The existing isothermal polymerizat

The existing isothermal polymerization-based signal amplification assays are usually accomplished via two strategies: rolling circle amplification (RCA) and circular strand-displacement polymerization. In essence, the two techniques are based on cyclical nucleic acid strand-displacement polymerization (CNDP), limiting the application of isothermal polymerization in medical diagnosis and bioanalysis. In the present study, circular common target molecule (non-nucleic acid strand)-displacement polymerization (CCDP) is developed to amplify the fluorescence signal for biomolecule assays, extending isothermal polymerization to an aptameric system without any medium. Via combining an aptamer with a common hairpin DNA probe, we designed a self-blocked fluorescent bifunctional oligonucleotide probe (signaling probe) for the homogeneous parallel detection of two disease markers, PDGF-BB and the p53 gene. On the basis of CNDP and CCDP signal amplification, highly sensitive (e.g., detecting PDGF down to the concentration level of 1.8 × 10−10 M) and selective detection (no interference even in the presence of a significantly higher concentration (7−200 times) of nontarget proteins) was accomplished, and the linear response range was considerably widened. Furthermore, the bifunctional signaling probe exhibits impressive simplicity, convenience, and short detection time. Herein, the design of the signaling probe was described, factors influencing fluorescence signal were investigated, analytical properties were characterized in detail, and the assay application in a complex medium was validated. The proposed biosensing scheme as a proof-of-concept is expected to promote the application of oligonucleotide probes in basic research and medical diagnosis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Assays ขยายสัญญาณการ polymerization isothermal อยู่สามารถทำได้ปกติผ่านกลยุทธ์ที่ 2: ขยายวงกลม (RCA) และ polymerization สแตรนด์ปริมาณกระบอกสูบที่วงกลม ในสาระสำคัญ เทคนิคสองจะขึ้นอยู่กับกรดนิวคลีอิกห่วงแทนที่สแตรนด์ polymerization (CNDP), จำกัดของ polymerization isothermal โรคและในเชิง ในการศึกษาปัจจุบัน วงกลมทั่วไปโมเลกุลเป้าหมาย (สแตรนด์กรดนิวคลีอิก) -ปริมาณกระบอกสูบ polymerization (CCDP) คือพัฒนาขยายสัญญาณ fluorescence สำหรับชีวโมเลกุล assays ขยาย polymerization isothermal จะเป็นระบบ aptameric โดยไม่มีสื่อใด ๆ ผ่านรวม aptamer ที่มีแบบทั่วไปกิ๊บดีเอ็นเอโพรบ เรามาโพรบเป็น oligonucleotide bifunctional ฟลูออเรสถูกบล็อกด้วยตนเอง (สัญญาณโพรบ) ตรวจขนานเหมือนสองโรคเครื่องหมาย PDGF BB และยีน p53 โดยใช้ CNDP และ CCDP สัญญาณขยาย ความไวสูง (เช่น ตรวจสอบ PDGF ลงไปที่ระดับความเข้มข้น 1.8 × 10−10 M) และการตรวจเลือก (ไม่รบกวนแม้ในต่อหน้าของความเข้มข้นสูงมาก (7−200 ครั้ง) ของโปรตีน nontarget) ได้สำเร็จ และช่วงการตอบสนองเชิงเส้นถูกมาก widened นอกจากนี้ โพรบ signaling bifunctional จัดแสดงประทับใจเรียบง่าย สะดวก และตรวจสอบระยะเวลา นี้ ได้อธิบายการออกแบบของโพรบ signaling ปัจจัยที่มีอิทธิพลต่อสัญญาณ fluorescence ถูกสอบสวน วิเคราะห์คุณสมบัติมีลักษณะในรายละเอียด และแอพพลิเคชันวิเคราะห์ในสื่อที่ซับซ้อนถูกตรวจสอบ โครงร่างเสนอ biosensing เป็นหลักฐานของแนวคิดคาดว่าจะส่งเสริมการประยุกต์คลิปปากตะเข้ oligonucleotide ในการวิจัยพื้นฐานและการวินิจฉัยทางการแพทย์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ที่มีอยู่พอลิเมอตามการวิเคราะห์การขยายสัญญาณ isothermal จะประสบความสำเร็จมักจะผ่านสองกลยุทธ์: การขยายวงกลมกลิ้ง (อาร์ซีเอ) และพอลิเมอสาระรางวงกลม ในสาระสำคัญทั้งสองเทคนิคจะขึ้นอยู่กับกรดนิวคลีอิกวงจรพอลิเมอสาระการกระจัด (CNDP) จำกัด การประยุกต์ใช้พอลิเมอ isothermal ในการวินิจฉัยทางการแพทย์และเทคนิควิเคราะห์ทางชีวภาพ ในการศึกษาปัจจุบันโมเลกุลเป้าหมายร่วมกันเป็นวงกลม (ที่ไม่ใช่ของนิวคลีอิกกรดสาระ) พอลิเมอ -displacement (CCDP) ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อขยายสัญญาณเรืองแสงสำหรับการตรวจชีวโมเลกุล, การขยายพอลิเมอ isothermal กับระบบ aptameric โดยไม่มีสื่อใด ๆ ผ่านการรวม aptamer กับดีเอ็นเอกิ๊บทั่วไปเราได้ออกแบบสอบสวน oligonucleotide bifunctional เรืองแสงในตัวเองที่ถูกบล็อก (หัววัดสัญญาณ) สำหรับเนื้อเดียวกันการตรวจสอบคู่ขนานของสองเครื่องหมายโรค PDGF-BB และยีน p53 บนพื้นฐานของ CNDP และขยายสัญญาณ CCDP, มีความไวสูง (เช่นการตรวจสอบ PDGF ลงไปที่ระดับความเข้มข้นของ 1.8 × 10-10 M) และการตรวจสอบการคัดเลือก (ไม่มีสัญญาณรบกวนแม้ในที่ที่มีความเข้มข้นสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (7-200 ครั้ง ) ของโปรตีน nontarget) ก็ประสบความสำเร็จและช่วงการตอบสนองเชิงเส้นกว้างมาก นอกจากนี้การสอบสวนส่งสัญญาณ bifunctional จัดแสดงนิทรรศการความเรียบง่ายที่น่าประทับใจความสะดวกสบายและการตรวจสอบเวลาที่สั้น ในที่นี้การออกแบบของหัวสัญญาณได้รับการอธิบายปัจจัยที่มีอิทธิพลต่อสัญญาณการเรืองแสงได้รับการตรวจสอบคุณสมบัติการวิเคราะห์มีลักษณะในรายละเอียดและการประยุกต์ใช้การทดสอบในขนาดกลางที่มีความซับซ้อนได้รับการตรวจสอบ เสนอโครงการ biosensing เป็นหลักฐานของแนวคิดที่คาดว่าจะส่งเสริมการใช้ยานสำรวจ oligonucleotide ในการวิจัยขั้นพื้นฐานและการวินิจฉัยทางการแพทย์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่มีอยู่ตามสัญญาณแบบคงที่ ( ) มักจะได้ผ่านสองกลยุทธ์ : กลิ้งวงกลมขยาย ( RCA ) และวงกลมเส้นการพอลิเมอไรเซชัน ในสาระสำคัญ , สองเทคนิคกรดนิวคลีอิกเกลียวจะขึ้นอยู่กับระดับการพอลิเมอไรเซชัน ( cndp )จำกัดการใช้อุณหภูมิพอลิเมอไรเซชันในการวินิจฉัยทางการแพทย์และ bioanalysis . ในการศึกษาทั่วไป ( ที่ไม่ใช่วงกลมเป้าหมายโมเลกุลกรดนิวคลีอิกเกลียว ) - เกิดการเคลื่อนที่ ( ccdp ) ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อขยายสัญญาณแสงสำหรับชีวโมเลกุล ) ขยายอุณหภูมิพอลิเมอไรเซชันในระบบ aptameric ไม่มีกลางโดยรวม aptamer กับดีเอ็นเอตรวจสอบพบกิ๊บ เราออกแบบเองบล็อกเรืองแสง ซึ่ง bifunctional โพรบ ( probe เพื่อตรวจหาสัญญาณ ) คู่ขนานเป็นเนื้อเดียวกันของโรคทั้งสอง และเครื่องหมาย pdgf-bb ยีน P53 . บนพื้นฐานของ cndp และขยายสัญญาณ ccdp อย่างไว ( เช่นการตรวจสอบ pdgf ลงไปที่ระดับความเข้มข้น 18 × 10 − 10 เมตร ) และการตรวจสอบ ( ไม่แทรกแซงในการปรากฏตัวของความเข้มข้นสูงกว่าแม้แต่ ( 7 − 200 ครั้ง ) ของโปรตีน nontarget ) ที่ประสบความสำเร็จ และช่วงการตอบสนองเชิงมากกว้างขึ้น นอกจากนี้ การจัดแสดงผลงานที่น่าประทับใจ bifunctional ตรวจสอบความเรียบง่าย , ความสะดวกสบายและเวลาการตรวจสอบสั้น ๆ ในที่นี้การออกแบบของการสอบสวนก็อธิบาย ปัจจัยที่มีผลต่อการส่งสัญญาณได้ถูกศึกษา วิเคราะห์คุณสมบัติมีลักษณะในรายละเอียด และวิธีการในสื่อที่ถูกตรวจสอบแล้ว เสนอโครงการ biosensing เป็นหลักฐานของแนวคิดที่คาดว่าจะส่งเสริมการใช้ ซึ่งวิธีการในงานวิจัยพื้นฐานและการวินิจฉัยทางการแพทย์ .