RNA: Total RNA of tissues of intere

RNA: Total RNA of tissues of interest. Prepare yourself or commercially available from Clontech etc.
*Reverse transcriptase: Superscript II (Gibco/Invitrogen) or others.
*10 mM 4dNTP: 10 mM each of dATP, dGTP, dCTP, dTTP mixed. Diluted from
100 mM stock reagents (Amerciam pharmacia). *pdN9: random nonamer (Takara)
*PCR primers: I usually dissolve the powder to 100 uM and make working solution containing 5 uM each of primer pairs.
*PCR enzymes
KOD polymerase (TOYOBO): with strong proof reading activity ExTaq polymerase (Takara): Used for TA cloning
*DMSO: Used for PCR enhancement. Keep aliquoted @ -20C.
*10xloading buffer:
*1xloading buffer: dilute 10x buffer with TE
*1% agarose gel: melt 1g of agarose (for molecular biology) to 100 ml of TAE
buffer by electric oven. Add 5 ul of 10 mg/ml Ethidium bromide. *TAE buffer:

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

RNA: รวมอาร์เอ็นเอของเนื้อเยื่อที่น่าสนใจ เตรียมตัว หรือจำหน่ายจาก Clontech เป็นต้น* สคริปเท: II ตัวยก (Gibco/Invitrogen) หรือผู้อื่น* 4dNTP 10 มม.: 10 mM แต่ละ dATP, dCTP, dGTP, dTTP ผสม เจือจางจาก100 มม.สต็อกสารรีเอเจนต์ (Amerciam ฟาร์) * pdN9: nonamer สุ่ม (Takara)* ไพรเมอร์ PCR: ฉันมักจะละลายผงถึง 100 uM และทำให้ทำงานแก้ปัญหาที่ประกอบด้วย 5 uM คู่ไพรเมอร์แต่ละ* เอนไซม์ PCRบ้านกอดพอลิเมอเรส (อลส์): มีหลักฐานที่แข็งแกร่งอ่านกิจกรรม ExTaq พอลิเมอเรส (Takara): ใช้สำหรับลนตา* DMSO: ใช้สำหรับเพิ่มประสิทธิภาพของ PCR เก็บ aliquoted @-20C* 10xloading บัฟเฟอร์:* บัฟเฟอร์ 1xloading: บัฟเฟอร์เจือจาง 10 เท่ากับ TE* 1% agarose เจล: ละลาย 1 กรัมของ agarose (สำหรับอณูชีววิทยา) ถึง 100 ml ของ TAEบัฟเฟอร์ โดยเตาอบไฟฟ้า เพิ่ม 5 ul ของโบรไมด์ Ethidium 10 mg/ml * TAE บัฟเฟอร์:

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อาร์เอ็นเอ: RNA รวมของเนื้อเยื่อที่น่าสนใจ เตรียมความพร้อมตัวเองหรือใช้ได้ในเชิงพาณิชย์จาก Clontech ฯลฯ
* ย้อนกลับ transcriptase:. ยกครั้งที่สอง (Gibco / Invitrogen) หรือคนอื่น ๆ
* 10 มิลลิ 4dNTP 10 มมแต่ละ dATP, dGTP, dCTP, dTTP ผสม ปรับลดจาก
100 มิลลิเมตรน้ำยาหุ้น (Amerciam Pharmacia) * pdN9: nonamer สุ่ม (Takara)
* ไพรเมอร์ PCR: ฉันมักจะละลายผง 100 um และทำให้การแก้ปัญหาที่มี 5 um แต่ละคู่ไพรเมอร์ที่ทำงาน.
* PCR เอนไซม์
KOD โพลิเมอร์ (Toyobo): มีหลักฐานที่แข็งแกร่งอ่านกิจกรรม ExTaq โพลิเมอร์ (Takara ): ใช้สำหรับ TA โคลน
* DMSO: ใช้สำหรับการเพิ่มประสิทธิภาพของ PCR เก็บ aliquoted @ -20C.
* 10xloading บัฟเฟอร์:
* 1xloading บัฟเฟอร์: เจือจาง 10 เท่าบัฟเฟอร์กับ TE
เจล * 1% agarose: ละลาย 1G ของ agarose (สำหรับอณูชีววิทยา) 100 มล. ของ TAE
บัฟเฟอร์โดยเตาอบไฟฟ้า เพิ่ม 5 UL 10 mg / ml Ethidium bromide * บัฟเฟอร์ TAE:

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ประเภท : อาร์เอ็นเอทั้งหมดของเนื้อเยื่อของดอกเบี้ย เตรียมตัวหรือในเชิงพาณิชย์ จาก clontech ฯลฯ* reverse transcriptase : ตัวยก 2 ( gibco / Invitrogen ) หรืออื่นๆ* 4dntp 10 มม. 10 มม. แต่ละ datp dgtp dctp dttp , , , ผสม เจือจางจาก100 มม. Stock สารเคมี ( amerciam มุ่งมั่น ) * pdn9 : สุ่ม nonamer ( ทาการะ )* PCR ไพรเมอร์ : ฉันมักจะละลายผง 100 ม และให้ทำงานสารละลายที่มี 5 อืมแต่ละ primer คู่* เอนไซม์ดีเอ็นเอรหัส พอลิเมอเรส ( toyobo ) : แข็งแรง หลักฐานการอ่านกิจกรรม extaq Polymerase ( ทาการะ ) : ใช้สำหรับทาโคลน* DMSO : ใช้สำหรับ PCR ให้ aliquoted @ - 20C .* 10xloading บัฟเฟอร์ :* 1xloading บัฟเฟอร์ : เจือจาง 10x บัฟเฟอร์กับเต้* * * * 1 % เจล : ละลาย 1G ของโรส ( อณูชีววิทยา ) 100 ml ของแทบัฟเฟอร์โดยเตาอบไฟฟ้า เพิ่ม 5 UL ของ 10 mg / ml ทิเดียมโบรไมด์ . * เทบัฟเฟอร์ :