To investigate the sugars liberated from agricultural residues, rice bran and sesame oil cake were suspended in pure water and autoclaved at 121 C for 20 min. A liquid sample was centrifuged (10,000 rpm for 15 min) and the supernatant was used to estimate total reducing sugars by using 3,5 dinitrosalicylic acid (DNS) method. Additionally, individual sugars present in the sample were identified by using high performance liquid chromatography (HPLC) with an ion exclusion column (aminex HPX-87P) and a refractive index detector (RID) manufactured by Agilent (U.S.A). The mobile phase in HPLC was milli-Q water with a flow rate of 0.8 ml/min. Temperatures of column and RID were maintained at 60 and 50 C, respectively. All soluble sugars and glycerol in a sample can be analyzed simultaneously by using this method.
HPLC-grade glucose, xylose, cellobiose, galactose, starchyose, arabinose and glycerol (Sigma, U.S.A) were used as standards for calibration. Meanwhile, the total soluble proteins in liquid samples were estimated by Bradford method using bovine serum albumin as a standard [20]. Additionally, amino acids in liquid samples were estimated as free amino nitrogen content by ninhydrin method using glycine (2e10 mg/l of free amino nitrogen) as a standard [32].
ในการตรวจสอบน้ำตาลปลดปล่อยจากสารตกค้างทางการเกษตรรำข้าวและน้ำมันงาเค้กถูกระงับในน้ำบริสุทธิ์และเบาที่ 121 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาที ตัวอย่างของเหลวถูกหมุนเหวี่ยง (10,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 15 นาที) และสารละลายที่ใช้ในการประเมินโดยรวมลดน้ำตาลโดยใช้กรด dinitrosalicylic 3,5 (DNS) วิธีการ นอกจากนี้น้ำตาลที่มีอยู่ในแต่ละตัวอย่างถูกระบุโดยใช้ประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC) กับคอลัมน์ยกเว้นไอออน (Aminex HPX-87P) และเครื่องตรวจจับดัชนีหักเห (RID) ผลิตโดย Agilent (USA) เฟสเคลื่อนที่ใน HPLC เป็นน้ำหนึ่งในพัน-Q ที่มีอัตราการไหล 0.8 มล. / นาที อุณหภูมิของคอลัมน์และกรมชลประทานได้รับการดูแลที่ 60 และ 50 องศาเซลเซียสตามลำดับ น้ำตาลที่ละลายน้ำได้ทั้งหมดและกลีเซอรอลในตัวอย่างที่สามารถวิเคราะห์ได้พร้อมกันโดยใช้วิธีการนี้.
กลูโคส HPLC เกรดไซโลส, cellobiose, กาแลคโต, starchyose, อราบิโนและกลีเซอรอล (ซิกม่าสหรัฐอเมริกา) ถูกนำมาใช้เป็นมาตรฐานสำหรับการสอบเทียบ ในขณะเดียวกันโปรตีนที่ละลายได้ทั้งหมดในตัวอย่างของเหลวถูกประเมินโดยวิธีแบรดฟอใช้ซีรั่มอัลบูมิวัวเป็นมาตรฐาน [20] นอกจากนี้กรดอะมิโนในตัวอย่างของเหลวประมาณฟรีอะมิโนปริมาณไนโตรเจนโดยใช้วิธี ninhydrin ไกลซีน (2e10 mg / l ไนโตรเจนอะมิโนอิสระ) เป็นมาตรฐาน [32]
การแปล กรุณารอสักครู่..
