Experimental Section
General Experimental Procedures. The instruments for measure- ments of the optical rotations, UV spectra, CD spectra, NMR spectra, and mass spectra used in this study were the same as those cited in the previous reports.1,14 Normal-phase HPLC was conducted on a YMC- Pack SIL A-003 (YMC, Kyoto, Japan) column (4.6 i.d. × 250 mm) developed with n-hexane/MeOH/THF/HCO2H (47:39:13:1) containing oxalic acid (450 mg/L) (flow rate, 1.5 mL/min; 280 nm UV detection) at room temperature. Analytical reversed-phase HPLC was performed on a YMC-Pack ODS-A A-303 column (4.6 i.d. × 250 mm) eluted with 0.01 M H3PO4/0.01 M KH2PO4/MeOH (2:2:1) (flow rate, 1 mL/ min; 280 nm UV detection) at 40 °C. Preparative reversed-phase HPLC was performed at 40 °C on a YMC-Pack ODS-A A-324 column (10 i.d. × 300 mm) using 0.01 M H3PO4/0.01 M KH2PO4/MeOH [either 2:2:1 (solvent I) or 41.5:41.5:17 (solvent II)], at a flow rate of 2 mL/ min with detection at 280 nm UV. The tumor cell lines were obtained from Riken Bioresource Center, Tsukuba, Ibaraki, Japan. The normal cells were prepared from periodontal tissues, according to the guidelines of the institutional board of Meikai University Ethics Committee (no. 0707) after obtaining informed consent from the patients. Because HGF, HPC, and HPLF cells have a limited lifespan due to in vitro senescence, these cells were used at a population doubling level of 5-8. Plant Material. Leaves of T. nilotica were collected at Al-Wadi Al-Assiuty, 20 km northeast of Assiut city, Egypt, in October 2006, and identified by Prof. Mo’men Mostafa Zareh, Department of Botany, Faculty of Science, Assiut University. A voucher specimen (No. 1024) is deposited in the same department. Extraction and Isolation. The 40% aqueous MeOH fraction (10.4 g), which was obtained from the chromatographic fractionation of a 70% aqueous acetone homogenate of T. nilotica dried leaves (200 g) on a Diaion HP-20 column, was chromatographed over a Toyopearl HW-40 (coarse) column as described previously.1,14 The Toyopearl fractions (Tfrs) 20-23, eluted with 70% EtOH(aq), afforded crude
ส่วนการทดลองกระบวนการทดลองทั่วไป เครื่องมือสำหรับวัด ments หมุนเวียนแสง แรมสเป็คตรา UV ซีดีแรมสเป็คตรา แรมสเป็คตรา NMR และแรมสเป็คตรามวลที่ใช้ในการศึกษานี้เดียวกับที่อ้างใน reports.1,14 ก่อนหน้านี้ที่คอลัมน์ YMC - Pack A ภาษาศาสตร์-003 (YMC เกียวโต ญี่ปุ่น) วิธี HPLC ระยะปกติ (ประชาชน 4.6 × 250 มม.) พัฒนา ด้วยเอ็นเฮกเซน/ทา นอ/THF/HCO2H (47:39:13:1) ที่ประกอบด้วยกรดออกซาลิก (450 mg/L) (อัตรา flow , 1.5 mL/min 280 nm UV ตรวจ) ที่อุณหภูมิห้อง ทำการวิเคราะห์ HPLC ขั้นตอนย้อนกลับบนคอลัมน์ YMC Pack ODS-A A-303 (ประชาชน 4.6 × 250 มม.) eluted กับ 0.01 M H3PO4/0.01 M KH2PO4/ทา นอ (2:2:1) (อัตรา flow, 1 mL/min, 280 nm UV ตรวจ) ที่ 40 องศาเซลเซียส ทำขั้นตอนย้อนกลับ preparative HPLC ที่ 40 ° C ในคอลัมน์ YMC Pack ODS-A A-324 (ประชาชน 10 × 300 มม.) ใช้ 0.01 M H3PO4/0.01 M KH2PO4/ทา นอ [ทั้ง 2:2:1 (ตัวทำละลายฉัน) หรือ 41.5:41.5:17 (ตัวทำละลาย II)], ในอัตรา flow 2 mL/min ด้วยการตรวจหารายการที่ 280 nm รังสียูวี รายการเซลล์เนื้องอกได้รับมาจาก ศูนย์ Bioresource เก้น อวกาศสึกุบะ อิบารากิ ญี่ปุ่น เซลล์ปกติที่เตรียมจากเนื้อเยื่อโรคเหงือก ตามแนวทางของคณะกรรมการจรรยาบรรณมหาวิทยาลัย Meikai (หมายเลข 0707) สถาบันหลังจากรับแจ้งความยินยอมจากผู้ป่วย เนื่องจากเซลล์ HGF, HPC และ HPLF มีอายุจำกัดเนื่องจากการเพาะเลี้ยง senescence เซลล์เหล่านี้ถูกใช้ในประชากรจะระดับ 5-8 วัสดุโรงงาน ของต.นิลถูกเก็บรวบรวมที่ Al วดี Al-Assiuty, 20 กม.ตะวันออกเฉียงเหนือของเมือง Assiut ประเทศ อียิปต์ ตุลาคม 2549 และ identified โดยศาสตราจารย์ Mo'men Mostafa Zareh ภาควิชา พฤกษศาสตร์ คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัย Assiut ตัวอย่างใบสำคัญ (หมายเลข 1024) มีการฝากเงินในแผนกเดียวกัน สกัดและแยก 40% อควีทานอเศษส่วน (10.4 กรัม), ซึ่งได้รับจากแยกส่วน chromatographic ของ homogenate 70% อะซิโตนอควีต.นิลแห้งใบไม้ (200 กรัม) ในคอลัมน์ Diaion HP-20 ที่ chromatographed มากกว่า Toyopearl HW-40 (หยาบ) คอลัมน์เป็นค่าเศษส่วน Toyopearl previously.1,14 อธิบาย (Tfrs) 20-23, eluted 70% EtOH(aq) นี่ดิบ
การแปล กรุณารอสักครู่..

ทดลองส่วน
ทั่วไปทดลองวิธี เครื่องมือวัด - ments ของการหมุนแสงยูวีซีดีสเปกตรัม NMR สเปกตรัม , สเปกตรัม , สเปกตรัมและมวลที่ใช้ในการศึกษา คือ เหมือนกับที่อ้างไว้ในรายงานก่อนหน้านี้ 1,14 HPLC ระยะปกติ ทำการศึกษาใน ymc - แพ็คซิล a-003 ( ymc , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) คอลัมน์ ( 4.6 ระบุ× 250 มม. ) พัฒนาขึ้นด้วย / / / hco2h บีบปริมาณเตตระไฮโดรฟูแรน ( 47:39:13 :กรดออกซาลิก ( 1 ) บรรจุ 450 mg / L ) ( flโอ๊ยอัตรา 1.5 มิลลิลิตรต่อนาที ; 280 nm ยูวีตรวจจับ ) ที่อุณหภูมิห้อง วิเคราะห์ reversed-phase HPLC แสดงบน ymc แพ็ค ods-a a-303 คอลัมน์ ( 4.6 ระบุ× 250 มม. ) ตัวอย่างกับ 0.01 M HCl / 0.01 M kh2po4 / เมทิลแอลกอฮอล์ ( ที่มี ) ( flโอ๊ยอัตรา 1 มิลลิลิตรต่อนาที ; 280 nm ยูวีตรวจจับ ) ที่ 40 องศาเตรียมการ reversed-phase HPLC ที่ 40 ° C ใน ymc แพ็ค ods-a a-324 คอลัมน์ ( 10 ไอดี× 300 มม. ) ใช้ 0.01 M HCl / 0.01 M kh2po4 / เมทิลแอลกอฮอล์ [ เหมือนกันที่มี ( ตัวทำละลาย ) หรือ 41.5:41.5:17 ( ตัวทำละลาย 2 ) ] , ที่flโอ๊ยอัตรา 2 มิลลิลิตรต่อนาทีกับการตรวจสอบที่ 280 nm ยูวี . เนื้องอกเซลล์มะเร็งที่ได้จากศูนย์ทรัพยากรชีวภาพ riken สึกุบะ , ญี่ปุ่นเซลล์ปกติที่เตรียมจากเนื้อเยื่อปริทันต์ ตามแนวทางของคณะกรรมการสถาบันของคณะกรรมการจรรยาบรรณมหาวิทยาลัยเมย์ไค ( ไม่ 0707 ) หลังจากที่ได้รับความยินยอมจากผู้ป่วย เพราะด้วย สูงมาก และ hplf เซลล์มีอายุการใช้งาน จำกัด เนื่องจากการเกิดเซลล์เหล่านี้ถูกใช้ในประชากรตามระดับ 5-8 . วัสดุพืช ใบของด้วยการเก็บรวบรวมอัลวาดีอัล assiuty 20 กิโลเมตรตะวันออกเฉียงเหนือของ assiut เมือง อียิปต์ ในเดือนตุลาคม 2006 และ identi จึงเอ็ด โดย ศ. ดร. mo'men ถ้าคน zareh ภาควิชาพฤกษศาสตร์ คณะวิทยาศาสตร์ assiut มหาวิทยาลัย คูปองตัวอย่าง ( ไม่เต็ม ) จะฝากในแผนกเดียวกัน การสกัดและการแยก . 40 % ส่วนปริมาณน้ำ ( 5 กรัม )ซึ่งได้มาจากการแยกสารละลายอะซิโตนและ 70% ของปริมาณของ ด้วยใบไม้แห้ง ( 200 กรัม ) ใน diaion hp-20 คอลัมน์ คือ chromatographed กว่า toyopearl hw-40 ( หยาบ ) คอลัมน์ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ 1,14 ที่ toyopearl เศษส่วน ( ฉบับที่ 20 ตัวอย่าง ) , 70% แอลกอฮอล์ ( AQ ) เจ้าตัวดิบ
การแปล กรุณารอสักครู่..
