To prepare the substratefor SSF, 1

To prepare the substrate
for SSF, 1 g of converge-milled Japanese cedar was added to 50 mL polyethylene
tubes and suspended in 10 mL of 50 mM acetate buffer pH 5.0. T. reesei culture
supernatant containing 5 or 15 mg protein (corresponding to a cellobiase activity
of 0.28 or 0.84 CBU, respectively) was added, and the mixtures were incubated at
50C with shaking at 200 spm for 24 h. SSF was started by the addition of yeast
cell preparations containing equal amounts of S. cerevisiae INVSc1, either
expressing AaBGL1 or supplemented with Novozyme 188 (Sigma), a commercial
preparation of cellobiase from Aspergillus niger. Various amounts of yeast cells
representing approximately 2, 3 or 5 CBU of total cellobiase activity were tested.
The amounts of dry cell weight added to tubes containing converge-milled
Japanese cedar pretreated with 5 mg T. reesei protein were 10, 15 and 26 mg (26
OD600 units). For the tubes with 15 mg T reesei protein, 8, 15 and 29 mg (38 OD600
units) of dry cell weight were added. The tubes were sealed to create oxygenlimited
conditions and were incubated in a shaking incubator at 39C at 100 spm
for 12e72 h.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การเตรียมพื้นผิวสำหรับ SSF, g 1 ของซีดาร์ญี่ปุ่นมาบรรจบกันปลายถูกเพิ่ม 50 mL พลาสติกหลอดและมลระงับใน 10 ของค่า pH ของบัฟเฟอร์ acetate 50 มม. 5.0 ต. reesei วัฒนธรรมsupernatant ประกอบด้วย 5 หรือ 15 มิลลิกรัมโปรตีน (ที่สอดคล้องกับกิจกรรม cellobiase0.28 หรือ 0.84 CBU ตามลำดับ) เพิ่ม และส่วนผสมได้ incubated ที่เริ่มต้น โดยการเพิ่มยีสต์ 50C พร้อมเขย่าที่ 200 spm สำหรับ 24 h. SSFการเตรียมเซลล์ที่ประกอบด้วยจำนวนเท่าของ S. cerevisiae INVSc1 อย่างใดอย่างหนึ่งแสดง AaBGL1 หรือเสริม ด้วย Novozyme 188 (ซิกมา), การพาณิชย์การเตรียม cellobiase จากไนเจอร์ Aspergillus จำนวนเซลล์ยีสต์ต่าง ๆแสดงประมาณ 2, 3 หรือ 5 CBU cellobiase รวมกิจกรรมได้ทดสอบจำนวนของน้ำหนักเซลล์แห้งเพิ่มประกอบด้วยมาบรรจบกันปลายท่อPretreated กับโปรตีน reesei มิลลิกรัม 5 ต.ซีดาร์ญี่ปุ่นได้ 10, 15 และ 26 มิลลิกรัม (26OD600 หน่วย) สำหรับหลอดที่มีโปรตีน 15 mg T reesei, 8, 15 และ 29 มิลลิกรัม (38 OD600หน่วย) ของเซลล์แห้ง เพิ่มน้ำหนัก หลอดถูกปิดผนึกเพื่อสร้าง oxygenlimitedเงื่อนไข และถูก incubated ใน incubator งก ๆ ที่ 39C ที่ 100 spmสำหรับ 12e72 h

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อเตรียมความพร้อมสารตั้งต้นสำหรับ SSF 1 กรัมของต้นซีดาร์ญี่ปุ่นบรรจบโม่ถูกบันทึกอยู่ใน 50 มลพลาสติกชนิดหลอดและระงับใน10 มิลลิลิตร 50 มิลลิบัฟเฟอร์ pH 5.0 อะซิเตท T. reesei วัฒนธรรมใสที่มี5 หรือ 15 มก. โปรตีน (ตรงกับกิจกรรม cellobiase 0.28 หรือ 0.84 CBU ตามลำดับ) ถูกบันทึกและผสมที่ถูกบ่ม50C เขย่าที่ 200 SPM เป็นเวลา 24 ชั่วโมง SSF เริ่มต้นจากการเพิ่มขึ้นของยีสต์การเตรียมเซลล์ที่มีจำนวนเงินที่เท่ากันของเอสINVSc1 cerevisiae ทั้งแสดงAaBGL1 หรือเสริมด้วย Novozyme 188 (ซิกม่า) ในเชิงพาณิชย์เตรียมความพร้อมของcellobiase จากเชื้อรา Aspergillus ไนเจอร์ ปริมาณต่างๆของเซลล์ยีสต์คิดเป็นประมาณ 2, 3 หรือ 5 CBU ของกิจกรรม cellobiase รวมได้มีการทดสอบ. ปริมาณของน้ำหนักเซลล์แห้งเพิ่มเข้าไปในท่อที่มีบรรจบโม่ซีดาร์ญี่ปุ่นปรับสภาพกับ 5 มิลลิกรัมโปรตีน T. reesei เป็น 10, 15 และ 26 มก. (26 OD600 หน่วย) สำหรับหลอดกับ 15 มิลลิกรัมโปรตีน reesei T, 8, 15 และ 29 มก. (38 OD600 หน่วย) ของน้ำหนักเซลล์แห้งที่ถูกเพิ่ม หลอดถูกปิดผนึกเพื่อสร้าง oxygenlimited เงื่อนไขและถูกบ่มในศูนย์บ่มเพาะสั่นที่ 39C ที่ 100 SPM สำหรับ 12e72 ชั่วโมง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เตรียมพื้นผิว
สำหรับ SSF 1 กรัมข้าวสาร ซีดาร์ ญี่ปุ่นได้เพิ่มเป็น 50 มล. หลอดพลาสติก
อยู่ใน 10 ml 50 มิลอะซิเตทบัฟเฟอร์ pH 5.0 . ติดตั้ง reesei culture
supernatant containing 5 or 15 protein mg ( อส to a activity CE มาเยี่ยม
ของ 0.28 or 0.84 เนา , respectively ) เขาไม่ใช่ฉัน , ( the เช้านี้สำหรับ incubated at
50c with spm for 24 h. ตู้ Jiangsu โดยจะอะไรSSF ถูกเริ่มต้นโดยการเพิ่มของยีสต์เซลล์ที่มีปริมาณเท่ากับการเตรียม
S . cerevisiae invsc1 เหมือนกัน
แสดง aabgl1 หรือเสริมด้วย novozyme 188 ( Sigma ) , โฆษณา
การเตรียมเซลโลไบเจาก Aspergillus ไนเจอร์ ปริมาณต่างๆของเซลล์ยีสต์
คิดเป็นประมาณ 2 , 3 หรือ 5 กิจกรรมทั้งหมดเพื่อทดสอบ
เซลโลไบเ .ปริมาณของน้ำหนักเซลล์แห้งเพิ่มหลอดบรรจุข้าวสารญี่ปุ่นที่ได้รับกับไม้สนสีดาร์บรรจบ
T . reesei 5 มิลลิกรัม โปรตีน คือ 10 , 15 และ 25 มิลลิกรัม ( หน่วย od600 26
) สำหรับหลอด 15 มก. T reesei โปรตีน , 8 , 15 และ 29 มก. ( หน่วยที่ 38 od600
) ของน้ำหนักเซลล์แห้งเท่ากับเพิ่ม หลอดที่ถูกปิดผนึกไว้เพื่อสร้าง oxygenlimited
เงื่อนไขและบ่มในตู้อบที่สั่นที่ 100 SPM
39 องศาสำหรับ 12e72
h