2.5.2. HPLC analysisThe tocols were

2.5.2. HPLC analysis
The tocols were quantified according to the method reported by Lampi et al. (2004) with some modification. Tocols were separated by a normal phase HPLC using a GRACE Altima HP Silica
150 _ 3 mm, 3 micron column and quantified with a fluorescence detector (NP-HPLC–FLD) with an excitation wavelength of 290 nm and an emission wavelength of 325 nm. The mobile phase
was 1,4-dioxane/n-hexane (2:98, v/v) at a flow rate of 1 mL/min. Separation of tocols was based on isocratic elution (Lampi et al., 2004). The quantity of the individual vitamin E isomers in samples was
calculated by the use of calibration curves for all standard isomers. Tocopherol (T) standards (a-, b-, c-, d-T) and tocotrienol (T3) standards (a-, b-, c-, d-T3) were purchased from Cayman Chemical,
USA, while n-hexane, ethyl acetate, ascorbic acid and DPPH (2,2- diphenyl-1-picrylhydrazyl) were from Chem-Supply Pty. Ltd., Australia. Standard stock solutions were prepared to a concentration
of 500 lg/mL in hexane. Calibration curves for all isomers were prepared over the concentration range of 1.0–25.0 lg/mL using GenStat 14 (Lawes Agricultural Trust; VSN International, Ltd., Hemel Hempstead, UK). Barley extractions and standard isomers were injected into the HPLC machine separately. Identification of peaks in barley samples was made based on the retention time when compared with standard peaks. Curves between standard peaks and standard contents
were used to calculate contents of isomers in barley samples. The vitamin E content, expressed in mg of a-tocopherol-equivalents (TE), was calculated according to Mclaughlin and Weihrauch
(1979) using biological activities of 1.0 for a-T, 0.3 for a-T3, 0.4 for b-T, 0.05 for b-T3, 0.1 for c-T, 0.01 for c-T3 and 0.01 for d-T (a- TE = a-T * 1.0 + a-T3 * 0.3 + b-T * 0.4 + b-T3 * 0.05 + c-T * 0.1 + c-T3
* 0.01 + d-T * 0.01).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5.2 การวิเคราะห์ HPLC
โตคอถูกวัดตามวิธีการรายงานโดยลัมพี, et al (2004) ที่มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง โตคอถูกคั่นด้วย HPLC เฟสปกติใช้ GRACE Altima HP ซิลิกา
150 มม _ 3 คอลัมน์ 3 ไมครอนและมีเครื่องตรวจจับวัดเรืองแสง (NP-HPLC-FLD) ที่มีความยาวคลื่นกระตุ้น 290 นาโนเมตรและปล่อยความยาวคลื่น 325 นาโนเมตร เฟสเคลื่อนที่เป็น 1,4-dioxane / n-เฮกเซน (2:98, v / v) ที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที
แยกโตคออยู่บนพื้นฐานของชะ isocratic (ลัมพี et al., 2004) ปริมาณของสารอินทรีย์วิตามินอีในแต่ละกลุ่มตัวอย่างได้รับการคำนวณโดยการใช้เส้นโค้งการสอบเทียบสำหรับทุกไอโซเมอมาตรฐาน
โทโคฟีรอ (T) มาตรฐาน (a-, B-, c-, dT) และ tocotrienol (T3) มาตรฐาน (a-, B-, c-, D-T3)
ที่ซื้อมาจากเคย์แมนเคมีสหรัฐอเมริกาในขณะที่n-เฮกเซน เอทิลอะซิเตวิตามินซีและ DPPH (2,2- diphenyl-1-picrylhydrazyl) จาก Chem-Supply Pty. จำกัด , ออสเตรเลีย มาตรฐานการแก้ปัญหาสต็อกพร้อมที่จะมีความเข้มข้นของแอลจี 500 / มิลลิลิตรในเฮกเซน
เส้นโค้งการสอบเทียบสำหรับสารอินทรีย์ทั้งหมดถูกจัดทำขึ้นในช่วงความเข้มข้นของ 1.0-25.0 ๆ lg / mL ใช้ GenStat 14 (Lawes การเกษตรเชื่อถือ; VSN อินเตอร์เนชั่นแนล จำกัด , Hemel Hempstead สหราชอาณาจักร) สกัดข้าวบาร์เลย์และสารอินทรีย์มาตรฐานถูกฉีดเข้าไปในเครื่อง HPLC แยกต่างหาก บัตรประจำตัวของยอดเขาในตัวอย่างข้าวบาร์เลย์ที่ถูกทำขึ้นอยู่กับเวลาการเก็บรักษาเมื่อเทียบกับยอดมาตรฐาน เส้นโค้งระหว่างยอดมาตรฐานและเนื้อหามาตรฐานถูกนำมาใช้ในการคำนวณเนื้อหาของสารอินทรีย์ในตัวอย่างข้าวบาร์เลย์
เนื้อหาวิตามินอีมิลลิกรัมของโทโคฟีรอเทียบเท่า (TE) ที่คำนวณได้ตาม Mclaughlin และ Weihrauch
(1979) โดยใช้กิจกรรมทางชีวภาพของ 1.0 AT, 0.3 สำหรับ-T3 0.4 สำหรับ BT, 0.05 สำหรับ B- T3 0.1 สำหรับ CT, 0.01 ค T3 และ 0.01 dT (a- TE = AT * 1.0 + A-T3 * 0.3 + BT * 0.4 + B-T3 * 0.05 + cT * 0.1 + C-T3
* 0.01 + dT * 0.01)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

งานวาง . การวิเคราะห์ HPLC
โทคอลถูกตรวจตามวิธีการที่รายงานโดยลำปี et al . ( 2004 ) มีการปรับเปลี่ยน โทคอลถูกแยกจากกันโดยปกติเฟส HPLC โดยใช้เกรซ Altima HP ซิลิกา
150 _ 3 มม. 3 ไมครอนคอลัมน์และ quantified กับเรืองเครื่องตรวจจับ ( np-hplc – FLD ) ที่มีความยาวคลื่น 290 nm และกระตุ้นการปล่อยความยาวคลื่น 325 nm .
เฟสเคลื่อนที่ 14-dioxane / บีบ ( 2:98 , V / V ) ที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที แยกตามชนิดของโทคอล Isocratic ( ลำปี et al . , 2004 ) ปริมาณของวิตามินอีในบุคคล คือ จำนวนที่คำนวณโดยการใช้เส้นโค้ง
คือเพื่อสอบเทียบมาตรฐานทั้งหมด โทโคเฟอรอล ( T ) มาตรฐาน ( A - , B - , C - , d-t ) และโทโคไทรอีน ( T3 ) มาตรฐาน ( A - , B - , C - , d-t3 ) ซื้อจาก เคย์แมน เคมี
สหรัฐอเมริกา ในขณะที่บีบ , เอทิลอะซิเตท และ กรดแอสคอร์บิก dpph ( 2 , 2 - diphenyl-1-picrylhydrazyl ) จากธุรกิจจัดหาเคมี จำกัด , ออสเตรเลีย โซลูชั่นสินค้ามาตรฐานเตรียมที่จะสมาธิ
500 LG / ml ในเฮกเซน . เส้นโค้งสอบเทียบทั้งหมดคือเตรียมกว่าความเข้มข้น 1.0 –ช่วง 25.0 LG / ml โดยใช้ genstat 14 ( ลอสการเกษตรเชื่อถือ vsn อินเตอร์เนชั่นแนล จำกัดเฮเมิลสเตด , สหราชอาณาจักร ) การสกัดและข้าวบาร์เลย์คือมาตรฐานถูกฉีดเข้าไปใน HPLC เครื่องแยก การกำหนดยอดในตัวอย่างข้าวได้ตามการเวลา เมื่อเทียบกับยอดมาตรฐาน เส้นโค้งระหว่างยอดมาตรฐาน และมาตรฐานที่ใช้ในการคำนวณ
เนื้อหาเนื้อหาของสารอินทรีย์ในตัวอย่างข้าวบาร์เลย์ วิตามิน อี เนื้อหาแสดงในวัน a-tocopherol-equivalents ( TE ) , คำนวณตามกลุ่ม และ weihrauch
( 1979 ) โดยใช้กิจกรรมทางชีวภาพของ 1.0 สำหรับ a-t สำหรับ a-t3 0.3 , 0.4 สำหรับ b-t 0.05 สำหรับ b-t3 0.1 สำหรับ c-t 0.01 และ 0.01 สำหรับ c-t3 สำหรับ d-t ( - TE = a-t * 1.0 a-t3 * 0.3 b-t * 0.4 b-t3 * 0.05 0.1 c-t3 c-t *
* 0.01 0.01 d-t

* )