The assay and preparation of crude

The assay and preparation of crude GTase were based on
the method previously described by Koo et al.14 The cellfree
enzymes were precipitated from culture supernatant
of S. mutans. After filtering the culture supernatant of S.
mutans using a 0.2 m membrane filter, the cell-free enzymes
were extracted and precipitated by Amicon ultra centrifugal
filter (MWCO 30 kDa, Millipore, USA). The crude enzymes
were restored at -80 ◦C and used for synthesis of waterinsoluble
glucan. A reaction mixture consisting of 20 L of
crude enzyme, 180 L of the diluted herbal medicine extract
in 800 L of 62.5 mM potassium phosphate buffer (pH 6.5)
containing 12.5 g of sucrose and 0.25 g of sodium azide were
incubated at 37 ◦C for 30 hours. After incubation, the fluid was
removed, and the contents that stick to tube wall were washed
with sterile water and dispersed by a sonicator (JAC-2010P,
Kodo, Korea). The total amount of water-insoluble glucan was
measured the absorbance by UV/VIS spectrophotometer (U-
2900, Hitachi, Japan).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผลการวิเคราะห์และการจัดทำ GTase น้ำมันดิบอยู่บนพื้นฐานของ
วิธีการที่อธิบายก่อนหน้านี้โดย Koo et al.14 cellfree
เอนไซม์ถูกตกตะกอนจากสารละลายวัฒนธรรม
ของ S. mutans หลังจากการกรองสารละลายวัฒนธรรมของ S.
mutans โดยใช้ตัวกรองเมมเบรน 0.2? เมตรเอนไซม์ปราศจากเซลล์
ถูกสกัดและตกตะกอนโดย Amicon พิเศษแรงเหวี่ยง
กรอง (MWCO 30 กิโลดาลตันอร์ค, สหรัฐอเมริกา) เอนไซม์ดิบ
ถูกเรียกคืนที่ -80 ◦Cและใช้สำหรับการสังเคราะห์ waterinsoluble
กลูแคน ส่วนผสมปฏิกิริยาซึ่งประกอบด้วย 20? L ของ
เอนไซม์ 180? L ของสารสกัดยาเจือจางสมุนไพร
ใน 800 ลิตร 62.5 มิลลิบัฟเฟอร์โพแทสเซียมฟอสเฟต (pH 6.5)
ที่มี 12.5 กรัมของน้ำตาลซูโครสและ 0.25 กรัมโซเดียม azide ถูก
บ่มที่ 37 ◦C 30 ชั่วโมง หลังจากการบ่มของเหลวที่ถูก
ลบออกและเนื้อหาที่ติดกับผนังหลอดถูกล้าง
ด้วยน้ำหมันและแยกย้ายกันไปโดยคลื่นเสียง (JAC-2010P,
Kodo เกาหลี) จำนวนเงินรวมของกลูแคนที่ไม่ละลายน้ำได้รับการ
วัดการดูดกลืนแสงโดย UV / VIS spectrophotometer (U-
2900 ฮิตาชิญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิเคราะห์และจัดทำ gtase ดิบตามวิธีที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ โดยการ cellfree al.14 คูและเอนไซม์ตกตะกอนจากนำวัฒนธรรมS . mutans . หลังจากการกรองวัฒนธรรมนำของ sจำนวนการใช้ 0.2 M เยื่อกรอง การสังเคราะห์เอนไซม์สกัดและตกตะกอนโดย amicon อัลตร้า พัดลมดูดอากาศกรอง ( mwco 30 kDa มิลลิ , USA ) เอนไซม์ดิบเป็นคืนที่ - 80 องศาเซลเซียส และใช้◦สำหรับการสังเคราะห์ waterinsolubleกลูแคน . ปฏิกิริยาที่ผสม 20 ลิตร ประกอบด้วยเอนไซม์ , 180 ลิตรของยาสมุนไพรสกัดเจือจางใน 800 ลิตร 62.5 มม. โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.5 )ประกอบด้วย 12.5 กรัมซูโครสและ 0.25 กรัมของโซเดียมไซด์คือ◦บ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 ชั่วโมง หลังจากบ่ม , ของเหลวคือลบออก , และเนื้อหาที่ติดผนังหลอดถูกล้างกับน้ำหมันและแจกจ่ายโดยเครื่องเขย่าแบบเสียง ( jac-2010p ,โคโด , เกาหลี ) จํานวนไม่ละลายน้ำกลูแคน คือโดยวัดการดูดกลืนแสง UV / VIS Spectrophotometer ( U -2900 , Hitachi , ญี่ปุ่น )