(Belloque et al., 2002; Castro et a

(Belloque et al., 2002; Castro et al., 2007; Castro-Rubio, García,
Rodríguez, & Marina, 2005; Koppelman, Lakemond, Vlooswijk, & Hefle,
2004; Macedo-Silva, Shimokomaki, Vaz, Yamamoto, & Tenuta-Filho,
2001; Poms, Klein, & Anklam, 2004). Therefore, their use is of limited
application in the cases of highly processed foods due to protein
degradation (Rodríguez, García, González, Hernández, & Martín, 2005;
Saez, Sanz, & Toldra, 2004). Lately, DNA-based methods have been
increasingly used as highly sensitive and specific alternatives for food
authentication and allergen detection (Costa, Mafra, Kuchta, & Oliveira,
2012a; Costa, Mafra, & Oliveira, 2012b, 2012c; Mafra, Ferreira, &
Oliveira, 2008a; Soares et al., 2013), taking advantage of the relative
great thermal stability of DNA molecules compared to proteins. These
techniques rely mainly on the use of polymerase chain reaction (PCR),
either as qualitative end-point PCR or as quantitative real-time PCR
assays. The use of hydrolysis TaqMan probes and amplification of short
DNA fragments are favoured in quantitative real-time PCR analysis of
processed foods due to matrix degradation and complexity.
Several studies have reported the use of PCR for soybean detection
and quantification in processed meat products, but they generally aim
at identifying the presence of genetically modified soybean (Brod &
Arisi, 2008; Dinon, Treml, Mello, & Arisi, 2010; Taški-Ajduković et al.,
2009), with only few studies being reported for the specific detection
of soybean for quality, authenticity or allergen detection purposes in
this type of foods (Meyer, Chardonnens, Hübner, & Lüthy, 1996; Soares,
Mafra, Amaral, & Oliveira, 2010). Besides, to our knowledge, application
of real-time PCR to quantify the amount of soybean in processed meat
products has not been reported. Following our previous work based on
the use of end-point PCR for soybean detection (Soares et al., 2010),
we now propose a new and validated approach for the specific detection
and quantification of soybean in processed meat products by means of a
normalised real-time quantitative PCR assay coupled with fluorescent
TaqMan probes.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

(Belloque et al., 2002 Castro et al., 2007 Castro Rubio, GarcíaRodríguez, & มารีน่า 2005 Koppelman, Lakemond, Vlooswijk, & Hefle2004 Macedo-Silva, Shimokomaki, Vaz ยามาโมโตะ และ Tenuta-Filho2001 Poms, Klein, & Anklam, 2004) ดังนั้น การใช้เป็นของจำกัดแอพลิเคชันในกรณีของอาหารเนื่องจากโปรตีนสูงแปรรูปย่อยสลาย (Rodríguez, García, González, Hernández และ Martín, 2005Saez, Sanz, & Toldra, 2004) เมื่อเร็ว ๆ นี้ วิธีใช้ดีเอ็นเอได้ใช้เป็นตัวเลือกที่เฉพาะเจาะจง และมีความสำคัญสูงมากสำหรับอาหารตรวจสอบและตรวจจับ allergen (คอสตา Mafra, Kuchta และ Oliveira2012a คอสต้า Mafra, & Oliveira, 2012b ซี 2012 Mafra, Ferreira, &Oliveira, 2008a Soares et al., 2013), ประโยชน์จากญาติดีเสถียรภาพความร้อนของโมเลกุลดีเอ็นเอเปรียบเทียบกับโปรตีน เหล่านี้เทคนิคที่ใช้ส่วนใหญ่เป็นการใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR),เป็นเชิงคุณภาพการวิ PCR หรือ เป็นเชิงปริมาณแบบ real-time PCRassays การใช้ไฮโตรไลซ์ TaqMan คลิปปากตะเข้และขยายของสั้นชิ้นส่วนดีเอ็นเอมี favoured ในการวิเคราะห์เชิงปริมาณแบบ real-time PCR ของอาหารแปรรูปเมตริกซ์ย่อยสลายและความซับซ้อนหลายการศึกษาได้รายงานการใช้ PCR สำหรับตรวจสอบถั่วเหลืองและนับในการประมวลผลผลิตภัณฑ์เนื้อ แต่พวกเขาโดยทั่วไปจุดมุ่งหมายในการระบุสถานะของถั่วเหลืองดัดแปลงพันธุกรรม (Brod &Arisi, 2008 Dinon, Treml, Mello, & Arisi, 2010 Taški-Ajduković et al.,2009), มีเพียงไม่กี่ศึกษารายงานการตรวจเฉพาะกากถั่วเหลืองเพื่อวัตถุประสงค์ตรวจสอบคุณภาพ แท้ หรือ allergen ในชนิดของอาหาร (Meyer, Chardonnens, Hübner, & Lüthy, 1996 SoaresMafra, Amaral และ Oliveira, 2010) สำรอง การเพิ่ม แอพลิเคชันของ PCR แบบเรียลไทม์เพื่อกำหนดปริมาณยอดของถั่วเหลืองในเนื้อแปรรูปผลิตภัณฑ์ยังไม่ได้รายงาน ต่องานก่อนหน้าตามการใช้จุด PCR สำหรับตรวจสอบถั่วเหลือง (Soares et al., 2010),เราเสนอวิธีใหม่ และตรวจตรวจเฉพาะตอนนี้และนับของถั่วเหลืองในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์แปรรูปผ่านการnormalised จริงเชิงปริมาณ PCR assay ด้วยฟลูออเรสเซนต์คลิปปากตะเข้ TaqMan

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

(Belloque, et al., 2002; คาสโตร, et al, 2007;. คาสโตร-Rubio,
การ์เซียRodríguez, & Marina 2005; Koppelman, Lakemond, Vlooswijk และ Hefle,
2004; Macedo-ซิลวา Shimokomaki, วาซ, ยามาโมโตะและ Tenuta-Filho,
2001; ปอมไคลน์และ Anklam, 2004) ดังนั้นการใช้ของพวกเขาคือการ จำกัด
การประยุกต์ใช้ในกรณีของอาหารการประมวลผลสูงเนื่องจากโปรตีนที่ย่อยสลาย (Rodríguezการ์เซีย, González, Hernándezและมาร์ติน 2005 Saez, Sanz และ Toldra, 2004) เมื่อเร็ว ๆ นี้วิธีดีเอ็นเอตามที่ได้รับการใช้เพิ่มขึ้นเป็นอย่างมากที่มีความสำคัญและทางเลือกที่เฉพาะเจาะจงสำหรับอาหารการตรวจสอบและการตรวจสอบสารก่อภูมิแพ้(คอสตา, Mafra, Kuchta & Oliveira, 2012a; คอสตา, Mafra & Oliveira, 2012b, 2012c; Mafra เฟร์และOliveira, 2008a. Soares et al, 2013) การใช้ประโยชน์จากญาติเสถียรภาพทางความร้อนที่ดีของโมเลกุลดีเอ็นเอเมื่อเทียบกับโปรตีน เหล่านี้เทคนิคการอาศัยหลักในการใช้งานของการเกิดปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์ (PCR) ไม่ว่าจะเป็นคุณภาพจุดสิ้นสุด PCR หรือเป็นแบบ real-time PCR เชิงปริมาณการวิเคราะห์ การใช้ยานสำรวจการย่อยสลาย TaqMan และการขยายของสั้นดีเอ็นเอเป็นที่ชื่นชอบในเชิงปริมาณแบบreal-time การวิเคราะห์ PCR ของอาหารการประมวลผลอันเนื่องมาจากการย่อยสลายเมทริกซ์และความซับซ้อน. การศึกษาหลายแห่งได้มีการรายงานการใช้วิธี PCR ในการตรวจหาถั่วเหลืองและปริมาณในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์แปรรูปแต่ พวกเขามักมีจุดมุ่งหมายในการระบุการปรากฏตัวของการดัดแปลงทางพันธุกรรมถั่วเหลือง(Brod และArisi 2008; Dinon, Treml, เมลโลและ Arisi 2010. Taski-Ajduković, et al, 2009) ที่มีการศึกษาน้อยเพียงการรายงานการตรวจสอบที่เฉพาะเจาะจงของถั่วเหลืองที่มีคุณภาพความถูกต้องหรือการตรวจจับสารก่อภูมิแพ้ในประเภทของอาหารนี้ (เมเยอร์ Chardonnens, Hübnerและ Luthy 1996; Soares, Mafra, Amaral & Oliveira, 2010) นอกจากนี้เพื่อความรู้ของเราแอพลิเคชันของ PCR เวลาจริงที่จะหาจำนวนปริมาณของถั่วเหลืองในเนื้อสัตว์แปรรูปผลิตภัณฑ์ยังไม่ได้รับรายงาน ต่อไปนี้การทำงานก่อนหน้าของเราขึ้นอยู่กับการใช้งานของ PCR จุดสิ้นสุดสำหรับการตรวจสอบถั่วเหลือง (Soares et al., 2010), ตอนนี้เรานำเสนอวิธีการใหม่และการตรวจสอบสำหรับการตรวจสอบที่เฉพาะเจาะจงและการหาปริมาณถั่วเหลืองในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์แปรรูปโดยวิธีการปกติแบบ real-time PCR ทดสอบเชิงปริมาณควบคู่ไปกับการเรืองแสงฟิวส์TaqMan

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

( belloque et al . , 2002 ; Castro et al . , 2007 ; กาโอ การ์ซีอา รูบิโอ คาสโตร , เมือง , ลุยส์โรดรีเกซ&
, มารีน่า , 2005 ; koppelman lakemond vlooswijk , , ,
hefle & , 2004 ; macedo shimokomaki วาซ ซิลวา , , , ยามาโมโตะ , & tenuta ลูกคิดว่าปอม
, , 2001 ; ไคลน์ &นคลาม , 2004 ) ดังนั้น การใช้ของพวกเขาคือการจำกัด
ในกรณีของอาหารการประมวลผลสูงเนื่องจากการสลายของโปรตีน
( ลุยส์โรดรีเกซกาโอ การ์ซีอา มาร์ติน , , . kgm gonz lez เอร์นันเดซ ndez . kgm ,& Mart í n , 2005 ;
saez Sanz , & toldra , 2004 ) เมื่อเร็วๆ นี้ ดีเอ็นเอ ตามวิธีการที่ได้รับการใช้มากขึ้น เช่น ความไวสูง

รับรองเฉพาะทางเลือกสำหรับอาหารและการตรวจสอบสารก่อภูมิแพ้ ( คอสต้า มาฟรา kuchta & Oliveira , , ,
2012a ; คอสต้า มาฟรา& Oliveira , 2012b , 2012c ; มาฟราร่า , , ,
& Oliveira , 2008a ; Soares et al . , 2013 ) การใช้ประโยชน์จากญาติ
เสถียรภาพทางความร้อนที่ดีของโมเลกุลดีเอ็นเอกับโปรตีน เทคนิคเหล่านี้
ส่วนใหญ่ต้องพึ่งพาการใช้เทคนิคพีซีอาร์ ( PCR ) ,
ทั้งเชิงคุณภาพหรือเชิงปริมาณแบบเรียลไทม์พีซีอาร์ความหมาย : PCR )
. ใช้ในการย่อยและ taqman แบบสั้น
ชิ้นส่วน DNA PCR แบบเรียลไทม์ที่ชื่นชอบในการวิเคราะห์เชิงปริมาณ
อาหารแปรรูปจากการย่อยสลายของเมทริกซ์และความซับซ้อน
หลายการศึกษาได้รายงานการใช้ PCR เพื่อตรวจหาปริมาณถั่วเหลืองและผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์แปรรูป

แต่พวกเขาโดยทั่วไปจุดมุ่งหมายที่ระบุการปรากฏตัวของถั่วเหลืองดัดแปลงพันธุกรรม ( โบรด&
arisi , 2008 ; dinon treml Mello , , & arisi , 2010 ; ทาšกิ ajdukovi ć et al . ,
2009 )มีการศึกษาเพียงไม่กี่การรายงานสำหรับเฉพาะตรวจจับ
ถั่วเหลืองคุณภาพ ความถูกต้อง หรือวัตถุประสงค์ในการตรวจหาสารก่อภูมิแพ้
นี้ประเภทของอาหาร ( Meyer , chardonnens , H ü bner & L üของท่าน , 1996 ; Soares มาฟรา amaral
, , , & Oliveira , 2010 ) นอกจากนี้ ความรู้ การใช้ PCR แบบเรียลไทม์
ของปริมาณปริมาณถั่วเหลืองในผลิตภัณฑ์แปรรูปเนื้อสัตว์
ยังไม่ได้รับรายงานตามผลงานของเราที่ผ่านมาบนพื้นฐานของความหมาย :
ใช้ PCR เพื่อตรวจหาถั่วเหลือง ( Soares et al . , 2010 ) ,
ตอนนี้เราเสนอใหม่และตรวจสอบแนวทางที่เฉพาะเจาะจงและการตรวจหาปริมาณของถั่วเหลือง
ในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์แปรรูปโดยวิธี PCR แบบเรียลไทม์ของ
/ 54 ปริมาณใช้คู่กับหลอด
taqman เครื่องมือตรวจสอบ