MATERIALS AND METHODS
Bacterial strains used and precultivation. The verotoxin-negative Escherichia coli O157 (NENT 2540-04; National Centre for Enteropathogenic Bacteria [NENT], Lucerne, Switzerland), Vibrio cholerae O1 Ogawa biotype El Tor(NENT 720-95), and Pseudomonas aeruginosa (BCCM/LMG 14073; University
of Ghent, Belgium) were kept at 80°C before use. The cryocultures were streaked onto tryptic soy agar plates (Bio-Rad, Reinach, Switzerland) and incubated for 24 h at 37°C. One colony was transferred with a loop into Luria-Bertani(LB) broth (10 g liter1 tryptone [Applichem, Darmstadt, Germany], diluted 10 times 5 g liter1yeast extract [Biolife, Milan, Italy], 10 g liter1
NaCl [Fluka Chemie AG, Buchs, Switzerland]), and the culture was incubated overnight at
37°C. Cells from this overnight culture (initial concentration of 5 103 cell sml1) were transferred into LB medium diluted 10,000 times, incubated for 4 days at 30°C until the cells reached stationary phase and subsequently used asinoculum. Fresh inocula were prepared for each experiment
วิธีการและวัสดุ
precultivation และสายพันธุ์แบคทีเรียที่ใช้ การลบ verotoxin Escherichia coli O157 (NENT 2540-04 แห่งชาติศูนย์ Enteropathogenic แบคทีเรีย [NENT], ลูเซิร์น สวิตเซอร์แลนด์), ผล cholerae โอะงะวะ O1 biotype เอล Tor(NENT 720-95) และ Pseudomonas aeruginosa (BCCM/LMG 14073 มหาวิทยาลัย
เบลเยียม เกนต์) ถูกเก็บไว้ที่ 80 ° C ก่อนที่จะใช้ Cryocultures มีลายบนแผ่น agar tryptic ซอย (Bio Rad, Reinach สวิตเซอร์แลนด์) และ incubated สำหรับ 24 ชมที่ 37 องศาเซลเซียส ฝูงหนึ่งถูกโอนย้าย โดยวนเป็นซุป Luria-Bertani(LB) (tryptone ลิตร 1 10 g [Applichem ดาร์มส เยอรมนี], ผสม 10 ครั้ง 5 กรัมลิตร 1yeast สารสกัด [Biolife มิลาน อิตาลี], 10 g ลิตร 1
NaCl [Fluka Chemie AG, Buchs สวิตเซอร์แลนด์]), และวัฒนธรรมถูก incubated ค้างคืนที่
37 องศาเซลเซียส เซลล์จากวัฒนธรรมนี้ค้างคืน (เริ่มต้นความเข้มข้นของเซลล์ 5 103 sml 1) มีการถ่ายโอนเป็นป.กลางผสม 10000 ครั้ง incubated 4 วันที่ 30° C จนกว่าเซลล์ถึงระยะเครื่องเขียน และต่อมาใช้ asinoculum Inocula สดถูกเตรียมไว้สำหรับแต่ละการทดลอง
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
MATERIALS AND METHODS
Bacterial strains used and precultivation. The verotoxin-negative Escherichia coli O157 (NENT 2540-04; National Centre for Enteropathogenic Bacteria [NENT], Lucerne, Switzerland), Vibrio cholerae O1 Ogawa biotype El Tor(NENT 720-95), and Pseudomonas aeruginosa (BCCM/LMG 14073; University
of Ghent, Belgium) were kept at 80°C before use. The cryocultures were streaked onto tryptic soy agar plates (Bio-Rad, Reinach, Switzerland) and incubated for 24 h at 37°C. One colony was transferred with a loop into Luria-Bertani(LB) broth (10 g liter1 tryptone [Applichem, Darmstadt, Germany], diluted 10 times 5 g liter1yeast extract [Biolife, Milan, Italy], 10 g liter1
NaCl [Fluka Chemie AG, Buchs, Switzerland]), and the culture was incubated overnight at
37°C. Cells from this overnight culture (initial concentration of 5 103 cell sml1) were transferred into LB medium diluted 10,000 times, incubated for 4 days at 30°C until the cells reached stationary phase and subsequently used asinoculum. Fresh inocula were prepared for each experiment
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
วัสดุและวิธีการ
สายพันธุ์แบคทีเรียที่ใช้และ precultivation . การ verotoxin ลบ Escherichia coli ( 2540-04 เป็นสมาชิกถาวร ; ศูนย์ enteropathogenic แบคทีเรีย [ ถาวร ] , ลูเซิร์น , สวิตเซอร์แลนด์แห่งชาติ ) , Vibrio cholerae 01 โอกาว่า ไบโอไทป์ El Tor ( ถาวร 720-95 ) และ Pseudomonas aeruginosa ( bccm / lmg 14073 ; มหาวิทยาลัย
ของ Ghent , เบลเยียม ) ถูกเก็บไว้ที่ 80 องศา C ก่อนใช้การ cryocultures ลายลงบนอาหารวุ้นถั่วเหลืองแผ่น ( ไบโอ ราด Reinach , สวิตเซอร์แลนด์ ) และบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศา ฝูงหนึ่งถูกย้ายด้วยห่วงเข้าไปลุเรียแบร์ตานิ ( LB ) น้ำซุป 10 กรัมต่อลิตร 1 ทริพโทน [ applichem ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี , ] , เจือจาง 10 เท่า สารสกัดจาก 1yeast ลิตร 5 กรัม [ biolife , มิลาน , อิตาลี ) 10 กรัม เกลือ 1 ลิตร
[ fluka CHEMIE AG , buchs สวิตเซอร์แลนด์ ] )และวัฒนธรรมที่ถูกบ่มค้างคืนที่
37 องศา เซลล์จากวัฒนธรรมค้างคืน ( ความเข้มข้นเริ่มต้นของ 5 103 เซลล์ SML 1 ) ถูกย้ายไปเป็นปอนด์ขนาดกลางเจือจาง 10000 ครั้ง บ่มเป็นเวลา 4 วัน ที่ 30 ° C จนกระทั่งเซลล์ถึงระยะ stationary และต่อมาใช้ asinoculum . inocula สดเตรียมไว้สำหรับแต่ละการทดลอง
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)