2. Material and methodsThe details

2. Material and methods
The details of animals and treatments of this study were
described elsewhere [9]. In brief, the study was carried out
in 19 nonpregnant Holstein dairycows at a parity of 3.00.1
and at 28.0  0.2 (mean  SD) wk after parturition. Cows in
later lactationwere selected to allowthe investigation of the
direct effects of treatment infusion without interference
with a negative energy balance and the characteristic
endocrine and metabolic changes during the transition
period. Starting at 2 wk before and throughout the experiment,
animals were fed with hay ad libitum and with a
concentrate rich in protein and energy twice daily according
to the individual milk production. Cows were randomly
assigned to 3 treatment groups: an adjusted intravenous
insulin infusion to induce hypoglycemia at a plasma glucose
concentrations of 2.5 mmol/L (HypoG, n ¼ 5), a
hyperinsulinemic-euglycemic clamp to maintain plasma
glucose concentrations at the preinfusion concentrations to
study effects of insulin at simultaneously normal glucose
concentrations (EuG, n¼6), and a 0.9% saline infusion (NaCl,
n¼8) as a control with normal concentrations of insulin and
glucose. Infusions and/or clamps started at 9 AM and were
continued until 9 AM2 d later through one of the indwelling
intravenous catheters (Cavafix Certo Splittocan, B. Braun
Melsungen AG, Germany), whereas the second catheterwas
used for blood sampling.
Hyperinsulinemic hypoglycemia was induced by infusion
of bovine insulin (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO,
#I4011, USA). Insulin infusion rates were adjusted according
to plasma glucose concentrations, which was measured
every 5-min in the first 2 h and hourly during the further
course of infusion. Hyperinsulinemic-euglycemic clamp
was performed by insulin infusion at a constant infusion
rate of 0.6 mU/kg BW/min (according to the average infusion
rate in HypoG) and an additional continuously regulated
glucose infusion (Dr G. Bichsel AG, Interlaken,
Switzerland) to maintain plasma glucose at the preinfusion
concentrations. Control (NaCl) cows were continuously
infused with a 0.9% saline solution at an infusion rate of
20 mL/h administered through an automatic pump (Perfuser,
B. Braun Melsungen AG).
The reference samples were taken 1wk and immediately
before the start of infusions. Plasma glucose concentrations
were measured enzymatically in duplicate with an automated
analyzer (Cobas Mira 2, Hoffmann-La Roche, Basel,
Switzerland) by commercial kit (BioMerieux no. 61270,
Marcy l’Etoile, France, intra- and interassay coefficient of
variation (CV) both

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการรายละเอียดของสัตว์และการรักษาของการศึกษานี้อธิบายอื่น [9] สังเขป ทำการศึกษาออกใน dairycows 19 nonpregnant โฮลชไตน์ที่พาริตี้ของ 3.0 0.1และ 0.2 28.0 (เฉลี่ย SD) wk หลังจาก parturition วัวในlactationwere หลังเลือกการสอบสวน allowthe ของการผลโดยตรงของการรักษาคอนกรีตโดยไม่รบกวนสมดุลพลังงานลบและลักษณะต่อมไร้ท่อ และการเผาผลาญเปลี่ยนแปลงระหว่างการเปลี่ยนแปลงรอบระยะเวลา ราคาเริ่มต้นที่ 2 wk ก่อน และ ทดลองสัตว์ที่เลี้ยง กับ ad libitum เฮย์ และการเข้มข้นที่อุดมไปด้วยโปรตีนและพลังงานวันละสองครั้งตามการผลิตน้ำนมแต่ละ วัวถูกสุ่มกำหนดให้กับกลุ่มบำบัด 3: การปรับปรุงทางหลอดเลือดดำคอนกรีตอินซูลินเพื่อก่อให้เกิด hypoglycemia ที่กลูโคสพลาสม่าความเข้มข้น 2.5 mmol/L (HypoG, n ¼ 5), การแคลมป์ hyperinsulinemic euglycemic รักษาพลาสม่าความเข้มข้นของกลูโคสที่ความเข้มข้น preinfusion เพื่อศึกษาผลของอินซูลินที่กลูโคสปกติพร้อมกันความเข้มข้น (EuG, n¼6), และเป็น 0.9% saline คอนกรีต (NaCln¼8) เป็นตัวควบคุมความเข้มข้นปกติของอินซูลิน และกลูโคส Infusions / clamps เริ่มที่ 9.00 น. และได้ต่อเนื่องจนถึง 9 AM2 d ภายหลังผ่านทางหนึ่งที่ indwellingฉีด catheters (Cavafix Certo Splittocan, B. BraunMelsungen AG เยอรมัน), ในขณะที่ catheterwas ที่สองใช้สำหรับสุ่มตัวอย่างเลือดHyperinsulinemic hypoglycemia ถูกเหนี่ยวนำ โดยคอนกรีตของอินซูลินวัว (Aldrich ซิก Louis เซนต์ MO#I4011 สหรัฐอเมริกา) อินซูลินคอนกรีตราคาถูกปรับปรุงตามการพลาสมากลูโคสความเข้มข้น ที่ถูกวัดทุก 5-นาที ใน h 2 แรก และชั่วโมง ระหว่างการเพิ่มเติมหลักสูตรของคอนกรีต แคลมป์ Hyperinsulinemic euglycemicทำ ด้วยคอนกรีตอินซูลินที่คอนกรีตคงที่อัตรา 0.6 หมู่/kg BW/min (ตามคอนกรีตเฉลี่ยอัตราใน HypoG) และเพิ่มเติมควบคุมอย่างต่อเนื่องน้ำตาลในคอนกรีต (Dr G. Bichsel AG อินเตอร์ลาเคนสวิตเซอร์แลนด์) เพื่อรักษาระดับน้ำตาลในพลาสมาที่ preinfusion ที่ความเข้มข้น ควบคุม (NaCl) วัวได้อย่างต่อเนื่องลงตัวกับเกลือ 0.9% ในอัตราคอนกรีตปริมาณ 20 mL/h จัดการผ่านปั๊มอัตโนมัติ (Perfuserเกิด Braun Melsungen AG)ตัวอย่างการอ้างอิงที่ถ่าย 1wk และทันทีก่อนเริ่ม infusions พลาสมากลูโคสความเข้มข้นมีวัด enzymatically ซ้ำกับการอัตโนมัติวิเคราะห์ (Cobas แฮร์ 2, Hoffmann-ลาโรช บา เซิลสวิตเซอร์แลนด์) โดยชุดพาณิชย์ (BioMerieux หมายเลข 61270Marcy l'Etoile ฝรั่งเศส intra - และ interassay สัมประสิทธิ์ของความแปรปรวน (CV) ทั้ง < 4%) พลาสม่าอินซูลินถูกวัดในซ้ำ โดย radioimmunoassay ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้[10] กับอินทราและ CV interassay 8.2% และ 15.5 ล้านคน% ตามลำดับและมีวัดความเข้มข้นกลูคากอนพลาสม่าสำเนาโดยชุด radioimmunoassay พาณิชย์(cat. # GL - 32K มาก Zug สวิตเซอร์แลนด์ intra - และinterassay CV 4.0% และ 12.5% ตามลำดับ)พื้นที่ใต้เส้นโค้ง (AUC) ของตัวแปรที่วัดในระหว่างวันที่ 2 ของการทดลองถูกคำนวณโดยการกฎ trapezoidal (ชุดสี่เหลี่ยม และสามเหลี่ยมตั้งช่อง) คำนวณ AUC ของตลอดเวลาขยายแล้ว หาร ด้วยจำนวนชั่วโมงที่จะบรรลุค่าที่เหมือนกับวัดเดียวเข้มข้น(AUC/h) ข้อมูลที่ประเมินโดยทั่วไปกระบวนการแบบจำลองเชิงเส้นของ SAS (SAS สถาบัน Inc แครีแกรนต์ NCสหรัฐอเมริกา 2002-2008, 9.2 รุ่น), รวมทั้งการรักษา(HypoG, EuG และ NaCl) เป็นผลถาวร ข้อมูลที่ได้จากตัวอย่างอ้างอิงได้เป็น covariates เป็นรูปแบบการชดเชยสำหรับการเริ่มต้นความแตกต่างระหว่างบุคคลความแตกต่างระหว่างวิธีที่กำหนดโดยการทดสอบ Tukey ข้อมูลจะแสดงเป็นหมายความว่า มาตรฐานข้อผิดพลาดของค่าเฉลี่ย และความแตกต่างถือว่าสำคัญถ้า P < 0.05

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
รายละเอียดของสัตว์และการรักษาของการศึกษาครั้งนี้ได้รับการ
อธิบายไว้ในที่อื่น [9] ในช่วงสั้น ๆ การศึกษาได้ดำเนินการ
ใน 19 ตั้งครรภ์โฮล dairycows ที่เท่าเทียมกันของ 3.0? 0.1
และ 28.0? 0.2 (หมายความว่าอย่างไร SD) สัปดาห์หลังคลอด วัวใน
lactationwere ภายหลังเลือกที่จะสืบสวน allowthe
ผลกระทบโดยตรงจากการแช่การรักษาโดยไม่ต้องรบกวน
กับสมดุลของพลังงานเชิงลบและลักษณะ
ต่อมไร้ท่อและการเปลี่ยนแปลงการเผาผลาญในระหว่างการเปลี่ยนแปลง
ระยะเวลา เริ่มต้นที่ 2 สัปดาห์ก่อนและตลอดการทดลอง,
สัตว์ที่ถูกเลี้ยงด้วยฟางโฆษณา libitum และมีความ
เข้มข้นอุดมไปด้วยโปรตีนและพลังงานวันละสองครั้งตาม
การผลิตนมของแต่ละบุคคล วัวถูกสุ่ม
ได้รับมอบหมายให้ 3 กลุ่มการรักษาทางหลอดเลือดดำปรับ
ฉีดอินซูลินเพื่อก่อให้เกิดภาวะน้ำตาลในเลือดที่น้ำตาลในเลือด
ความเข้มข้น 2.5 mmol / L (HypoG, n ¼ 5),
ยึด hyperinsulinemic-euglycemic ในการรักษาพลาสม่า
เข้มข้นของน้ำตาลกลูโคสที่มีความเข้มข้นในการไหลเวียน
ศึกษาผลกระทบของอินซูลินที่พร้อมกันกลูโคสปกติ
ความเข้มข้น (eug, n¼6) และแช่น้ำเกลือ 0.9% (โซเดียมคลอไรด์,
n¼8) การควบคุมที่มีความเข้มข้นปกติของอินซูลินและ
น้ำตาลกลูโคส เงินทุนและ / หรือที่หนีบเริ่มต้นที่ 9:00 และ
ต่อเนื่องไปจนถึง 9 AM2 d ภายหลังผ่านทางหนึ่งของทรงสถิต
สายสวนทางหลอดเลือดดำ (Cavafix Certo Splittocan, B. Braun
Melsungen AG, เยอรมนี) ขณะ catheterwas ที่สอง
ใช้สำหรับการเก็บตัวอย่างเลือด.
Hyperinsulinemic ภาวะน้ำตาลในเลือดเป็น ที่เกิดจากการฉีด
อินซูลินวัว (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO,
# I4011, ประเทศสหรัฐอเมริกา) อินซูลินอัตราการแช่ถูกปรับเปลี่ยนไปตาม
ความเข้มข้นน้ำตาลในเลือดซึ่งเป็นวัด
ทุก 5 นาทีในครั้งแรก 2 ชั่วโมงและรายชั่วโมงในช่วงต่อไป
แน่นอนของการฉีด ยึด Hyperinsulinemic-euglycemic
ได้ดำเนินการโดยการฉีดอินซูลินที่แช่คงที่
อัตรา 0.6 MU / กก / นาที (ตามแช่เฉลี่ย
อัตรา HypoG) และเพิ่มเติมการควบคุมอย่างต่อเนื่อง
ฉีดกลูโคส (ดร G. Bichsel AG, Interlaken,
วิตเซอร์แลนด์) เพื่อรักษาระดับน้ำตาลในเลือดที่ไหลเวียนความ
เข้มข้นของ ควบคุม (NaCl) วัวถูกอย่างต่อเนื่อง
แน่นด้วยน้ำเกลือ 0.9% ในอัตราที่แช่
20 มิลลิลิตร / ชั่วโมงยาผ่านปั๊มอัตโนมัติ (Perfuser,
B. Braun Melsungen AG).
ตัวอย่างอ้างอิงถูกนำ 1wk และทันที
ก่อนที่จะเริ่ม เงินทุน พลาสม่าเข้มข้นของน้ำตาลกลูโคส
ถูกวัดเอนไซม์ในที่ซ้ำกันด้วยโดยอัตโนมัติ
วิเคราะห์ (Cobas Mira 2 Hoffmann-La Roche, บาเซิล,
สวิตเซอร์) โดยชุดในเชิงพาณิชย์ (bioMerieux ไม่มี. 61270,
มาร์ซี่ Etoile แมง, ฝรั่งเศส, ค่าสัมประสิทธิ์การทั้งในและ interassay ของ
การเปลี่ยนแปลง ( CV) ทั้ง <4%) อินซูลินวัดพลาสม่าใน
ที่ซ้ำกันโดย radioimmunoassay ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้
[10] กับทั้งในและ interassay CV 8.2% และ 15.5% ตามลำดับ
และความเข้มข้นของพลาสม่า glucagon ถูกวัด
ในที่ซ้ำกันโดยใช้ชุด radioimmunoassay เชิงพาณิชย์
(แมว. # GL-32K, MILLIPORE ซุกวิตเซอร์แลนด์ทั้งในและ
interassay CV 4.0% และ 12.5% ​​ตามลำดับ).
พื้นที่ใต้เส้นโค้ง (AUC) ของตัวแปรที่วัด
ในช่วงวันที่ 2 ของการทดลองที่คำนวณได้จาก
กฎสี่เหลี่ยมคางหมู (การรวมกันของรูปสี่เหลี่ยมและสามเหลี่ยม
ช่องพื้นที่) AUC ที่คำนวณได้จากตลอดเวลา
ช่วงและหารด้วยจำนวนชั่วโมงเพื่อให้เกิด
คุณค่าที่มีความคล้ายคลึงกับการวัดความเข้มข้นเดียว
(AUC / เอช) ข้อมูลได้รับการประเมินโดยใช้ทั่วไป
แบบจำลองเชิงเส้นขั้นตอนของ SAS (SAS Institute Inc, แครี, NC,
สหรัฐอเมริกา, 2002-2008, Release 9.2) รวมทั้งการรักษา
(HypoG, eug และโซเดียมคลอไรด์) เป็นผลกระทบคงที่ ข้อมูลที่ได้จาก
ตัวอย่างการอ้างอิงได้รวมเป็นตัวแปรเข้ามาใน
รูปแบบที่จะชดเชยความแตกต่างระหว่างบุคคลเริ่มต้น.
ความแตกต่างระหว่างวิธีการที่ถูกกำหนดโดย
การทดสอบ Tukey ข้อมูลจะถูกนำเสนอเป็นวิธี? มาตรฐาน
ข้อผิดพลาดของค่าเฉลี่ยและความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญได้รับการพิจารณา
ถ้า p <0.05

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
รายละเอียดของสัตว์และการรักษาของการวิจัย
อธิบายที่อื่น [ 9 ] ในช่วงสั้น ๆ , การศึกษา
19 nonpregnant โฮลสไตน์ dairycows ในความเท่าเทียมกันของ 3.0 
ที่ 28  0.2 และ 0.1 ( หมายถึง  SD ) สัปดาห์หลังคลอด วัว
ต่อมา lactationwere เลือก allowthe การศึกษาผลของยารักษาโรคโดยตรง โดยไม่มีสัญญาณรบกวน
กับความสมดุลของพลังงานเชิงลบและต่อมไร้ท่อและการเผาผลาญอาหารลักษณะ
เปลี่ยนแปลงในช่วงระยะเวลาการเปลี่ยนแปลง

เริ่มต้นที่ 2 สัปดาห์ก่อนและตลอดการทดลอง
สัตว์ได้รับหญ้าแห้งและหยาบโฆษณากับ
เข้มข้นที่อุดมไปด้วยโปรตีนและพลังงานวันละสองครั้งตาม
เพื่อการผลิตนมของแต่ละบุคคล วัวถูกสุ่ม
มอบหมายให้ 3 กลุ่ม :
ปรับฉีดอินซูลินฉีดเพื่อก่อให้เกิดภาวะน้ำตาลในเลือดต่ำในพลาสมากลูโคส
ความเข้มข้น 2.5 mmol / L ( hypog N ¼ 5 ) ,

hyperinsulinemic หนีบ euglycemic รักษาพลาสมากลูโคสความเข้มข้นที่ preinfusion ความเข้มข้น

ศึกษาผลของอินซูลินที่พร้อมกันปกติกลูโคสความเข้มข้น ( eug
, N ¼ 6 ) และ 0.9% ) เกลือ ( NaCl
n ¼ 8 ) เป็นตัวควบคุมที่มีความเข้มข้นปกติของอินซูลินและ
กลูโคส ช่วง และ / หรือ แหนบเริ่ม 9 โมงเช้าและ
อย่างต่อเนื่องจนถึง 9 แบบ D ในภายหลังผ่านทางสายสวนหลอดเลือดดำซึ่งคาไว้ในท่อปัสสาวะ
( cavafix แน่ใจ splittocan บี บราวน์
เมลล์ซุนเก่น AG , Germany ) ส่วนที่สองใช้ตัวอย่างเลือด catheterwas
.
hyperinsulinemic hypoglycemia คือการฉีดอินซูลิน ( ซิกม่า Aldrich
ของวัว , เซนต์ หลุยส์ โม
# i4011 , USA )อินซูลินฉีดราคาได้ปรับตาม
กับพลาสมากลูโคสมีปริมาณที่ถูกวัด
ทุก 5 นาที ใน 2 ชั่วโมงแรกและรายชั่วโมงในหลักสูตรเพิ่มเติม
ของ infusion hyperinsulinemic euglycemic หนีบ
โดยใช้อินซูลินฉีดในอัตรา infusion
คงที่ 0.6 MU / กิโลกรัม / นาที ( ตามอัตราค่าใช้จ่ายเฉลี่ยใน hypog

) และเพิ่มอย่างต่อเนื่อง เป็นระเบียบฉีดกลูโคส ( Dr . bichsel AG , Interlaken ,
สวิตเซอร์แลนด์ ) เพื่อรักษาระดับน้ำตาลใน preinfusion
เข้มข้น การควบคุม ( NaCl ) วัวอย่างต่อเนื่อง
infused กับ 0.9% น้ำเกลือที่แช่ในอัตรา 20 มล. / H
ภายใต้การปั๊มแบบอัตโนมัติ ( perfuser
B Braun , เมลล์ซุนเก่น AG ) .
การอ้างอิงตัวอย่างถ่าย 1wk ทันที
ก่อนที่จะเริ่มต้นของช่วง .พลาสมากลูโคสความเข้มข้น
วัด enzymatically ในซ้ำกับอัตโนมัติ
วิเคราะห์ ( cobas มิร่า 2 , ฮอฟแมน ลา โรช บาเซิล , สวิสเซอร์แลนด์ ,
) โดยชุดพาณิชย์ ( biomerieux ไม่ 61270
, มาร์ l'etoile ฝรั่งเศส ภายในและ interassay ค่าสัมประสิทธิ์ของความผันแปร ( CV )
2 < 4 % ) อินซูลินในพลาสมาจะถูกวัดซ้ำด้วย

radioimmunoassay ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้[ 10 ] กับภายในและ interassay CV 8.2 % และ 15.5 ตามลำดับ และความเข้มข้นของพลาสมา glucagon วัด

ในซ้ำโดยใช้ radioimmunoassay พาณิชย์ชุด
( แมว gl-32k มิลลิ# , Zug , สวิตเซอร์แลนด์ , อินทรา -
interassay CV 4.0% และ 12.5 ตามลำดับ ) .
พื้นที่ใต้เส้นโค้ง ( โต ) แห่งวัดตัวแปร
ในระหว่างวันที่ 2 ของการทดลองคำนวณโดย
กฎสี่เหลี่ยมคางหมู ( การรวมกันของพื้นที่สี่เหลี่ยมและสามเหลี่ยม
ช่อง ) ค่าคำนวณของช่วงเวลา
ทั้งหมดแล้วหารด้วยจำนวนชั่วโมงเพื่อให้บรรลุ
ค่าซึ่งคล้ายกับของการวัดเดียว
( ยา / H ) ข้อมูล ได้แก่ การใช้ตัวแบบเชิงเส้นทั่วไป
ขั้นตอนของแซส ( SAS Institute Inc , แครี่ , NC
สหรัฐอเมริกา 2002 – 2008 รุ่น 9.2 ) รวมทั้งการรักษา
( hypog eug , และ NaCl ) เป็นถาวรผล ข้อมูลอ้างอิงจาก
จำนวนรวมเป็นความรู้ในรูปแบบการชดเชยความแตกต่าง

เริ่มต้นระหว่างบุคคล หมายถึง ถูกกำหนดโดยความแตกต่างระหว่าง
ทดสอบทดสอบ ข้อมูลที่แสดงเป็นค่าเฉลี่ยมาตรฐาน
 ความคลาดเคลื่อนของค่าเฉลี่ย และแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญที่ P < 0.05 ถือว่า
ถ้า .