สเปน ) : 94 ° C ( เทอร์มอไซเคล ์30 วินาที ตามด้วย 25 ( rpl2 ) หรือ 30 รอบ94 ° C 30 , 50 ° C เป็นเวลา 1 นาที 72 ° C เป็นเวลา 1 นาทีและสุดท้ายขยาย 72 ° C เป็นเวลา 15 นาที ไพรเมอร์ลําดับที่ใช้มะเขือเทศเพื่อเพิ่มปริมาณ pr15 ใหม่ - cactaaacctaaagaaaaatgg-3 ใหม่ ( เดินหน้าไพรเมอร์ ) และ 5 ใหม่ - gtggaattattcatattagc -3 ใหม่ ( reverse primer ) ( tornero et al . 1997 ) ไพรเมอร์