For the pectin solution (16.67 g L1), PNDM was dissolved in
eluent AIEC and shaken overnight. This solution was centrifuged
(8000 g, 15 min). The resulting supernatant was filtered through
an MN 615 ¼ folded filter in order to inject 20 mL of the filtrate into
the IEC system via a sample loop. For gradient elution of the pectin
fractions at a flow rate of 10 mL min1 (3 bar max. pressure,
ambient temperature), eluent BIEC (eluent AIEC plus 500 mM NaCl)
was admixed with eluent AIEC to increase the NaCl concentration
stepwise as follows: (1) 0e40 min 0% BIEC (0 mM NaCl), (2)
40e70 min linear increase to 12.5% BIEC, (3) 70e100 min 12.5% BIEC
(62.5 mM NaCl), (4) 100e140 min linear increase to 25% BIEC, (5)
140e170 min 25% BIEC (125 mM NaCl), (6) 170e210 min linear increase
to 100% BIEC, and (7) 210e260 min 100% BIEC (500 mMNaCl).
The eluate was automatically collected in 20 mL-fractions covering
elution intervals of 2 min. The fractions contributing to the same
peak at 215 nm were pooled. The pooled fractions IEC-I to IEC-V
were lyophilized to reduce their volumes. After they had been
dissolved in adjusted volumes of ultra-pure water, they were dialyzed
for 72 h against distilled water under stirring (1 kDa cut-off, Ø
29 mm, regenerated cellulose, Spectra/Por7®, Spectrum Laboratories,
Compton, USA), and lyophilized again for further
investigation.
For the pectin solution (16.67 g L1), PNDM was dissolved in
eluent AIEC and shaken overnight. This solution was centrifuged
(8000 g, 15 min). The resulting supernatant was filtered through
an MN 615 ¼ folded filter in order to inject 20 mL of the filtrate into
the IEC system via a sample loop. For gradient elution of the pectin
fractions at a flow rate of 10 mL min1 (3 bar max. pressure,
ambient temperature), eluent BIEC (eluent AIEC plus 500 mM NaCl)
was admixed with eluent AIEC to increase the NaCl concentration
stepwise as follows: (1) 0e40 min 0% BIEC (0 mM NaCl), (2)
40e70 min linear increase to 12.5% BIEC, (3) 70e100 min 12.5% BIEC
(62.5 mM NaCl), (4) 100e140 min linear increase to 25% BIEC, (5)
140e170 min 25% BIEC (125 mM NaCl), (6) 170e210 min linear increase
to 100% BIEC, and (7) 210e260 min 100% BIEC (500 mMNaCl).
The eluate was automatically collected in 20 mL-fractions covering
elution intervals of 2 min. The fractions contributing to the same
peak at 215 nm were pooled. The pooled fractions IEC-I to IEC-V
were lyophilized to reduce their volumes. After they had been
dissolved in adjusted volumes of ultra-pure water, they were dialyzed
for 72 h against distilled water under stirring (1 kDa cut-off, Ø
29 mm, regenerated cellulose, Spectra/Por7®, Spectrum Laboratories,
Compton, USA), and lyophilized again for further
investigation.
การแปล กรุณารอสักครู่..
สำหรับการแก้ปัญหาเพคติน (16.67 กรัม L 1) PNDM ถูกละลายใน
ตัวชะ AIEC และเขย่าในชั่วข้ามคืน วิธีการแก้ปัญหานี้ได้รับการหมุนเหวี่ยง
(8000? กรัม 15 นาที) สารละลายที่เกิดถูกกรองผ่าน
MN 615 ¼พับกรองเพื่อฉีด 20 มิลลิลิตรกรองลงใน
ระบบ IEC ผ่านห่วงตัวอย่าง สำหรับชะลาดของเพคติน
เศษส่วนที่อัตราการไหลของนาที 10 มิลลิลิตร 1 (3 บาร์ความดันสูงสุด.
อุณหภูมิ) ชะ BIEC (ชะ AIEC บวก 500 มิลลิโซเดียมคลอไรด์)
ได้รับการผสมกับตัวชะ AIEC เพื่อเพิ่มความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์
เป็นแบบขั้นตอน ต่อไปนี้ (1) 0e40 ต่ำสุด 0% BIEC (0 mM NaCl), (2)
40e70 นาทีเพิ่มขึ้นเชิงเส้น 12.5% BIEC (3) 70e100 นาที 12.5% BIEC
(62.5 มิลลิโซเดียมคลอไรด์), (4) 100e140 นาทีเพิ่มขึ้นเป็นเชิงเส้น 25% BIEC (5)
140e170 นาที 25% BIEC (125 มิลลิโซเดียมคลอไรด์), (6) 170e210 นาทีเพิ่มขึ้นเชิงเส้น
100% BIEC และ (7) 210e260 นาที 100% BIEC (500 mMNaCl).
eluate ถูกเก็บรวบรวมโดยอัตโนมัติ 20 มล-เศษส่วนครอบคลุม
ช่วงเวลา elution 2 นาที เศษส่วนที่เอื้อต่อการเดียวกัน
สูงสุดที่ 215 นาโนเมตรถูกรวบรวม เศษส่วน pooled IEC-I มาตรฐาน IEC-V
ถูกแห้งเพื่อลดปริมาณของพวกเขา หลังจากที่พวกเขาได้รับ
ในปริมาณที่ละลายปรับน้ำบริสุทธิ์ที่พวกเขา dialyzed
สำหรับ 72 ชั่วโมงกับน้ำกลั่นภายใต้ตื่นเต้น (1 กิโลดาลตันตัด, Ø
29 มมเซลลูโลสอาศัย, Spectra / Por7®สเปกตรัมห้องปฏิบัติการ,
คอมป์ตัน, สหรัฐอเมริกา ) และแห้งต่อไปอีกครั้งสำหรับ
การตรวจสอบ
การแปล กรุณารอสักครู่..
โซลูชั่นสำหรับเพคติน ( SD G L 1 ) pndm ถูกละลายในสารละลาย aiec
และหวั่นไหวในชั่วข้ามคืน โซลูชั่นนี้อยู่ที่ระดับ
( 8000 G , 15 นาที ) ซึ่งถูกกรองผ่านสูง
มี MN 615 ¼พับตัวกรองเพื่อฉีด 20 ml ของการกรองในระบบ IEC
ผ่านอย่างวง สำหรับการใช้เพกติน
เศษส่วนที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตรต่อนาที 10 ( 3 บาร์ แม็กซ์ ความดัน
อุณหภูมิปกติ ) , อี biec ( aiec อีพลัส 500 mM NaCl )
ถูกผสมตัว aiec เพื่อเพิ่มความเข้มข้นของเกลือ
= ( 1 ) 0e40 มิน 0 % biec ( 0 mM NaCl ) , ( 2 )
40e70 มินเส้นตรงเพิ่มขึ้นถึง 12.5% biec ( 3 ) 70e100 มิน 12.5 % biec
( 62.5 mM NaCl ) , ( 4 ) 100e140 มินเส้นเพิ่มขึ้นถึง 25% biec ( 5 )
140e170 มิน 25% biec ( 125 mM NaCl ) , ( 6 ) 170e210 มินเพิ่ม
เชิงเส้น100% biec และ ( 7 ) 210e260 มิน 100% biec ( 500 mmnacl )
สารละลาย ( eluate ) ถูกเก็บรวบรวมโดยอัตโนมัติใน 20 ml เศษส่วนครอบคลุม
( ช่วงเวลา 2 นาทีเศษส่วนให้เกิดยอดเดียวกัน
ที่ 215 nm เป็นพู . รวม iec-i เศษส่วนเพื่อ iec-v
ถูกแห้งเพื่อลดปริมาณของพวกเขา หลังจากที่พวกเขาได้รับการปรับปริมาณของอัลตร้า
ละลายในน้ำบริสุทธิ์ พวกเขาผ่าน
72 H กับน้ำกลั่นได้ที่กวน ( 1 ) ตัดØ
29 มม. อาการฟกช้ำ Spectra / por7 ®สเปกตรัมห้องปฏิบัติการ
คอมป์ตัน , USA ) และแห้งอีกครั้ง เพื่อทำการสืบสวนต่อไป
การแปล กรุณารอสักครู่..