Reversed-phase high-performance liq

Reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC)
involves the separation of molecules on the basis of hydrophobicity. The separation
depends on the hydrophobic binding of the solute molecule from the
mobile phase to the immobilized hydrophobic ligands attached to the stationary
phase, i.e., the sorbent. A schematic diagram showing the binding of a peptide
or a protein to a reversed-phase surface is shown in Fig. 1. The solute
mixture is initially applied to the sorbent in the presence of aqueous buffers, and
the solutes are eluted by the addition of organic solvent to the mobile phase.
Elution can proceed either by isocratic conditions where the concentration of
organic solvent is constant, or by gradient elution whereby the amount of organic
solvent is increased over a period of time. The solutes are, therefore, eluted in
order of increasing molecular hydrophobicity. RP-HPLC is a very powerful
technique for the analysis of peptides and proteins because of a number of factors
that include: (1) the excellent resolution that can be achieved under a wide
range of chromatographic conditions for very closely related molecules as well
as structurally quite distinct molecules; (2) the experimental ease with which
chromatographic selectivity can be manipulated through changes in mobile
phase characteristics; (3) the generally high recoveries and, hence, high productivity;
and (4) the excellent reproducibility of repetitive separations carried
out over a long period of time, which is caused partly by the stability of the sorbent
materials under a wide range of mobile phase conditions (1,2). However,
RP-HPLC can cause the irreversible denaturation of protein samples thereby
reducing the potential recovery of material in a biologically active form.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ระยะกลับมีประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (RP HPLC)เกี่ยวข้องกับการแยกของโมเลกุลตาม hydrophobicity แยกขึ้นอยู่กับการรวม hydrophobic ของโมเลกุลตัวถูกละลายจากการขั้นตอนที่มือถือให้ ligands hydrophobic เอนไซม์กับการเขียนเฟส เช่น การดูดซับ ไดอะแกรมแผนผังตัวอย่างแสดงการรวมของเพปไทด์หรือโปรตีนเพื่อผิวระยะย้อนกลับจะแสดงใน Fig. 1 ตัวเริ่มมีใช้ส่วนผสมเพื่อดูดซับในต่อหน้าของบัฟเฟอร์อควี และsolutes ในมี eluted ด้านนอกของตัวทำละลายอินทรีย์ระยะเคลื่อนElution สามารถดำเนินการอย่างใดอย่างหนึ่งตามเงื่อนไข isocratic คิดที่ความเข้มข้นของตัวทำละลายอินทรีย์เป็นการคง หรือ โดยไล่ระดับ elution โดยจำนวนของอินทรีย์ตัวทำละลายจะเพิ่มระยะเวลา Solutes ใน ดังนั้น eluted ในสั่งของเพิ่ม hydrophobicity โมเลกุล RP HPLC จะมีประสิทธิภาพมากเทคนิคในการวิเคราะห์ของเปปไทด์และโปรตีนเนื่องจากปัจจัยที่มี: (1) การแก้ปัญหาที่ดีที่สามารถทำได้ภายใต้เป็นช่วงของเงื่อนไข chromatographic สำหรับโมเลกุลที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดเช่นเป็นโมเลกุล structurally ค่อนข้างแตกต่างกัน (2)ความง่ายในการทดลองที่สามารถจัดการใว chromatographic ผ่านโทรศัพท์มือถือที่เปลี่ยนแปลงลักษณะระยะ (3 recoveries)โดยทั่วไปสูง และ จึง ประสิทธิภาพสูงและ (4) ดำเนิน reproducibility แห่งของประโยชน์ซ้ำเช็คระยะยาวของเวลา ซึ่งเกิดจากความมั่นคงของการดูดซับบางส่วนผลิตภายใต้หลากหลายสภาพเฟสเคลื่อนที่ (1, 2) อย่างไรก็ตามRP HPLC อาจทำให้เกิด denaturation ให้โปรตีนตัวอย่างดังนั้นจึงลดการฟื้นตัวเป็นไปได้ของวัสดุในรูปแบบชิ้นงาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เฟส Reversed ประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (RP-HPLC)
ที่เกี่ยวข้องกับการแยกตัวของโมเลกุลบนพื้นฐานของ hydrophobicity แยก
ขึ้นอยู่กับที่ไม่ชอบน้ำผูกพันของโมเลกุลตัวถูกละลายจาก
เฟสเคลื่อนที่ไปยังแกนด์ไม่ชอบน้ำตรึงติดอยู่กับเครื่องเขียน
ขั้นตอนคือตัวดูดซับ แผนภาพแสดงผลผูกพันของเปปไทด์
หรือโปรตีนเพื่อผิวเฟสย้อนกลับไปแสดงในรูป 1. ละลาย
ผสมถูกนำไปใช้ในขั้นต้นจะดูดซับในการปรากฏตัวของบัฟเฟอร์น้ำและ
สารที่มีการชะโดยนอกเหนือจากตัวทำละลายอินทรีย์เพื่อเฟสเคลื่อนที่.
ชะสามารถดำเนินการอย่างใดอย่างหนึ่งตามเงื่อนไข Isocratic ที่ความเข้มข้นของ
ตัวทำละลายอินทรีย์เป็นค่าคงที่ หรือโดยการชะลาดโดยปริมาณของอินทรีย์
ตัวทำละลายจะเพิ่มขึ้นในช่วงเวลา สารจะดังนั้นชะใน
การสั่งซื้อที่เพิ่มขึ้นของไฮโดรโมเลกุล RP-HPLC เป็นที่มีประสิทธิภาพมาก
เทคนิคสำหรับการวิเคราะห์ของเปปไทด์และโปรตีนเพราะจำนวนของปัจจัย
ที่มี: (1) ความละเอียดที่ยอดเยี่ยมที่สามารถทำได้ภายใต้กว้าง
ช่วงของเงื่อนไขสารโมเลกุลที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดเช่นกัน
เป็นโครงสร้าง โมเลกุลที่แตกต่างกันมาก; (2) ความสะดวกในการทดลองกับที่
โครมาหัวกะทิสามารถจัดการผ่านการเปลี่ยนแปลงในมือถือของ
ลักษณะเฟส (3) การฟื้นตัวสูงโดยทั่วไปแล้วดังนั้นการผลิตสูง
และ (4) การทำสำเนาที่ดีของการแยกซ้ำดำเนิน
ออกไปเป็นระยะเวลานานของเวลาซึ่งมีสาเหตุส่วนหนึ่งจากความมั่นคงของตัวดูดซับ
วัสดุภายใต้ความหลากหลายของโทรศัพท์มือถือ สภาวะเฟส (1,2) อย่างไรก็ตาม
RP-HPLC สามารถทำให้เกิดการสูญเสียสภาพธรรมชาติกลับไม่ได้ของกลุ่มตัวอย่างโปรตีนจึง
ลดการกู้คืนที่มีศักยภาพของวัสดุในรูปแบบที่ใช้งานทางชีวภาพ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กลับเฟส high-performance liquid chromatography ( ๆ )
เกี่ยวข้องกับการแยกโมเลกุลบนพื้นฐานของความไม่ชอบ . การแยก
ขึ้นอยู่กับ ) ผูกพันของตัวทำละลายโมเลกุลจาก
เฟสเคลื่อนที่เพื่อตรึง ) ลิแกนด์แนบนิ่ง
เฟส คือ ดูดซับ . เป็นแผนภาพแสดงการเชื่อมโยงของเปปไทด์
หรือโปรตีนที่เป็น reversed-phase พื้นผิวที่แสดงในรูปที่ 1 ตัวละลาย
ผสมใช้ในขั้นแรกที่จะดูดซับในการปรากฏตัวของสารละลายบัฟเฟอร์ และตัวถูกละลายเป็น
ตัวอย่างโดยการเติมตัวทำละลายอินทรีย์ในเฟสเคลื่อนที่
( สามารถดำเนินการอย่างใดอย่างหนึ่งโดย Isocratic ที่มีความเข้มข้นของตัวทำละลายอินทรีย์
คงที่ หรือโดยการใช้ปริมาณของอินทรีย์
โดยตัวทำละลายจะเพิ่มขึ้นในช่วงเวลา ในสารละลายจึงมีตัวอย่างใน
สั่งเพิ่มโมเลกุลไม่ชอบ . ๆเป็นเทคนิคที่มีประสิทธิภาพมากสำหรับการวิเคราะห์
เปปไทด์และโปรตีน เนื่องจากจำนวนของปัจจัย
ซึ่งรวมถึง : ( 1 ) ยอดเยี่ยมความละเอียดที่สามารถเกิดขึ้นได้ภายใต้เงื่อนไข และสำหรับช่วงกว้าง

โมเลกุลที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดเช่นกันเป็นโครงสร้างโมเลกุลค่อนข้างชัดเจน ( 2 ) ทดลองง่าย ซึ่งสามารถจัดการและเลือกสรร
ผ่านการเปลี่ยนแปลงในลักษณะของเฟสเคลื่อนที่
; ( 3 ) โดยทั่วไปจะสูงขั้นและดังนั้นประสิทธิภาพสูง ;
( 4 ) การตรวจสอบที่ดีของซ้ำแยกอุ้ม
ออกไปในช่วงระยะเวลาที่ยาวนานของเวลา ซึ่ง มีสาเหตุส่วนหนึ่งจากความมีเสถียรภาพของการดูดซับ
วัสดุภายใต้หลากหลายของเงื่อนไขเฟสเคลื่อนที่ ( 2 ) อย่างไรก็ตาม
ๆอาจทําให้ ( ได้ตัวอย่างโปรตีนจึง
ลดการกู้คืนที่มีศักยภาพของวัสดุในรูปแบบทางชีวภาพที่ใช้งานอยู่